石敏
- 作品数:4 被引量:6H指数:1
- 供职机构:四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划四川省应用基础研究计划项目更多>>
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- 血管瘤型J亚群禽白血病病毒全基因组核酸序列分析及gp85基因的原核表达
- J亚群禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus Subgroup J, ALV-J)属于反转录病毒,能够诱发本地鸡和野生禽类产生肿瘤、生长迟缓、免疫抑制等,给养禽业带来了巨大的经济损失和严重威胁。J亚群禽白...
- 石敏
- 关键词:原核表达
- 文献传递
- 鸡痘病毒和葡萄球菌混合感染的病原分离与鉴定被引量:1
- 2010年
- 通过对四川雅安市某肉鸡场疑似鸡痘病毒与细菌病混合感染的病鸡材料进行病毒和细菌的分离,获得一株病毒和一株细菌。分离的病毒毒株通过半套式PCR鉴定为鸡痘病毒,细菌菌株通过革兰氏染色和生化试验鉴定为葡萄球菌。药物敏感性试验筛选出此葡萄球菌的敏感药物为丁胺卡那霉素。结合此病爆发的临床症状和流行病学特征,诊断为鸡痘病毒与葡萄球菌的混合感染。
- 田明星赵芳芳石敏曹三杰文心田黄勇
- 关键词:葡萄球菌
- J亚群禽白血病病毒四川株SCMS1的分离及其囊膜基因序列分析被引量:3
- 2011年
- 为研究四川首例分离株SCMS1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜(env)基因是否产生新的变异,本实验通过将病毒接种鸡胚成纤维细胞、RT-PCR及PCR检测技术,对包括env基因和部分3'UTR在内的片段进行PCR扩增、克隆和序列测定。结果发现该病毒gp85基因出现6个碱基的缺失,与HPRS-103原型株6995位~7242位对应的核酸序列也发生248个碱基的缺失,包括整个rTM区域。这些碱基的缺失在病毒致病性变化中可能具有潜在的意义。
- 石敏田明星王远萍邹年莉林艳余冲赵芳芳李敏黄勇
- 关键词:J亚群禽白血病病毒ENV基因
- 禽网状内皮增生病毒囊膜基因gp90的克隆表达及ELISA方法的初步建立被引量:1
- 2011年
- 根据禽网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)SNV株前基因组cDNA序列,经生物信息学分析,设计并合成引物,以四川分离株REV-SC1为模板,扩增囊膜基因gp90抗原性、亲水性较高的121~1 023 bp基因片段;将目的基因克隆至pMD-19T载体,进行测序和比对;将基因片段按正确的阅读框架定向克隆至pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,包涵体洗涤纯化,探讨以重组gp90蛋白为包被抗原初步建立检测REV的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法.结果表明:1)REV-SC1株gp90核苷酸序列与在GenBank上已发表序列的同源性最高为99%,于231位、870位发生了2个碱基突变;2)SDS-PAGE分析表明表达蛋白分子质量约为45 ku,与预期分子质量大小相符;免疫印迹(Western-blot)结果表明重组蛋白具有生物学活性;3)间接ELISA检测方法的最佳抗原包被质量浓度为1.5 mg·mL-1,一抗稀释度为1∶320,临界值为0.126;特异性、敏感性试验结果良好.综上,本试验成功表达了REVgp90蛋白,并对其在ELISA检测方面的应用作了初步探讨.
- 余冲黄勇田明星石敏李敏赵芳芳
- 关键词:GP90基因克隆表达间接酶联免疫吸附试验