王晗
- 作品数:37 被引量:159H指数:7
- 供职机构:解放军第三〇二医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 丙型肝炎抗体的检测与HCV RNA定量及ALT的关系探讨被引量:14
- 2007年
- 目的比较不同实验诊断方法在丙型肝炎(丙肝)抗体检测中的应用价值,并探讨HCV RNA定量与ALT指标之间的关系。方法对105例增强化学发光法(CIA)检测丙肝抗体初筛结果呈阳性(S/Co>1)的标本,分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量聚合酶链反应(RFQ-RT-PCR)进行检测,并对可疑结果(①CIA检测结果S/Co在1~8之间的标本,②ELISA检测结果呈阴性的标本)采用HCV RIBA3.0进行确认;应用OLYMPUS AU-5400全自动生化仪及其生化检测试剂检测全部标本ALT指标。结果ELISA及RFQ-RT-PCR方法检测样本阳性率分别为93.33%和70.48%;对可疑标本经HCV RIBA3.0确认试验显示,2例结果呈阳性(分别为NS3、HCV-C和NS3、NS4阳性),1例为阴性,4例仍为可疑(其中1例HCV RNA>103copies/ml);HCV RNA含量呈阳性的样本中,ALT异常率与HCV RNA含量间呈正相关(r=0.96,P<0.01),而ALT数值的变化与HCV RNA含量并无相关性(r=0.19,P>0.05)。结论第三代ELISA诊断试剂盒检测丙肝抗体同样具有较高的灵敏度,2种检测方法均可能存在假阳性或假阴性情况;RFQ-RT-PCR检测结果阳性率低于CIA与ELISA检测结果;在临床诊断中丙肝抗体的检测应与荧光定量聚合酶链反应一起使用,以提高临床丙肝诊断的准确率。
- 王晗李伯安李永利徐军马洪滨陈小倩李波毛远丽
- 关键词:酶联免疫吸附试验荧光定量聚合酶链反应
- 骨髓涂片镜检初步诊断马尔尼菲青霉菌1例及文献复习被引量:4
- 2014年
- 1988年第一例艾滋病患者感染马尔尼菲青霉菌被报道,到现在成为东南亚地区艾滋病患者最常见的机会感染之一,马尔尼菲青霉菌在免疫力低下患者感染受到重视[1-3]。马尔尼菲青霉菌感染除了脐窝样皮疹为典型特征外,临床缺乏特异性特征,而脐窝样皮疹病例很少见。虽然微生物培养是诊断马尔尼菲青霉菌感染的金标准,但是从培养到鉴定需要1到2个星期,不能满足临床诊断需求。
- 杨宁李妍王晗李沛然苑文雯郭桐生
- 关键词:马尔尼菲青霉菌感染文献复习涂片镜检微生物培养骨髓
- AMA-M2阳性的原发性胆汁性肝硬化患者免疫学特点分析被引量:2
- 2013年
- 目的分析抗线粒体M2亚型抗体阳性(AMA-M2)的原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者免疫学等实验室诊断特点,推进临床PBC的早期诊断和治疗。方法对400例AMA-M2阳性的PBC患者采用间接免疫荧光法检测血清ANA、AMA、SMA、LKM和PCA等5种自身抗体。采用免疫印迹法检测患者血清7种主要肝抗原:Sp100、PML、gp210、LKM-1、LC-1、SLA/LP和Ro-52。应用全自动生化分析仪检测患者ALP、γ-GT等生化指标,全自动血细胞分析仪和凝血分析仪检测患者WBC、RBC、HGB、PLT和PT等血液学指标。