赵耘
- 作品数:96 被引量:556H指数:15
- 供职机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生哲学宗教更多>>
- 猪瘟病毒流行株与疫苗株主要抗原编码基因差异研究被引量:6
- 2001年
- 从全国 7个省市 1 2 0 0多份可疑猪瘟病料中分离出 9个猪瘟病毒 ( HCV)野毒株 ,编号分别为 HCV- 0 1~ 0 9。将 9株野毒分别通过 PK15细胞传 6代 ,测其毒价 ,并提纯做电镜观察 ,结果表明 :毒价范围在 1 0 -2~ 1 0 -7TCID50 ,电镜观察均可清晰地见到直径为 2 5~ 70 nm,略呈圆形的病毒颗粒 ,具有较完整的囊膜和纤突结构。从 9株野毒中选取 5株经猪瘟阴性猪各传 3~ 4代 ,测其毒力、病原性、致死性 ,结果表明 :各毒株在传代中其上述生物学特性上有变化和差别。用猪瘟兔化弱毒疫苗分别对这 5株野毒做免疫保护相关性试验 ,结果证明 :攻毒后的疫苗接种猪 1 0 0 %保护 ,而攻毒对照猪 1 0 0 %死亡 ,且对照猪在攻毒 1周后便出现猪瘟野毒感染 ,而免疫猪在整个观察期均未见到野毒感染。用不同剂量的猪瘟兔化弱毒细胞活疫苗分别接种不同妊娠期的怀孕母猪 ,从母猪所产 0~ 1 4日仔猪体内均未分离到猪瘟兔化弱毒 ,表明猪瘟兔化弱毒不通过胎盘垂直感染仔猪。将猪瘟野毒株、石门系强毒株、兔化弱毒株及 1 982年分离的郑州野毒等毒株进行主要抗原编码基因差异研究 ,结果表明 :猪瘟病毒可分为 2个基因组 6个基因亚组 ,HCV- 0 2、0 3、0 6、0 7等 4个野毒株与国内的 C株、石门强毒株、国外的 C株、日本 GPE株、ALD株、意?
- 王在时丘惠深郎洪武李博王琴赵耘
- 关键词:猪瘟病毒兔化弱毒基因差异疫苗株
- 细粒棘球蚴原头蚴可溶性蛋白质的SDS—PAGE及其Western印迹分析被引量:1
- 1998年
- 本文利用SDS—PAGE及Western印迹对细粒棘球蚴原头蚴可溶性蛋白进行了分析,结果其SDS—PAGE显示其共有29条蛋白多肽,主要成分为23、35、43、57、69和95KD。与羊阳性血清及犬阳性血清显色的条带分别为19条及12条,作用较强的条带分别为羊:35、40、43、57、69和95KD,犬:32、38、40、57和88KD。
- 赵耘张文宝张壮志哈斯也提齐普生
- 关键词:原头蚴细粒棘球蚴蛋白多肽
- 不同批猪瘟活疫苗中猪瘟兔化弱毒E2基因主要抗原编码区序列分析被引量:5
- 2001年
- 对 1 2批猪瘟活疫苗中的猪瘟兔化弱毒病毒 ,以 RT- PCR获得了 E2基因的主要编码区的大约 2 5 0 bp大小的节片 ,在 DNA star上对这些节片的 2 1 1 pb进行了测序 ,观察到这些节片的编码序列高度同源性。其核苷酸序列和氨基酸序列有 98.1 %~ 1 0 0 %相同 ,其中 9批完全一致 ,结果表明猪瘟兔毒疫苗株的分子结构极其稳定。
- 赵耘王在时王琴李博丘惠深
- 关键词:猪瘟活疫苗猪瘟兔化弱毒同源性E2基因抗原
- 一种猪瘟活疫苗的生产方法
- 本发明涉及一种猪瘟活疫苗的生产方法。本发明包括以下技术步骤:(1)猪瘟兔化弱毒株的克隆与鉴定;(2)克隆株种毒的繁殖;(3)生产用细胞的繁殖;(4)生产用病毒液的繁殖;(5)配苗、分装和冻干。本发明具有生产工艺简单、稳定...
