王瑞
- 作品数：35 被引量：81H指数：5
- 供职机构：广西水产研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家科技支撑计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 重组罗非鱼Hsp70蛋白ATPase和抗原多肽结合活性研究被引量：1
- 2013年
- 热休克蛋白（Heat shock proteins,HSPs）是一类高度保守的蛋白,可被各种病理性和生理性应激诱导,保护组织免受应激带来的损伤。其中Hsp70为HSPs中最保守、最重要、家族成员最多的一族,在大多数生物中含量也最多,在应激反应中也最敏感。Hsp70具有分子伴侣、抑制细胞凋亡、调节细胞增殖、免疫功能、使生物获得耐热性、抗氧化等多种生物学功能,成为HSPs中最受关注、研究最深入的一类。
- 王瑞李莉萍黄婷梁万文甘西施金谷雷爱莹罗洪林黄维义李健陈明
- 关键词：罗非鱼免疫佐剂免疫增强剂
- 鱼用口服疫苗免疫佐剂研究进展被引量：3
- 2012年
- 免疫佐剂是一种先于或与抗原同时使用,能够增强机体的非特异性免疫能力及相应抗原的免疫原性,但其本身不具备抗原特性的物质。文章对鱼用口服疫苗免疫佐剂的作用机理以及霍乱毒素(CT)、大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)、细胞因子等几种主要鱼用口服疫苗免疫佐剂的应用情况进行综述,发现鱼用口服疫苗免疫佐剂的研究应用过程中仍存在作用机理研究相对滞后、忽略肠道黏膜免疫机理特殊性、使用成本过高、安全性等问题,建议今后加强对鱼类肠道黏膜免疫机理以及口服疫苗免疫佐剂作用机理的研究,优化口服疫苗免疫佐剂的免疫剂量和程序,降低生产成本,研发出更为广泛、廉价的口服疫苗免疫佐剂,提高其安全性等,以促进水产养殖业的健康发展。
- 黄钧施金谷陈明黄艳华温华成彭民毅王瑞梁万文
- 关键词：免疫佐剂霍乱毒素细胞因子
- 罗非鱼感染链球菌后hsp70基因表达研究被引量：9
- 2010年
- 采用实时荧光定量RT-PCR检测吉富罗非鱼感染链球菌后脑和脾脏中热休克蛋白70(hsp70)基因表达情况,并按2-△△CT分析方法、使用7500 Software v2.0.1进行分析。结果表明,罗非鱼感染链球菌48 h内,hsp70 mRNA在脑组织表达变化不明显,而在脾脏中表达升高,攻毒感染24 h后hsp70 mRNA表达量是正常脾脏组织的5.5倍多,说明hsp70在罗非鱼链球菌感染的免疫反应中具有重要作用。研究结果为进一步分析hsp70在罗非鱼感染链球菌过程中所行使的功能奠定基础。
- 王瑞黄艳华陈明梁万文黄钧
- 关键词：罗非鱼HSP70基因链球菌实时荧光定量RT-PCR基因表达
- 一种鱼类无乳链球菌疫苗候选菌株筛选方法
- 本发明公开了一种鱼类无乳链球菌疫苗候选菌株筛选方法，通过该方法对罗非鱼无乳链球菌病流行菌株分离与保种、流行菌株鉴定与病原库建立、流行菌株PFGE基因型分析、各PFGE基因型代表菌株毒力测定、各PFGE基因型代表菌株免疫原...
- 陈明王瑞李莉萍甘西梁万文黄婷雷爱莹罗永巨李健陈福艳
- 罗非鱼二联链球菌灭活疫苗的制备方法
- 本发明公开了一种罗非鱼二联链球菌灭活疫苗及其制备方法，该疫苗是将从发病罗非鱼体内分离出的海豚链球菌和无乳链球菌分离纯化、液体活化培养、生物反应器的扩大培养、培养物的灭活和洗涤，以及将灭活完全的菌体按等比例混合制成罗非鱼二...