结果患者自身抗体检测:ANA荧光模型主要包括核膜型、多核点型、着丝点型和胞浆颗粒型,阳性率分别为70%、52%、43%、3%。荧光模型组合方式包括:多核点型+核膜型、着丝点型+核膜型、着丝点型、多核点型、胞浆颗粒型以及仅AMA阳性者,阳性率分别为42%、28%、15%、10%、3%、2%,荧光滴度均≥1∶320。SMA、PCA、LKM阳性率均低于5%。患者主要肝抗原为Ro-52、gp210、PML和Sp100,阳性率分别为53%、44%、43%、24%,荧光滴度≥1∶320,而LKM-1、LC-1、SLA/LP阳性率均低于5%。PML、Sp100及Sp100+PML与gp210的阳性一致率分别为29%、11%、7%。临床血液检测结果显示有41%的患者WBC和RBC降低,53%的患者HGB降低,38%的患者PLT降低,而有42%的患者PT延长。生化检测结果显示有96%和93%的患者ALP和γ-GT升高。结论 AMA-M2阳性的PBC患者具有高滴度、特征性自身抗体荧光模型及自身肝抗原,结合临床血液及生化检测结果将为临床诊断提供重要帮助。
- 王晗徐军刘佳郭静霞谢娜赵静陈霖宋永继杨丽华刘爱霞李伯安毛远丽
- 关键词:自身抗体免疫印迹法
- 急重肝炎淋巴细胞脆性与肝脏功能损伤的关系研究被引量:1
- 2008年
- 目的 研究急重肝炎患者淋巴细胞脆性的变化,观察其与肝病程度、预后的关系。方法 选择临床确诊的急重肝炎患者32例,慢重肝炎患者66例、健康成年人46例、3~5岁健康儿童15例,采用淋巴细胞脆性实验检测淋巴细胞天然免疫反应的变化。淋巴细胞和抗原靶细胞在37℃下温育5-30min,高倍镜下观察淋巴细胞破碎的程度,与靶细胞接触的淋巴细胞膜完整无破坏者其脆性为阴性,与靶细胞接触的淋巴细胞中,30%以内被破坏者为轻度脆性、30%-60%被破坏为中度脆性、超过60%被破坏为重度脆性。结果 46例健康成人中,淋巴细胞脆性发生率为30.4%,其中9例呈轻度脆性(19.6%),3例中度脆性(6.5%)和2例重度脆性(4.3%)。66例慢重肝炎患者中,淋巴细胞轻度脆性14例(21.2%),中度脆性7例(10.6%),重度脆性4例(6.1%),与健康成人比较无显著差异。32例急重肝炎患者中,只有4例淋巴细胞为脆性阴性,淋巴细胞轻度脆性4例(12.5%),中度脆性9例(28.1%),重度脆性15例(46.9%)。4例淋巴细胞脆性阴性的急重肝炎患者有3例在住院1月后痊愈,疾病急性期与恢复期同一人群的淋巴细胞脆性无明显变化。结论 急重肝炎人群的淋巴细胞脆性显著高于慢重肝炎患者,肝病患者淋巴细胞脆性与病情及预后有关。淋巴细胞脆性可能是机体淋巴细胞天然应急免疫反应的表现。
- 王海滨徐军王晗
- 关键词:肝炎慢性细胞壁淋巴细胞
- 罗氏Cobas 6000全自动电化学发光分析仪检测AFP,CEA的性能验证被引量:6
- 2014年
