王爱德 作品数:88 被引量:447 H指数:13 供职机构: 广西大学动物科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区科学研究与技术开发计划 “九五”国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 一般工业技术 更多>>
猪卵泡液和促性腺激素处理时间对猪卵母细胞体外成熟的影响 被引量:9 2005年 研究猪卵泡液(pFF)的浓度和促性腺激素(FSH和LH)处理时间对猪卵泡卵母细胞体外成熟的影响.结果表明,在猪卵丘细胞-卵母细胞复合体体外成熟培养46~48 h中的后23~24 h去除促性腺激素可有利于卵丘细胞的扩散,但对卵细胞的核成熟无显著影响(P>0.05);添加适量(10%)的pFF对猪卵母细胞体外成熟有一定的促进作用,但添加浓度太高则相对抑制卵子核成熟进程. 卢晟盛 魏凤 房慧伶 王爱德 卢克焕关键词:卵母细胞 体外成熟 卵泡液 促性腺激素 猪线粒体DNAD-loop PCR-RFLP分析 被引量:8 2000年 为了应用 RFL P分析猪线粒体 DNA D loop的多态性。应用 PCR对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪、大约克夏猪、荣昌猪和长白猪血液总 DNA样品中线粒体 DNA控制区 (mt DNA D loop)进行扩增 ,2 3种限制性内切酶消化 ,琼脂糖凝胶电泳检测。结果发现 mt DNA D loop扩增带清晰 ,与已知片段长度一致 ,RFL P分析未见长度多态。可见猪线粒体 DNA D loop酶切多态性贫乏。因此根据现用酶 ,应用mt DNA D loop PCR RFL P分析 。 刘中禄 魏泓 曾养志 王爱德 甘世祥关键词:PCR RFLP 多态性 核外遗传 广西巴马小型猪肥胖基因(leptin)成熟肽序列的cDNA克隆、序列分析 被引量:6 2008年 以广西巴马小型猪的脂肪组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增出巴马小型猪的leptin基因成熟肽序列,经纯化回收后连接到pMD18-T载体上,经鉴定后测序。研究结果表明,本试验克隆到leptin基因成熟肽cDNA序列,其长度为441 bp,与GenBank中报道的猪leptin成熟肽cDNA序列同源性高达99.06%,与奶牛、家鼠、马等物种的成熟肽cDNA序列间同源性可达到84.5%以上,证明leptin基因具有较高的保守性。同时发现,与普通猪相比,巴马小型猪leptin基因成熟肽cDNA序列有四处存在碱基突变,均为无义突变。 兰干球 李芳芳 黄雄军 郭亚芬 王爱德 李柏关键词:广西巴马小型猪 LEPTIN基因 克隆 广西巴马小型猪活化素β_A/β_B基因cDNA克隆与序列分析 被引量:2 2007年 目的通过克隆广西巴马小型猪活化素(activin)βA/βB基因cDNA,分析其序列,为研究活化素的生物学功能打下基础。方法提取广西巴马小型猪发情母猪的卵巢总RNA,并以其为模板,以下游特异性引物为反转录引物,在AMV酶作用下合成cDNA;用LA-Taq进行PCR扩增出包括成熟肽在内的activinβA及βB基因的部分序列,把两个序列分别连接到PMD-18载体进行克隆和序列分析。结果包括成熟肽在内的activinβA及βB基因的部分序列长度分别为964 bp和791 bp,两个亚基的序列比较保守,与GenBank上发表的猪activin两个亚基同源性达到99.79%和99.62%。activinβA基因有两个碱基发生突变,其中一个在成熟肽序列上,一个在非编码序列上;βB基因信号肽序列上有三个碱基发生突变,其中一个是同义突变。 兰干球 黄雄军 郭亚芬 李芳芳 王爱德 蒋和生关键词:巴马小型猪 广西巴马小型猪促生长激素释放激素成熟肽的克隆及序列分析 被引量:4 2007年 目的扩增广西巴马小型猪促生长激素释放激素(GHRH),分析其序列结构特点。方法以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,用特异性引物扩增GHRH外显子3,再用引物延伸悬挂PCR法扩增GHRH成熟肽,纯化后,连接、转化到大肠杆菌,筛选阳性克隆,测序。结果经测序证实广西巴马小型猪GHRH外显子3及其成熟肽的基因序列与相关文献报道一致。克隆得到的广西巴马小型猪GHRH序列全长为132 bp,其中外显子3基因序列长105bp。同源性比较发现,广西巴马小型猪GHRH外显子3基因序列与GenBank(NCBI)中报到的猪GHRH外显子3相比,同源性为97.14%,有3处发生碱基变化。