王述超
- 作品数:6 被引量:10H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 我国部分农村居民狂犬病预防知识的调查
- 目的了解我国农村居民对狂犬病知识的认知情况,为进一步普及狂犬病知识和开展狂犬病防治工作提供科学依据。方法 2010年1月,用自制问卷对河北、河南、湖北三省不同农村的养犬户进行随机抽查,了解他们对狂犬病知识的知晓状况。结果...
- 赵娜王述超米立娟孙程龙刘晔王颖张守峰扈荣良
- 关键词:狂犬病问卷调查免疫预防农村居民
- 文献传递
- 狂犬病病毒磷蛋白单抗的制备与应用
- 2014年
- 以灭活的狂犬病病毒CVS株细胞毒免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA法和Western-blot筛选获得针对磷蛋白的单克隆抗体4株:1C9、4B10、2G12、4G5,其中1C9针对氨基端保守表位。以亲和层析法纯化1C9单抗腹水,异硫氰酸荧光黄标记制备荧光抗体。以1C9磷蛋白荧光抗体与本实验室研制的狂犬病核蛋白免疫荧光抗原检测试剂盒,对本实验室收集的501份疑似狂犬病鼬獾、蝙蝠、犬和黄鼬的脑组织样品进行直接免疫荧光平行检测。结果显示,两种检测手段对基因1型狂犬病毒的检出结果完全一致,而蝙蝠源Irkut病毒仅能以磷蛋白单抗1C9检出。本研究成功获得了与我国现有不同基因型狂犬病毒良好反应的抗狂犬病磷蛋白单抗,并应用于狂犬病的直接免疫荧光检测,为狂犬病诊断提供了敏感性和可靠性良好的诊断试剂。
- 米立娟张守峰刘晔王述超扈荣良
- 关键词:狂犬病病毒荧光抗体
- 动物狂犬病中和性抗体竞争ELISA检测试剂盒的研制被引量:3
- 2010年
- 目的研制一种能够定量检测狂犬病血清中和抗体的直接竞争ELISA试剂盒,以满足我国动物狂犬病免疫监测的需要。方法以表达狂犬病病毒糖蛋白的真核细胞培养物为包被抗原,捕获抗体为具有病毒中和活性的酶标单克隆抗体,标准血清为经荧光抗体病毒中和试验(FAVN)准确定量的犬血清。结果本试剂盒的最低检测限为0.25U/ml,线性检测范围为0.25~8U/ml,标准曲线的平均板内变异系数为2.8%,板间平均变异系数为4.9%,在4℃下至少可以存放6个月。结论本研究提供了一种操作安全、定量准确的动物狂犬病中和抗体检测试剂盒,具有良好的实际应用前景。
- 冯誉龄刘晔张守峰张菲王颖王述超扈荣良
- 关键词:狂犬病病毒中和抗体酶联免疫吸附测定
- 冀、京、吉犬群犬腺病毒中和抗体调查被引量:6
- 2014年
- 目的为表达狂犬病病毒糖蛋白的犬2型腺病毒(CAV-2)重组狂犬病口服疫苗的投放工作提供流行病学依据。方法通过病毒中和试验对随机采自河北省,北京市,吉林省等地的387份犬血清进行犬腺病毒中和抗体检测,以确定犬群腺病毒感染率。结果河北、吉林农村流浪犬或家养犬腺病毒中和抗体阳性率较低,阳性率为16%(30/192),而北京市犬腺病毒中和抗体阳性率高达69%(135/195),说明城乡犬只犬腺病毒中和抗体存在明显差异。结论农村流浪犬或家养犬腺病毒中和抗体阳性率较低,适用于CAV-2及其重组疫苗首次免疫、尤其是口服免疫。
- 钱方张守峰王述超刘晔赵敬慧米立娟张菲王颖扈荣良
- 关键词:狂犬病犬腺病毒中和抗体口服免疫
- 犬源伪狂犬病毒的分离与鉴定
- 2015年
- 2012与2013年冬季,本实验室从长春市某宠物诊所连续收到疑似伪狂犬病毒感染的2份犬脑组织病料,接种Vero细胞,分离到2株病毒,经电镜观察、动物回归试验及PCR扩增鉴定为伪狂犬病毒,命名为JLCC-2012和JLCC-2013株。PCR扩增病毒gC基因序列,经遗传进化分析显示,2株PRV gC基因同源性为100%,且与国内犬源分离株BJ/RD、BJ/YT同源性分别为99.93%、100%,与猪源病毒分离株同源性为94.33%~100%,与国外猪源病毒分离株同源性为93.58%~94.81%。结果表明本研究分离株为与最近报道的犬源毒株系相近的流行毒株。
- 靳红亮刘晔李楠李志君赵敬慧王述超张守峰扈荣良
- 关键词:伪狂犬病毒基因分析
- 狂犬病病毒磷蛋白重组人5型腺病毒的构建及鉴定被引量:1
- 2015年
- 目的构建表达狂犬病病毒(rabies virus,RABV)BD06株磷蛋白(phosphoprotein,P)的重组人5型腺病毒,并进行鉴定。方法质粒p MD18-T-BD06P经双酶切后,获得完整的P蛋白基因,将其克隆至腺病毒表达系统穿梭质粒pac Ad5CMVK-Np A,构建重组穿梭质粒pac Ad5CMV-BD06P,与骨架质粒pac Ad5 9.2-100经PacⅠ酶切线性化后,共转染HEK293AD细胞,经同源重组,获得表达RABV P蛋白的重组人5型腺病毒r Ad5-BP。采用K覿ber法计算r Ad5-BP滴度,RT-PCR、Western blot、直接免疫荧光方法(direct immunofluorescence assay,d FA)检测P蛋白基因在HEK-293AD细胞的转录及表达水平。以107 TCID50r Ad5-BP肌肉注射免疫昆明小鼠,14 d后,经尾静脉采血,分离血清,IFA法检测抗RABVP蛋白抗体及其反应活性。结果经酶切及测序鉴定证明重组穿梭质粒pac Ad5CMV-P构建正确;重组腺病毒r Ad5-BP滴度可达108 TCID50/ml,能够介导P蛋白在HEK293AD细胞中的转录及表达,接种小鼠后可刺激机体产生针对RABVP蛋白抗体,且与RABV具有良好的反应活性。结论成功构建了RABVBD06株P蛋白重组人5型腺病毒,该病毒能够介导P蛋白在小鼠体内有效表达,刺激机体产生针对RABVP蛋白抗体,且与RABV具有良好的反应活性,为进一步研究RABV P蛋白在病毒感染过程中的作用奠定了基础。
- 靳红亮王述超高菽蔓张守峰严妍王东方刘晔扈荣良
- 关键词:狂犬病病毒磷蛋白