- 目的:对罗氏Cobas 6000全自动电化学发光检测系统检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)进行性能验证。方法收集2014年1~4月期间医院住院患者血清样本,混合成不同水平的混合血清,参照 CLSI EP文件及其它文献,验证罗氏Cobas 6000全自动电化学发光检测系统检测 AFP和CEA的精密度、准确度和可报告范围。结果罗氏 Cobas 6000全自动电化学发光免疫分析仪检测 AFP 和 CEA两个项目的低、高值质控物批间精密度的变异系数(CV)分别为 AFP (6.53%,8.38%),CEA(8.15%,7.84%),批内精密度的变异系数(CV)分别为 AFP(3.97%,6.51%),CEA(4.77%,4.52%)。测定10份定值室间质评物的检测结果与“靶值”的最大偏倚分别为AFP(-12.62%),CEA(-10.71%),均在偏倚允许范围之内。验证实验的分析测量范围为 AFP(0.5~1000 IU/ml),CEA(0.2~1000 ng/ml),临床可报告范围为AFP(0.5~1000 IU/ml),CEA(0.2~1000 ng/ml)。结论罗氏Cobas 6000全自动电化学发光免疫分析系统检测 AFP, CEA性能良好,能够满足临床检测的性能要求。
- 杨丽何叶莉王晗卞成蓉王卫东徐军刘佳
- 关键词:肿瘤标志物
- 人破伤风免疫噬菌体单链抗体库的构建及体外亲和筛选被引量:3
- 2013年
- 目的构建人破伤风免疫噬菌体单链抗体库,筛选抗破伤风毒素重链C端(TeNT-Hc)的特异性单链抗体(scFv)。方法利用RT-PCR从5名破伤风抗体滴度较高的健康献浆员外周血淋巴细胞中获得全套人破伤风抗体VH和VL基因,经过重叠PCR将VH和VL基因连接获得scFv片段。将scFv片段克隆至pCANTAB5E载体,电转化大肠TG1感受态菌,获得抗体库。以TeNT-Hc为抗原对抗体库进行3轮筛选,获得特异性人源性抗TeNT-Hc单链抗体。scFv由pET32a(+)表达载体表达,产物包涵体采用HisTrap FF预装柱纯化并透析复性。采用非竞争酶免疫实验法测定scFv亲和常数(affinity constant,KD值)。检测scFv抑制TeNT-Hc与神经节苷脂GT1b结合的体外中和活性,计算抑制率。结果构建库容量为1×108的人破伤风免疫噬菌体单链抗体库,经过筛选获得3株特异性较好的人源性抗TeNT-Hc单链抗体。原核表达结果显示,3株scFv均以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的40%~45%。包涵体经洗涤、纯化和复性后,scFv均保持了与TeNT-Hc的特异结合活性,1 L培养物经纯化后可获得4~6 mg scFv蛋白。亲和力测定结果,27G、22D和S-4-7H-scFv的KD值分别为(1.25×10-7),(2.31×10-7)和(1.97×10-7)mol/L。3株抗体对TeNT-Hc与神经节苷脂GT1b结合的抑制率分别为64.5%,58.6%和51.5%。结论人破伤风免疫噬菌体单链抗体库的构建及具有体外中和活性的特异性抗TeNT-Hc单链抗体的获得,为人破伤风基因工程中和抗体的制备奠定了良好基础。
- 王晗于蕊张晓鹏任军谢娜樊红艳张金龙房婷于长明陈薇
- 关键词:破伤风破伤风毒素单链抗体逆转录聚合酶链反应细菌噬菌体
- 降钙素原及白介素-6在肝硬化患者腹水感染诊断中的应用价值探讨
- 目的:分析探讨降钙素原(PCT)及白介素-6(IL-6)在肝硬化患者腹水感染诊断中的应用价值.方法:选取我院于2012年6月~2013年12月收治的92例肝硬化腹水患者进行回顾性研究,将肝硬化腹水患者分为感染组和无感染组...
