程中良
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：上海市科委医学引导类科技项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人脐带间充质干细胞对低氧环境下的肾小管上皮细胞中肝细胞生长因子(HGF)表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:肾脏的急性缺血缺氧性损伤是泌尿外科常见病,以肾小管间质纤维化为主要病理特点,成体干细胞在急性肾脏损伤动物模型中可以促进肾脏结构修复、改善肾脏功能,肝细胞生长因子作为抗纤维化的主要生长因子,在成体干细胞干预的急性肾脏损伤动物模型实验中起重要作用,然而以往的研究对象主要以动物模型为主,成体干细胞对肝细胞生长因子的具体调节机制尚不清。本实验通过体外分离、培养人的脐带间充质干细胞,来干预离体低氧预处理后的大鼠近端肾小管上皮细胞,探讨在体外培养条件下人脐带间充质干细胞对低氧预处理大鼠近端肾小管上皮细胞肝细胞生长因子表达的影响,为今后研究间充质干细胞治疗肾功能损害提供可靠的理论依据。方法:采用贴壁培养的方法无菌条件下分离、培养、传代人脐带间充质干细胞,细胞融合达90%时更换无血清培养基(serum-free medium,SFM)培养24 h,收集细胞上清液即为人脐带间充质干细胞条件培养基(condition medium,CM);大鼠近端肾小管上皮细胞(tubular epithelial cells,TECs)于低氧环境处理1 h后,随机分为对照组与CM干预组,分别培养24 h和48 h后检测TECs中大鼠肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的mRNA水平、收集上清液测定大鼠HGF蛋白的含量,同时收集CM干预组中0h,12h、24h、48h的上清液,测定其中人来源HGF蛋白的含量,并对TECs在CM干预24 h和48 h后行免疫组化定性人的HGF蛋白的表达。结果:在低氧预处理的培养环境下,CM干预组中,TECs中大鼠来源的HGF mRNA表达水平在24 h和48 h时明显高于对照组(P<0.05);上清液中大鼠HGF蛋白的含量在24 h和48 h,CM干预组显著高于对照组(P<0.05);上清液中人的HGF蛋白的含量随时间进行性增高,免疫组化染色显示在24 h和48 h大鼠TECs中能检测人的HGF蛋白的表达。结论:在低氧预处理的体外培养环境下,脐带间充质�
- 邹翔宇杜涛程中良琚官群苗帅朱英坚刘国华
- 关键词：人脐带间充质干细胞肝细胞生长因子
- 腹膜间皮细胞与聚羟基乙酸的细胞相容性研究被引量：1
- 2013年
- 目的:研究腹膜间皮细胞(Peritoneal mesothelial cell,PMC)与可吸收生物材料聚羟基乙酸(Polyglycolicacids,PGA)的相容性,为组织工程化尿道的构建奠定基础。方法:采用酶消化法,从SD大鼠腹腔中分离出PMC,常规传代,取第2代细胞与PGA混合培养,形成细胞-生物材料复合物。每两天换液1次,观察细胞形态和黏附生长状况。体外培养1周后,行扫描电镜观察和RT-PCR检测。结果:复合物体外培养1周后,PMC能成功黏附在PGA支架上,并分泌大量细胞外基质。RT-PCR提示CK-AE1/AE3和Vimentin均呈阳性表达,PMC表型未发生改变。结论:PMC与PGA有良好的细胞相容性,PGA可作为组织工程化腹膜样组织的支架材料。
- 程中良琚官群邹翔宇吴帅苗帅朱英坚
- 关键词：腹膜间皮细胞聚羟基乙酸生物相容性
- 脐静脉内皮细胞来源的微囊泡促进腹膜样组织血管化的初步研究
- 2012年
- 目的探讨人脐静脉内皮细胞(hUVECs)来源的微囊泡(MVs)促进大鼠腹膜间皮细胞(rPMC)增殖及促进组织工程化腹膜样组织血管化的作用。方法采用胶原酶消化法获得hUVECs,无血清培养法刺激释放MVs,并对MVs行电镜检测。rPMC与hUVECs来源的MVs体外共培养,对细胞及上清液分别行CCK、ELISA和RT-PCR检测。将rPMC种植在小肠粘膜下层(SIS)表面,分别与加入MVs的培养基和单独培养基预培养1周后,植入裸鼠皮下;2周后取出移植物行HE染色,镜下观察。结果透射电镜下可以看到有完整的膜结构的hUVECs分泌的MVs。加入MVs组与对照组相比,能明显促进rPMC增殖(P<0.05),同时在上清液中加入MVs组VEGF浓度明显高于对照组(P<0.05)。分别对两组rPMC行VEGF的RT-PCR检测,加入MVs组比对照组表达明显增高。对取出的移植物行HE染色,加入MVs组和对照组相比,可见新生的微血管密度明显增高(P<0.05)。结论 hUVECs来源的MVs能够明显促进rPMC的增殖,诱导rPMC产生VEGF高表达,刺激组织工程化腹膜样组织血管化,为以腹膜间皮细胞作为尿道组织工程种子细胞和大范围尿道缺损修复提供了理论基础。
- 程中良邹翔宇吴帅琚官群朱英坚
- 关键词：腹膜间皮细胞血管化
