荣义辉
- 作品数:110 被引量:358H指数:10
- 供职机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学机械工程生物学更多>>
- 一种全长扩增克隆HEV方法和HEV体外瞬时转染体系的建立被引量:1
- 2016年
- 目的建立HEV全长基因组扩增克隆和全长HEV RNA体外瞬时转染细胞方法和初步应用。方法取5例抗HEV IgG阳性患者血清,采用特异性引物逆转录HEV RNA为cDNA,设计通用的分段且相互重叠的PCR引物分步扩增,然后再分别将PCR产物进行重组PCR扩增,最终获得全长的HEV RNA cDNA产物片段。测序确定其序列,采用T-A克隆全长HEV cDNA序列,将HEV全长cDNA序列进行体外转录,提取转录后产物的RNA(去除DNA模板),获得高水平的HEV RNA产物,采用脉冲电流转染HepG2细胞,转染后24 h、48 h和96 h观察细胞上清HEV抗原分泌和HEV RNA载量。结果自Gen Bank获得约300条HEV全长基因组序列,设计了分段重组PCR方法,快速获得了HEV基因组全长序列;T-A克隆HEV全长基因组测序分析其序列,体外转录制备高纯度的HEV mRNA,通过电转方式转入HepG2细胞,在较短时间内检测出HEV RNA,有效地评价了HEV的体外表型。HEV抗原要先于HEV RNA出现;体外实验显示Ⅰ型和Ⅳ型HEV复制能力无明显差别,都在转染后48 h达到峰值。结论建立的分段重组PCR法扩增HEV全长基因组,体外电转细胞系后分泌HEV RNA,为后续HEV分子病毒学和表型耐药研究提供了条件。
- 信亮亮李冰荣义辉
- 关键词:戊型肝炎病毒HEPG2细胞瞬时转染体外
- 肝癌组织HNF4αmRNA定量检测方法的建立与初步应用
- 2017年
- 目的建立一种定量检测肝细胞癌(HCC)组织肝细胞核因子4α(HNF4α)m RNA的方法。方法取手术获得的HCC组织16例,提取总RNA,逆转录PCR扩增获得全长HNF4αm RNA对应c DNA产物,经TA克隆后,测序确认。根据获得序列,设计检测HNF4αm RNA引物及MGB荧光探针。以体外转录HNF4αm RNA为标准品,建立一步法逆转录荧光定量PCR检测方法,同时设定β-actin m RNA为内参对照,最终计算得到组织HNF4αm RNA水平。采用免疫组化染色检测HNF4α蛋白表达,比较HNF4αm RNA水平与HNF4α蛋白表达的对应结果。结果 HCC组织HNF4αm RNA定量标准曲线斜率为-3.237,相关系数r值达0.994,β-actin m RNA定量标准曲线斜率为-3.037,相关系数r值为0.996,表明建立的方法可用于检测HNF4αm RNA定量(V-4α值),16例HCC组织HNF4αm RNA与HNF4α蛋白表达结果呈一致性对应关系。结论我们初步成功建立了定量检测HCC组织HNF4αm RNA水平方法,其意义还需要进一步研究。
- 张伟董政孔慧芳张百龙毛威高旭东荣义辉
- 关键词:肝细胞癌肝细胞核因子4Α
- 六味五灵片治疗酒精性肝炎的疗效观察被引量:21
- 2009年
- 目的观察六味五灵片治疗酒精性肝炎(alcoholic steatohepatitis,ASH)的临床疗效。方法68例ASH患者随机分为2组。治疗组36例,口服六味五灵片3片(3/d),第4个月为3片(2/d),第5个月为2片(2/d),第6个月为2片(1/d),对照组32例,口服硫普罗宁片200mg(3/d),疗程均为24周。结果与治疗前比较,治疗24周后治疗组及对照组在ALT、AST、ALP、GGT、TC、TG水平下降和B超影像学改善方面差异均有统计学意义(P<0.01)。以上指标进行组间比较,在ALT、AST、ALP、GGT水平下降及B超影像学改善方面,治疗组优于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05),而TC、TG水平下降在2组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论六味五灵片及硫普罗宁片治疗ASH在以上观察指标均有改善;在ALT、AST、ALP、GGT水平下降及B超影像学改善方面,六味五灵片均优于硫普罗宁片。
- 荣义辉董政朱冰游绍莉刘鸿凌辛绍杰
- 关键词:酒精性肝炎六味五灵片
- 人细胞系生物人工肝支持系统治疗慢加急性肝衰竭患者的初步研究
- 目的利用自行构建的混合生物人工肝支持系统,探讨其治疗肝衰竭患者的安全性和有效性。方法采用转染人肝再生增强因子(hALR)的Hep G2细胞为生物材料构建生物反应器,利用慢加急性肝衰竭患者作为治疗对象,随机分组进行混合生物...
