白灏
- 作品数：20 被引量：84H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- AI-2对鸭疫里氏杆菌粘附入侵Vero细胞及其相关基因转录水平的影响
- 自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)作为细菌间的通用自诱导信号分子,参与细菌众多生理功能的调控。本研究通过开展AI-2在鸭疫里氏杆菌(Riemerella antatipestifer,RA)C...
- 刘蕾韩先干刘瑞白灏董洪亮丁铲刘海文于圣青
- rmlA基因缺失影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成被引量：5
- 2013年
- 【目的】构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)rmlA基因缺失株,研究该缺失株的生物学特性。【方法】利用Red重组系统构建rmlA缺失株;比较野生株与缺失株在生长特性、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异;运用Real-time PCR技术,比较野生株与rmlA缺失株对APEC部分毒力基因转录的影响。【结果】rmlA缺失株,不影响APEC的生长和运动特性,但生物被膜形成能力显著增强,且使luxS、irp2基因转录水平分别上调2倍、1.8倍,iucD、fyuA则下调25倍。【结论】APEC的rmlA基因可以影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成能力及部分毒力基因的转录水平;而对APEC的生长、运动特性没有影响。
- 韩月韩先干白灏王少辉孟庆美丁铲于圣青
- 关键词：基因缺失生物被膜
- 禽致病性大肠杆菌gspL基因缺失株构建及生物学特性被引量：3
- 2015年
- 【目的】研究gsp L基因缺失对禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)生物学特性的影响。【方法】利用Red重组方法构建禽致病性大肠杆菌DE17株的gsp L缺失株;分析野生株与缺失株的生长特性、黏附和入侵DF1细胞的差异;采用荧光定量PCR的方法比较野生株和缺失株毒力基因转录水平的变化;比较野生株与缺失株的半数致死量(LD50)差异。【结果】gsp L缺失不影响DE17的生长特性,但其黏附和入侵DF1细胞能力显著下调。荧光定量PCR检测结果表明,缺失株毒力基因lux S,pfs,fyu A和iss转录水平明显上调,tsh的转录水平明显下调,而vat,ibe A,stx2f和omp A的转录水平无显著变化;LD50检测结果表明,缺失株比野生株毒力增强了12倍。【结论】gsp L基因的缺失不影响禽致病性大肠杆菌的生长特性,但能减弱其黏附和入侵能力,且可以正调控禽致病性大肠杆菌部分毒力基因的转录水平,推测gsp L基因可能与APEC对宿主的致病性有关。
- 范国博韩月张宇曦韩先干王少辉白灏孟庆美祁克宗丁铲于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌
- AI-2对鸭疫里氏杆菌粘附入侵Vero细胞及其相关基因转录水平的影响被引量：2
- 2013年
- 【目的】自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)作为细菌间的通用自诱导信号分子,参与细菌众多生理功能的调控。本研究通过开展AI-2在鸭疫里氏杆菌(Riemerella antatipestifer,RA)CH3株对非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)的粘附、入侵以及对RA相关基因调控作用的研究,为进一步研究AI-2对RA的调控作用奠定基础。【方法】在CH3(血清型1型)对Vero细胞的粘附、入侵过程中加入不同浓度的AI-2,研究其对CH3粘附、入侵Vero的影响;在添加184.0μmol/L AI-2的胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)中培养RA CH3菌株,利用real-time PCR来检测AI-2对RA相关基因转录水平的影响。【结果】结果表明,AI-2浓度为18.4μmol/L时,AI-2对CH3粘附Vero细胞的抑制性最强,为62%,当AI-2浓度为184.0μmol/L时,AI-2对CH3入侵Vero细胞的促进性最强为194%。荧光定量PCR结果表明AI-2对部分基因的转录有促进作用,对部分基因的转录有抑制作用。【结论】AI-2参与调控RA粘附、入侵Vero细胞及RA毒力因子、免疫原性蛋白基因以及代谢相关基因转录水平的调控。
- 刘蕾韩先干刘瑞白灏董洪亮丁铲刘海文于圣青
- 关键词：鸭疫里氏杆菌粘附入侵REAL-TIMEPCR
- 禽致病性大肠杆菌安徽分离株luxS和pfs基因的克隆、表达与细胞外合成AI-2活性检测被引量：14
- 2012年
- 【目的】LuxS/AI-2型密度感应系统存在于革兰氏阴性和阳性菌中,可产生用于细菌种间交流的通用自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2),细菌许多生理功能都受此系统的调节。本研究开展对禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)自诱导信号分子AI-2的检测和建立体外合成、定量的方法,为进一步研究APEC的AI-2调控作用奠定基础。【方法】利用哈维弧菌BB170(Vibrio harveyi BB170)开展对APEC AI-2的检测;利用表达、纯化的LuxS和Pfs在体外催化S-腺苷同型半胱氨酸(Sadenosylhomocysteine,SAH),进行AI-2的体外合成。【结果】APEC能产生自诱导信号分子AI-2;成功表达可用于AI-2合成的可溶性重组蛋白LuxS和Pfs;纯化的重组蛋白LuxS和Pfs与SAH同时作用后,合成了浓度为300μmol/L的AI-2;运用哈维弧菌BB170对合成的AI-2活性检测表明,其活性是阴性对照的700倍。【结论】APEC存在LuxS/AI-2型密度感应系统,APEC的LuxS和Pfs可以在体外催化SAH生成有活性的AI-2分子。本研究为进一步研究APEC的AI-2的调控作用奠定基础。
- 韩先干白灏刘蕾陈文静丁铲胡青海祁克宗于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌密度感应系统LUXS
- 禽致病性大肠杆菌luxS基因缺失突变株的构建及部分生物学特性的分析
- 本文利用禽致病性大肠杆菌AI-2的检测及其因素的分析，探讨了APEC中是否存在LuxS/AI-2型密度感应系统，为防控APEC 感染,从细菌群体角度提供了新的思路,为进一步研究密度感应系统对APEC的调控功能和机理提供参...