- 陈明梁万文甘西王瑞雷爱莹李莉萍李超陈晓汉余晓丽徐增辉
- 尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA的分离及反转录验证
- 2010年
- 应用Trizol一步法对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）外周血白细胞总RNA提取方法进行优化,通过β-ac-tin基因反转录对所分离到的总RNA进行质量验证,并对mRNA的冻干浓缩进行了探讨,确定了一套快速、高效的尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA分离和mRNA浓缩体系。结果显示：获得的总RNA纯度较高,OD260/OD280均在1.9-2.0之间;甲醛变性电泳显示,总RNA完整性良好,28S与18S比值为2∶1;总RNA的分离量与起始白细胞量成正比,每毫升Trizol最大裂解量为1×10^8个白细胞,可得到总RNA量约为90μg;总RNA的分离量在前四个小时随着沉淀时间的增长而增加,并成功进行了β-actin基因的反转录。mRNA的分离率为1.08%,通过冻干浓缩成功使其浓度提高9倍。结果表明：分离到的总RNA质量可充分满足下游分子生物学实验要求,所建立的mRNA浓缩方法简单易行,可完全解决mRNA起始浓度低的难题。
- 李超陈明黄维义王瑞余晓丽黄婷雷爱莹梁万文
- 关键词：外周血白细胞总RNA
- 奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离与血细胞指数研究
- 2008年
- 鱼类外周血白细胞分离一直是一项技术难题，为探讨一种便捷、高效的奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离方法，本实验使用76％泛影葡胺（Urografin）调整标准人淋巴细胞分离液比重，通过梯度密度离心筛选最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重，并对分离前后的细胞进行分类计数与形态观察。结果发现分离前奥利亚罗非鱼外周血细胞总数为1．5×10^9个／ml，白细胞占35％，最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重为1．082，每毫升外周血可分离得到6×10^6～8×10^6个细胞，其中白细胞可达90％以上。对分离前后的细胞进行瑞氏染色分析可明显区分出单核细胞、大淋巴细胞、小淋巴细胞和嗜中性粒细胞，且各类白细胞之间的比例分离前后基本一致。本研究成功建立了奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离技术，测定奥利亚罗非鱼血细胞指数，并对血细胞进行了形态学观察与鉴定，这对罗非鱼细胞免疫学研究具有一定的实际意义。
- 李超陈明黄维义余晓丽王瑞雷爱莹黄婷秦春香梁万文
- 关键词：奥利亚罗非鱼外周血白细胞
- 广东、海南、福建3省罗非鱼链球菌病流行菌株PCR鉴定和PFGE基因型分析被引量：12
- 2013年
- 为研究近年来罗非鱼链球菌病流行菌株菌种与基因型变化信息,对广东、海南和福建3省罗非鱼主养区(共17个市县,93个养殖场)近4年的链球菌病流行菌株进行了分离,采用特异PCR方法对2009-2012年分离获得的流行菌株进行检测,并通过脉冲电场凝胶电泳(PFGE)对2009-2011年分离获得的流行菌株进行基因型分析。3省共分离到102株流行菌株,PCR鉴定结果显示均为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,S.agalactiae)。67株无乳链球菌PFGE图谱聚类显示产生A^G共7种PFGE带型,带型相似度在52.1%~100%之间。基因型A和D为广东优势菌群(93.48%,43/46),基因型F为海南优势菌群(66.7%,10/15),而福建6株分属于B、C和E共3个基因型。2009-2012年3省罗非鱼链球菌病流行菌种为无乳链球菌,流行菌株菌型较复杂,各省优势菌群存在较大差异,并且随时间发生变化。
- 李莉萍王瑞黄婷甘西李健黄维义黄彦雷爱莹陈明梁万文
- 关键词：罗非鱼基因型
- 罗非鱼颗粒蛋白前体cDNA序列与表达分析被引量：2
- 2010年
- 颗粒蛋白前体(Progranulin,PGRN)在先天免疫反应调控及个体生长发育过程中均有重要作用。通过对罗非鱼外周血白细胞全长cDNA文库筛选得到的序列进行生物信息学分析,获得罗非鱼Pgrn全长cDNA序列(GenBank登录号为GQ241348)。该cDNA克隆总长843bp,包含一个完整的开放阅读框,编码206个氨基酸,其中推定信号肽20个氨基酸,两个GRN重复单位均56个氨基酸。研究采用实时定量PCR(Real-time RT-PCR)方法对感染海豚链球菌后奥尼罗非鱼、尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼和吉富罗非鱼4种组织(脑、肝脏、脾脏和头肾)Pgrn mRNA表达情况进行分析。结果显示,Pgrn mRNA在攻毒后4种罗非鱼4种组织中表达均有上调趋势,并且在脾中的表达量最高,提示PGRN在鱼类先天免疫反应调控中起重要作用。另外,奥尼罗非鱼在感染海豚链球菌后6h的脑和肝脏、6h和12h的脾脏和头肾中Pgrn mRNA表达均下调,然后表达升高,这种表达变化在其他三种鱼中不明显,这也许是奥尼罗非鱼抗病力较强的一个原因。研究为从分子水平探讨PGRN在罗非鱼先天免疫反应中的作用机制提供了数据,也为罗非鱼的抗病选育提供了参考分子标记。
- 王瑞陈明黄钧李超甘西余晓丽黄婷梁万文
- 关键词：罗非鱼实时定量PCR抗病育种基因表达分析
- 创伤弧菌和哈氏弧菌快速检测方法
- 本发明提供了一种创伤弧菌和哈氏弧菌快速检测方法，目的是为了有利于控制创伤弧菌和哈氏弧菌在海水养殖动物中传播与爆发，采用了现代先进双重聚合酶链反应技术，设计创伤弧菌和哈氏弧菌特异性引物V<Sub>1</Sub>和H<Sub...
- 陈福艳黄婷陈晓汉杨学明梁万文程光平韦友传欧阳贤华陈明余晓丽王瑞李莉萍雷爱莹
- 文献传递
