聂淑晶
- 作品数：3 被引量：22H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究被引量：12
- 2008年
- 采用基因组步移和巢式PCR方法研究了转基因油菜雄性不育恢复系RF1外源基因插入位点序列特征,并根据此特征建立了RF1转化事件特异性检测方法。从RF1基因组DNA中分离到外源基因插入位点的左边界旁侧序列798bp,包括335bp的插入载体序列和463bp的旁侧基因组序列。根据已发表的RF1右边界旁侧序列的信息,发现外源T-DNA在向油菜基因组整合的过程中,在整合位点处有75bp的基因组序列丢失。根据分离的RF1左边界旁侧序列,建立了RF1事件特异性定性检测方法,扩增片断大小为284bp。利用建立起来的RF1事件特异性定性检测方法可以准确的将转基因油菜RF1与其它的转基因油菜品种区分开,检测灵敏度达到5个拷贝(0.013%)。该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因油菜品种RF1的身份识别提供了有效的方法。
- 聂淑晶武玉花吴刚肖玲卢长明
- 关键词：GMO
- 植物源内含子对GUS基因表达模式的影响被引量：6
- 2008年
- 采用报告基因的瞬间表达来优化转化体系是提高农杆菌介导法转化效率的重要手段,GUS以稳定、易于定性定量分析等独特优点成为瞬间表达体系的首选。pCaMV 35S启动下的GUS基因可在农杆菌中表达,另外还首次报道该嵌合基因同时也可在大肠杆菌中高效表达。为避免GUS基因在农杆菌中的表达对瞬间表达体系的影响,一拟南芥蛋白基因的内含子被插入到GUS基因的编码区,进而构建了含内含子的GUS植物表达载体pBI121-GUSint。组织化学染色结果表明,GUSint在农杆菌中没有表达,而在接种3d的油菜中可高效瞬间表达,其中在子叶柄(带子叶)中瞬间表达率高达100%,这一方面证实载体构建成功,另一方面也为进一步优化油菜及其它芸薹属植物转化体系及在油菜中快速研究目的基因的功能和表达调控模式奠定了基础。
- 邹智吴刚肖玲武玉花聂淑晶肖娜卢长明
- 关键词：GUS内含子根癌农杆菌甘蓝型油菜
- 转基因油菜转化事件特异性检测技术
- 根据我国法律，未经安全评价的油菜产品不容许进口和在我国种植。进入产业化的转基因品种需要建立检测和监测方法。2004年，我国允许拜耳公司研发的6个转基因油菜品种(MS1×RF1、MS1×RF2、MS8×RF3、OXY235...
- 聂淑晶
- 关键词：转基因油菜安全管理特异性检测
- 文献传递