- 白灏祁克宗于圣青韩先干邵颖
- 关键词：禽致病性大肠杆菌基因缺失生物学特性密度感应系统
- 影响禽致病性大肠杆菌信号分子AI-2产生的因素分析被引量：8
- 2013年
- 【目的】探讨禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)在不同生长时期和不同培养条件下,信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)的合成与luxS和pfs的转录水平之间的关系。【方法】利用哈维弧菌BB170(vibrio harveyi BB170)检测不同生长时期和不同培养条件下APEC的AI-2活性。同时利用Real-time PCR检测APEC不同生长时期和不同培养条件下luxS和pfs的转录水平。【结果】APEC在不同生长时期的AI-2活性与luxS的转录水平保持一致。培养基中加入葡萄糖,麦芽糖和NaCl后,AI-2活性和luxS转录水平都上调,加入蔗糖后则都下调,两者保持一致性。AI-2活性与pfs的转录水平则并不一致。【结论】APEC的AI-2产生水平与luxS的转录水平有高度的相关性,而与pfs的转录水平没有显著相关性;葡萄糖、麦芽糖和NaCl,促进AI-2的合成。
- 白灏韩先干刘蕾祁克宗刘海文丁铲于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌LUXSPFSREAL-TIMEPCR
- LuxS/AI-2型密度感应系统对禽致病性大肠杆菌的调控研究
- 禽大肠杆菌病是由禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)引起的严重影响养禽业的传染病之一。LuxS/AI-2型密度感应系统广泛存在于革兰氏阴性和阳性菌中,可产生用于...
- 白灏
- 关键词：禽致病性大肠杆菌生物被膜毒力基因
- 禽致病性大肠杆菌江苏、安徽分离株的生物学特性分析被引量：25
- 2013年
- 【目的】研究禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)江苏、安徽分离株的优势血清型,并分析其生物学特性。【方法】对分离自病禽的细菌进行鉴定,采用玻片凝集法测定禽致病性大肠杆菌的血清型,PCR方法检测14种毒力基因的分布,采用美国临床和实验室标准化研究所的方法进行药物敏感性检测,改良结晶紫半定量法检测分离细菌的生物被膜形成能力。【结果】共分离到禽致病性大肠杆菌56株,血清型检测结果表明,O78血清型占64.29%,为主要血清型。毒力基因检测显示,fimC、pfs、ompA和luxS的阳性率超过90%。药物敏感性检测显示,58.93%的菌株对8种以上的药物耐受。生物被膜检测显示,有16株细菌生物被膜形成能力为中等以上,其中68.75%的菌株耐8种以上的药物。【结论】O78为主要流行的血清型。fimC、pfs、ompA和luxS基因为APEC保守基因。多重耐药性仍很普遍,细菌生物被膜与耐药性具有相关性。
- 白灏冀辉韩先干龚建森董洪亮丁铲祁克宗于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌血清型毒力基因生物被膜
- rmlA基因缺失影响禽致病性大肠杆菌的生物被膜形成
- 构建禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)rmlA基因缺失株,研究该缺失株的生物学特性[1].利用Red重组系统构建rmlA缺失株[2,3]；比较野生株与缺失株在...
- 韩月韩先干白灏王少辉孟庆美丁铲于圣青