- 游绍莉刘鸿凌荣义辉朱冰刘婉姝貌盼勇辛绍杰
- 关键词:慢加急性肝衰竭生物人工肝支持系统细胞系
- 文献传递
- 肝结核6例诊断分析被引量:1
- 2012年
- 在肺外结核中,肝结核在临床上较少见,而且由于缺乏典型的临床特征,较难确诊。2002年1月一2012年1月,我院经病理检查明确诊断肝结核6例,我们对其临床资料进行了回顾分析。现报告如下。
- 游绍莉朱冰臧红荣义辉张爱民万志红辛绍杰
- 关键词:肝结核
- 提高中国临床Alagille综合征的认识——3例儿童Alagille综合征临床病理分析
- 目的分析Alagille综合征的临床病例特点。方法自7206例肝穿组织中收集3例ALagille综合征患儿,均为男性,出生即出现症状,确诊年龄(3岁3个月-4岁11月),进行临床、病理和基因学检查分析。结果 3例ALGS...
- 周光德荣义辉刘树红朱莉郭超楠蒋丽娜张潇赵景民
- 关键词:ALAGILLE综合征儿童
- 文献传递
- HBV基因变异与疾病进展相关性及其对特异性CTL表位影响的研究
- 荣义辉许智慧刘妍李晓东刘立明徐东平辛绍杰
- 淤胆型肝炎160例临床特征分析被引量:1
- 2016年
- 淤胆型肝炎约占病毒性肝炎的2%[1],患者长时间重度黄疸,长期淤胆未缓解者可能转化为肝硬化或重型肝炎。目前,淤胆型肝炎的发病机制尚不清楚,近年来其发病率有增高趋势。近期,我们回顾分析了我院2010年4月—2015年2月收治的淤胆型肝炎160例,分析其发病原因、临床特征、诊断及转归等情况,以期为本病的防治提供参考。现报告如下。
- 张丹于浩荣义辉
- 关键词:淤胆型肝炎
- 人细胞系生物人工肝支持系统治疗慢加急性肝衰竭患者的初步研究
- 生物人工肝应用培养的肝细胞建立生物反应器,为肝衰竭患者代偿肝脏的解毒、合成功能以及稳定内环境提供了可能,为肝细胞再生提供条件和时间。目前临床采用的治疗模式均为“在线”治疗方式,即治疗期间,体外血液始终与患者血液循环相连,...
- 游绍莉刘鸿凌荣义辉朱冰刘婉姝貌盼勇辛绍杰
- 关键词:生物人工肝肝衰竭血浆置换
- 表达人肝再生增强因子肝细胞系生物人工肝治疗安全性的动物实验初步研究
- 2011年
- 目的:评价表达人肝再生增强因子基因的HepG2细胞系的细胞培养上清及细胞裂解物的小鼠急性毒性和近期致瘤性。方法:SPF级昆明种小鼠18只,随机分为空白对照组、细胞培养上清组、细胞裂解物组,每组小鼠各6只,腹腔分别接种空白培养液、细胞培养上清、细胞裂解物0.5ml。连续14天,每天观察记录动物毒性反应,14d后宰杀小鼠,取血测血生化指标,及观察病理改变。结果:各组小鼠均存活。除对照组1例小鼠,细胞培养上清组1例小鼠,细胞裂解物组2例小鼠次日活动稍减少外,均未见异常反应。血液生化检测ALT、AST、AFP、TBIL无明显异常,且各组间无差别。普通光镜下各组动物肝脏病理切片染色均未见明显异常。结论:目的细胞系细胞培养上清、细胞裂解物对实验用昆明小鼠无明确毒副作用及短期致瘤性,可能提供一种安全的可用于生物人工肝新的细胞来源。
- 朱冰游绍莉刘鸿凌荣义辉常彬霞辛绍杰
- 关键词:肝细胞生物人工肝动物实验