王静雪 作品数:106 被引量:220 H指数:9 供职机构: 中国海洋大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
来源于副溶血弧菌噬菌体的内溶素及其应用 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种来源于副溶血弧菌噬菌体的内溶素及其应用。一种来源于副溶血弧菌噬菌体的内溶素,其氨基酸序列为SEQ ID No:1所示的全部或部分氨基酸序列。经过序列结构分析,显示该酶为噬菌体中的能够裂... 王静雪 林洪 王伟宇文献传递 荧光光素酶:氧化还原酶体外发光体系的建立 本发明涉及一种荧光光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光条件的确定,特别是涉及一种存在于海洋发光细菌胞内荧光光素酶:FMN-NADH氧化还原酶在细胞外的发光表达。本发明的目的是建立一种荧光光素酶:FMN-NADH氧化... 王静雪 林洪 朱兰兰文献传递 副溶血弧菌噬菌体调控外周血单核细胞中IL-1β、IL-6、CD14的表达 被引量:1 2020年 目的观察高度纯化的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)噬菌体Qdvp001和Vpp1对外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)表达IL-1β、IL-6、CD14免疫基因的调控。方法①对噬菌体Qdvp001和Vpp1进行纯化;②分别用噬菌体低滴度组、中滴度组、高滴度组,Vp17802组和对照组作用于PBMCs后,用MTT比色法检测细胞增殖活性;③选取噬菌体中滴度组、Vp17802组、噬菌体+Vp17802组和对照组作用于PBMCs后,RT-PCR检测IL-1β、IL-6、CD14基因mRNA的变化。结果分别经两次纯化后,Qdvp001内毒素含量降低了644倍,Vpp1内毒素含量降低了652倍。噬菌体低、中、高滴度组作用于PBMCs一段时间后,细胞的增殖活性与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比两种噬菌体对IL-1β和IL-6以及CD14的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。与细菌组相比,噬菌体Qdvp001+Vp17802组先促进后抑制IL-1β的表达(P<0.05),一直抑制IL-6和CD14的表达(P<0.05);噬菌体Vpp1+Vp17802组一直抑制IL-1β和IL-6以及CD14的表达(P<0.05)。结论高度纯化的副溶血弧菌噬菌体对PBMCs增殖活性无明显影响且能够调节细菌引起的免疫应答。 李婧雯 王静雪关键词:外周血单核细胞 副溶血弧菌噬菌体 增殖活性 一种宽裂解谱沙门氏菌噬菌体及其抑菌应用 本发明涉及一株噬菌体及其抑菌应用,尤其是一株宽裂解谱沙门氏菌噬菌体及其抑菌应用,属于生物工程领域。一株宽裂解谱沙门氏菌噬菌体,保藏号为:CCTCC NO:M2014145,保藏日期为2014年4月24日,该噬菌体对沙门氏... 王静雪 林洪 李梦哲 李萌用于水产品中氯霉素残留检测的发光细菌的筛选 被引量:2 2008年 从青岛近海分离鉴定出5株发光细菌,经过16SrDNA 测序及生理生化实验鉴定,分属明亮发光杆菌(DB)、鳆发光杆菌(YL)、哈维弧菌(BA)、灿烂弧菌(GQ)、费氏弧菌(GX)。发光性质及其发光规律曲线的测定表明,鳆发光杆菌和明亮发光杆菌发光规律稳定,持续发光时间长,发光强度大。所得鳆发光杆菌、哈维弧菌、灿烂弧菌、费氏弧菌的发光规律曲线国内未见报道。进行了各菌种的氯霉素抑菌圈实验,发现5株发光细菌对氯霉素都敏感,鳆发光杆菌 YL 最敏感。