- 苑文雯王晗何叶莉耿伟朱剑功李沛然杨宁李妍郭桐生
- 关键词:降钙素原白介素-6肝硬化腹水
- 丙型病毒性肝炎肝损害患者血小板减少机制的探讨被引量:8
- 2017年
- 目的通过对丙型病毒性肝炎(hepatitis C,HCV)肝损害患者骨髓象的分析,探讨骨髓巨核细胞发育成熟对血小板减少的影响。方法将2010年2月至2015年10月解放军第三〇二医院收治的278例无脾功能亢进或已行脾切除、且排除其他肝炎病毒重叠感染、自身免疫性肝炎及脂肪肝的丙型病毒性肝炎患者作为研究对象(其中丙型慢性肝炎患者120例、丙型肝炎肝硬化患者80例、丙型肝衰竭肝炎患者23例、HCV肝炎血小板正常患者55例),采用骨髓图象分析系统对患者异常形态的巨核细胞进行分析,并检测所有患者空腹静脉血的丙型肝炎病毒定量(hepatitis C virus RNA,HCV RNA)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、血小板计数(platelet,PLT)、网织血小板(reticulated platelet,RP)、平均血小板体积(mean platelet volum,MPV)、血小板分布宽度(platelet distribution width,PDW)等指标,采用SPSS 19.0统计软件对各项指标进行统计学分析。结果随着丙型肝炎患者肝损害的加重,HCV RNA含量、APRI评分及PDW、RP均明显高于对照组(HCV肝炎血小板正常组),差异有统计学意义(P<0.05),PLT均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HCV RNA含量、APRI评分与病程、血小板功能指标呈正相关,与血小板计数指标呈负相关;巨核细胞发生了幼稚巨核细胞增多(>7个)、体积偏小、可见幼稚产板巨核细胞、产板巨核细胞减低或消失(0~2个)、巨核细胞破坏明显、裸核增多(>20个)、空泡变性(细胞质出现大小不一空泡或空泡呈环状排列于浆缘)、产血小板数量少的巨核细胞、巨核细胞周围血小板少于3~5颗、出现多分叶核巨细胞及变性巨核细胞等一系列发育异常及形态学的改变。结论丙型肝炎病毒含量与血小板数、质量及骨髓巨核系统发育成熟具有相关性,可能是引起血小板减少的因素之一。
- 杨宁李妍申艳蔡硕洪炜耿伟何江英朱剑功王晗
- 关键词:丙型病毒性肝炎丙型肝炎病毒巨核细胞血小板减少
- 尿沉渣工作站在肝病患者尿路感染中的诊断价值被引量:4
- 2015年
- 目的:探讨Lab UMat尿沉渣工作站尿液白细胞数(LEU)、细菌定量计数(BAC)、粘液丝(MUC)等指标在尿路感染中的诊断价值。方法:应用Lab UMat尿沉渣工作站检测292例肝病患者尿液中LEU、BAC和MUC水平,并采用电化学发光免疫分析法和酶法检测血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)和谷丙转氨酶(ALT)水平。以尿液细菌培养结果为金标准,评价LEU、BAC和MUC在尿路感染时变化特点及诊断价值。结果:肝病患者尿路感染以G-菌感染为主占80.5%,大肠埃希菌是主要致病菌,G+菌以屎肠球菌居多。以细菌培养结果为金标准,BAC在尿路感染诊断价值ROC面积为0.82,灵敏度为77.83%,特异度为90.2%;LEU ROC面积为0.85,灵敏度为87.6%,特异度为83.3%;MUC ROC面积为0.63,灵敏度为60.3%,特异度为72.7%。随着BAC水平的不断升高,尿LEU、MUC和血PCT、DBIL、TBIL水平均出现显著升高(t=13.8,t=12.3,t=4.5,t=15.2,t=11.6;和t=16.7,t=17.1,t=10.8,t=20.3,t=19.6;P<0.01)。结论:Lab UMat尿沉渣工作站对辅助诊断尿路感染具有较高价值。
- 王晗何叶莉谢娜耿伟李妍杨宁李沛然郭桐生朱剑功毛远丽
- 关键词:尿沉渣细菌感染降钙素原
- HCV相关自身免疫性甲状腺疾病自身抗体研究进展被引量:5
- 2017年
- 目前丙型肝炎病毒(HCV)全球感染率约为2.8%,在我国约为0.43%,感染人口约1 000万。自身免疫性甲状腺疾病(AITD)是丙型肝炎患者主要的肝外自身免疫现象,是抗HCV治疗的相对禁忌证,严重影响丙型肝炎患者的抗病毒治疗效果及预后。HCV是诱发AITD的重要原因,治疗期间新出现甲状腺抗体阳性率为4.5%~25.0%,AITD整体发生率可达5.0%~20.6%。
- 王晗杨宁于长明李伯安
- 关键词:自身免疫性甲状腺疾病丙型肝炎病毒甲状腺自身抗体甲状腺过氧化物酶抗体