- 戴志红王在时关孚时蒋卉李翠赵耘秦玉明
- 菌种保藏中的细菌鉴定方法被引量:21
- 2009年
- 综述了在菌种保藏工作中目前行业内使用的各种细菌鉴定方法,包括传统方法、仪器的自动化鉴定以及分子生物学方法,并简述了各种方法的原理和优缺点,以期能为行业同仁更好开展菌种保藏、鉴定工作提供帮助。
- 杜昕波赵耘李伟杰
- 关键词:菌种保藏细菌鉴定分子生物学方法
- 葡萄球菌肠毒素基因分型PCR检测技术的研究被引量:19
- 2008年
- 通过生物信息学分析,设计了不同基因型肠毒素检测引物;应用含溶菌酶的碱裂解法提取葡萄球菌DNA及梯度PCR方法提高了肠毒素检出率和特异性。从国内28株葡萄球菌分离株中共检测出14种不同型的肠毒素基因(sea-see、tsst-1、seg-sei、sek-sel、sen-seo、seq-ser和seu),未检测到sej和sem基因。毒素基因携带率为16.67%,同时携带4种及以上毒素基因的菌株有11株,占39.29%,其中sek、seq和sea毒素基因在所研究菌株中分布最广,分别占到15.50%、14.30%和10.70%。结果表明不同葡萄球菌菌株间毒素型的关联度不同,sek与seq,seb和sed,sec、sei、sen和seu基因型呈现密切相关,各型肠毒素的分布还与菌株分离来源有着密切联系。所建立的PCR方法可用于金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型和分布的研究。
- 李琳黄金海赵耘王聪明董艳娇王静思刘莹
- 关键词:金黄色葡萄球菌PCR
- 猪瘟病毒低温诱变疫苗Thiverval株感染性克隆的构建及病毒拯救被引量:5
- 2009年
- 采用高保真DNA聚合酶,分7个片段扩增猪瘟病毒(CSFV)Thiverval株全基因组序列,克隆至pMD18-T载体并测序。经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101,同时对病毒基因组5′和3′末端进行修饰,构建出含有T7启动子、榔头状(HH)核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T1-7。利用T7 RNA聚合酶将线性化重组质粒pAC/F101/T1-7体外转录成基因组RNA,再使用脂质体转染将体外转录RNA转染PK-15细胞。通过传代、RT-PCR、免疫过氧化物酶细胞单层试验鉴定,表明成功的从感染性克隆拯救出活病毒粒子。猪瘟病毒低温诱变疫苗"Thiverval"株感染性克隆的构建及病毒的成功拯救,为进一步研究CSFV疫苗株的致弱机制提供了重要工具。
- 范运峰赵启祖赵耘邹兴启徐璐张仲秋王琴宁宜宝
- 关键词:猪瘟病毒感染性克隆病毒拯救
- 猪瘟兔化弱毒抗体对不同野毒株体内外中和保护试验的相关性研究
- 本研究用细胞中和试验的方法测定猪瘟兔化弱毒(Hog cholera lapinised virus,HCLV)疫苗阳性血清对不同野毒的体外中和效价,测定了猪体内免疫抗体与免疫保护力的关系.本研究还拟通过体外检测,以判定动...
- 宋立王琴宁宜宝王在时赵耘范学政张广川沈青春丘惠深
- 关键词:猪瘟病毒免疫
- 文献传递
- 狐狸源致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及耐药性分析被引量:26
- 2012年
- 本研究通过生物学特性、16S rRNA基因和4种等看家基因的序列测定与分析,对分离自北京动物园死亡狐狸病变组织的1株细菌进行鉴定,并对其进行小鼠致病力试验及药物敏感性试验。结果显示:该细菌为革兰氏阴性杆菌,培养特性、理化反应与维氏气单胞菌温和生物型基本相同;根据16S rRNA基因和dnaJ、rpoD、gyrB、cpn60等看家基因的系统进化及其同源性分析,确定所分离的细菌与维氏气单胞菌属于同一系统发育分支,各基因同源性最高分别为97.6%~99.9%。分离菌株对CD-1小鼠有较强的致病作用,其半数致死量为2.8×105cfu/只;对氧氟沙星、头孢他啶等14种抗菌药物敏感,对青霉素G、克林霉素等9种抗菌药物耐药。
- 李伟杰赵耘刘燕岂晓鑫康凯陈敏
- 关键词:维氏气单胞菌系统发育分析药敏试验
- 一种猪瘟兔化弱毒活疫苗效力检验方法
- 本发明涉及一种猪瘟兔化弱毒活疫苗的效力检验方法。本发明包括以下技术步骤:(1)建立猪瘟兔化弱毒活疫苗的病毒效价测定方法;(2)通过实验证实病毒效价与兔体试验或与猪体试验之间的数量关系;(3)应用数量关系,对疫苗进行体外效...
- 戴志红王在时关孚时蒋卉李翠陆连寿温芳赵耘秦玉明
- 文献传递