结论本实验成功克隆了广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列。 郭亚芬 李芳芳 兰干球 黄雄军 王爱德 秦小娥关键词:广西巴马小型猪 克隆 广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列克隆及序列分析 以广西大学巴马小型猪基因组DNA为模板,扩增巴马小型猪生长激素基因的全序列,将该扩增片段亚克隆到pMD18-T载体后测序.再将测序结果在NCBI进行BLAST,证明此片段为巴马小型猪GH基因,全长为2007bp.同源性比... 杨秀荣 兰干球 郭亚芬 王爱德关键词:生长激素基因 广西巴马小型猪 克隆 文献传递 广西巴马小型猪生长素(Ghrelin)cDNA的克隆及序列分析 被引量:3 2007年 目的扩增广西巴马小型猪生长素(Ghrelin)cDNA序列,分析其序列结构特点,为进一步从分子水平上对广西巴马小型猪的生长发育提供理论依据,也为日后构建原核表达载体、研究Ghrelin基因的生物功能奠定基础。方法以广西巴马小型猪胃底组织总RNA为模板,用特异性引物扩增Ghrelin的cDNA,纯化连接pMD18-T载体后转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆体,鉴定后测序。结果经测序证实克隆得到的广西巴马小型猪Ghrelin cDNA序列全长为357 bp,与相关文献报道一致。同源性比较发现,广西巴马小型猪Ghrelin cDNA基因序列与GenBank报道的猪相应序列同源性为99.7%,只有一处发生碱基突变。结论本实验成功克隆了广西巴马小型猪Ghrelin cDNA。 郭亚芬 罗琴 王世凯 兰干球 王爱德关键词:生长素 广西巴马小型猪 克隆 广西巴马小型猪肌肉生长抑制素(Myostatin)cDNA克隆和序列分析 被引量:5 2007年 目的通过RT-PCR扩增广西巴马小型猪Myostatin cDNA序列,经过连接、转化、克隆测序后,与NCBI中发表的猪Myostatin序列进行同源性比较,分析广西巴马小型猪Myostatin的cDNA序列结构特点及与其他物种间的聚类关系,为日后构建Myostatin高效表达载体及进一步研究Myostatin对广西巴马小型猪肌肉生长的影响奠定基础。方法以广西巴马小型猪的肌肉组织总RNA为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),利用合成的特异性引物,扩增得到巴马小型猪肌肉生长抑制素(Myostatin)cDNA的全序列。该扩增片段经纯化后,连接到pMD18-T载体上扩增,经一系列鉴定后,测序。结果本实验克隆到巴马小型猪Myostatin基因cDNA序列长度为1128 bp,与GenBank报道的猪Myostatin基因cDNA序列同源性高达99.7%,与人、奶牛、家鼠等物种的cDNA序列间同源性可达到92.3%以上,证明Myostatin基因具有较高的保守性。同时发现广西巴马小型Myostatin基因cDNA序列有三处存在碱基突变,两个为同义突变,一个为错义突变。 王世凯 兰干球 罗琴 郭亚芬 王爱德关键词:广西巴马小型猪 MYOSTATIN基因 克隆 广西巴马小型猪生长期日粮蛋白与能量水平需要的测定 目的: 本试验对生长期(45-117日龄)的广西巴马小型猪进行了生长饲养实验。方法: 试验一:选择40头40日龄断奶广西巴马小型猪,按平均体重随机分为四组(10头/组)。在45-80日龄,四个组分别喂以含蛋白质水平为13... 兰干球 郭亚芬 王爱德关键词:广西巴马小型猪 粗蛋白质 消化能 日粮蛋白 文献传递 广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列克隆及序列分析 被引量:3 2007年 目的克隆广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列,并与已发表的其它品种猪的生长激素(pGH)基因全序列进行比较,探讨该基因在广西巴马小型猪中可能存在的变异。方法以广西大学巴马小型猪基因组DNA为模板,扩增巴马小型猪生长激素基因的全序列,将该扩增片段亚克隆到pMD18-T载体后测序。再将测序结果在NCBI进行BLAST。结果测序结果证明克隆得到了巴马小型猪GH基因,全长为2 007 bp。同源性比较发现,巴马小型猪GH基因全序列与GenBank中发表的五指山猪、太湖猪及普通猪的GH基因全序列的同源性分别为99.4%、98.3%、93.9%。 杨秀荣 兰干球 郭亚芬 王爱德关键词:生长激素基因 广西巴马小型猪 克隆