用发光细菌 YL 检测了南美白对虾中的氯霉素,其前处理方法比水产行标气相色谱法简便省时,乙酸乙酯提取氯霉素可以有效降低它族抗生素的干扰。发光细菌法检测南美白对虾的方法检出限为0.16μg/kg,低于气相色谱的0.30μg/kg。 朱兰兰 王静雪 林洪 王亚群 王晶 梅册霞关键词:氯霉素 发光细菌 海洋弧菌QJH-12发酵产琼胶酶条件的优化 被引量:12 2007年 从中国南海海域分离到了一株具有较高琼胶降解活性的弧菌Vibrio sp.QJH-12,该菌株为革兰氏阴性菌,呈弯曲杆状,极生单根鞭毛,氧化酶阳性,过氧化氢酶阳性,O/129试验阳性。在琼胶平板上生长可软化琼胶,并在菌落周围产生凹陷。通过单因子实验和正交实验确定了培养基的最佳组成:琼胶2.0‰,柠檬酸三铵1.0‰,K2HPO41.0‰,NaCl1.0%。确定该菌株的最适发酵产酶条件:装液量为250mL的三角瓶中装入125mL的液体发酵培养基,培养基起始pH6.5,摇瓶转速150r/min,30℃发酵培养26h,发酵液的酶活力达到332U/mL。结果表明,该菌株从产酶活力和发酵特点等各方面具备工业化开发的潜力。 王静雪 江晓路 牟海津 管华诗关键词:海洋弧菌 琼胶酶 培养基 发酵条件 沙门氏菌噬菌体制剂及其制备方法 本发明涉及一种噬菌体制剂,尤其是一种沙门氏菌噬菌体制剂及其制备方法,属于生物工程领域。一种沙门氏菌噬菌体制剂,该制剂由保藏号为:CCTCCNO:M 2014145的噬菌体以沙门氏菌为宿主菌发酵制得。本发明通过探索沙门氏菌... 王静雪 林洪 李梦哲 李萌文献传递 大肠杆菌产外膜囊泡在制备抗噬菌体感染制剂中的应用 本发明属于生物技术领域,具体涉及大肠杆菌产外膜囊泡在制备抗噬菌体感染制剂中的应用。本发明通过构建胞外囊泡过量表达突变株大肠杆菌MG1655△nlpI△tolA,超速离心法分离纯化获得胞外囊泡,并将其作为制剂加入至工业发酵... 王静雪 玄冠华 卢狄 林洪重组大肠杆菌制备副溶血弧菌噬菌体内溶素Lys qdvp001 CHAP域及诱导条件初步优化 被引量:1 2018年 目的:为了利用噬菌体内溶素防控副溶血弧菌,通过克隆表达工程菌pET30a-CHAP制备目的蛋白,并将以包涵体存在的目的蛋白复性得到有活性的噬菌体内溶素蛋白。方法:首先克隆工程菌pET30a-CHAP,经IPTG的诱导表达后,检测菌液上清中内溶素含量判断表达形式,再进行诱导条件初步优化。通过将表达的pET30a-CHAP包涵体蛋白先用洗涤剂洗涤去除杂蛋白,然后用尿素变性剂溶解,并用Ni^(2+)Sepharose^(TM)6 Fast Flow亲和层析柱进行层析纯化,用EDTA、氧化型谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽等为折叠复性促进剂,经过透析制备可溶性的pET30a-CHAP蛋白,再检测目的蛋白的抑菌活性。结果:本实验确定了重组菌内溶素的表达形式为没有活性的包涵体;初步确定最佳诱导条件为诱导温度为16℃,IPTG终浓度0.5 mmol/L,诱导时间为7 h;复性后的内溶素具有抑菌活性。结论:本研究为利用内溶素防控副溶血弧菌以及其他革兰氏阴性细菌提供了制备方法。 鞠晓晨 吕新伟 王静雪 林洪关键词:副溶血弧菌 副溶血弧菌噬菌体 包涵体复性 利用发光细菌进行褐牙鲆中氯霉素残留快速检测的研究 被引量:15 2007年 从青岛近海分离鉴定出1株鳆发光杆菌(Photobacterium leiognathi)YL,发光性质及其发光规律曲线的测定表明,鳆发光杆菌发光规律稳定,持续发光时间长,发光强度大。各种抗生素的抑菌圈试验得出,鳆发光杆菌YL对氨零素最敏感。在浓度0~1.0μg/L,氯霉素的浓度与鳆发光杆菌的抑制发光率有良好的线性关系。采用乙酸乙酯提取氯霉素的方法可以有效降低它族抗生素的干扰。褐牙鲆加标回收试验中,鳆发光杆菌检测氯霉素残留的方法检出限为0.14μg/kg。 朱兰兰 林洪 王静雪 王亚群 梅册霞关键词:氯霉素 发光细菌 褐牙鲆