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绿脓杆菌抗毒素精制方法与效价测定方法的研究被引量：2: 1996年; 本文采用胃酶消化──硫酸铵盐析法对绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）免疫马血浆进行了试制提纯，对该法酶处理及热变性中影响精制效果的几个主要因素进行了比较试验，同时对文中采用的４种效价测定方法进行了筛选。结果表明，胃酶消化法可用于ＰＥＡ免疫马血浆的精制；效价测定以生物学方法（细胞毒性中和试验、小鼠致死毒性中和试验）为佳。综合比较试验的结果，本文拟订了ＰＥＡ免疫马血浆精制的“修订法”并与“常规法”进行了精制比较。初步结果表明，修订法的精制效果优于常规法。; 李景玉王成怀; 关键词：抗毒素精制方法

消灭传染病的国际协作(续四)　百日咳　白喉　破伤风联合疫苗: 1995年; 消灭传染病的国际协作（续四）　百日咳　白喉　破伤风联合疫苗木材三生夫（日本东海大学名誉教授）　春美（日本东海大学小儿科）为了让全世界儿童都能得到疫苗接种而开展的扩大预防接种计划（ＥＰＩ）已经取得了相当的成绩。下一个目标乃是为了尽可能地消灭那些可用疫苗...; 木材三生夫春美王成怀; 关键词：传染病疫苗百日咳白喉破伤风

沿微山湖地区神经毒素原性酪酸梭菌的土壤分布调查被引量：3: 1997年; 为了解神经毒素原性酪酸梭菌在微山湖地区土壤的分布情况，我们采集了该地区的土壤样品进行调查。５０份土样培养上清中，有１８份（３６％）检出了肉毒毒素，经中和试验证实均为Ｅ型。从其中的７份阳性样品中分离到产毒菌株，对分离菌株进行毒性测定、生化特性检查及其神经毒素基因的ＰＣＲ检测，所有菌株均具有Ｅ型肉毒神经毒素基因并产生相应毒素，但其生化特性与Ｅ型肉毒梭菌不同，而与酪酸梭菌一致。结果说明沿微山湖地区土壤中确实存在神经毒素原性酪酸梭菌，而且阳性率很高。对神经毒素原性酪酸梭菌的分布进行流行病学调查并从土壤中分离到该病原菌，这在国际上尚属首次。; 邹开勇邝欣孟筱琦王兴民陆俭王成怀; 关键词：肉毒梭菌流行病学土壤分布

B型肉毒神经毒素基因的PCR检测被引量：4: 1997年; 本研究用一对Ｂ型肉毒神经毒素基因特异的寡核苷酸引物，扩增Ｂ型基因轻链区域一段２５３ｂｐ的ＤＮＡ片段，对２２株Ｂ型肉毒梭菌进行了鉴定，所试２２株Ｂ型肉毒梭菌其ＰＣＲ均为阳性。用Ｂ型肉毒梭菌ＣＭＣＣ（Ｂ）６４３５２对ＰＣＲ的检测灵敏度进行检查，可从６０个细菌中得到明显的扩增产物。用其它各型肉毒梭菌及其它梭状芽胞杆菌共５３株对ＰＣＲ的特异性进行了检测，除一株Ａ型肉毒梭菌（ＬＣＬ００１）ＰＣＲ为阳性外，其余菌株均为阴性。ＬＣＬ００１的扩增产物其分子量以及限制性内切酶消化产物和Ｂ型肉毒梭菌的扩增产物完全一致，认为该株菌中带有不表达的Ｂ型肉毒神经毒素基因，应为Ａ（Ｂ）型。由此可见，该ＰＣＲ扩增系统不仅具有灵敏度高，特异性强等特点，而且可检测出不表达的Ｂ型肉毒神经毒素基因，用于肉毒梭菌的鉴定具有其它方法不可比拟的优点。; 王兴民孟筱琦王成怀; 关键词：肉毒神经毒素基因 PCR

肺炎球菌多糖疫苗: 1999年; 肺炎球菌可导致肺炎、脑膜炎、中耳炎等多种疾病。本文介绍了肺炎球菌的分型、抗原特异性及荚膜多糖致病情况，并对肺炎球菌多糖疫苗所含多糖菌型。; 秦力王成怀; 关键词：肺炎球菌免疫效果

反向间接胶乳凝集试验法检测粪便A型产气荚膜梭菌肠毒素的结果及评价被引量：4: 1994年; 本文以１０种５２株供试菌分别与７个不同年龄组的健康人粪便混合，共配成３６４份模拟标本，采用反向间接胶乳凝集（ＲＰＬＡ）试验法与生物学试验法（小鼠致死试验、豚鼠皮肤血管透性因子试验，Ｖｅｒｏ细胞毒性试验）检测各标本中的Ａ型产气荚膜梭菌肠毒素（简称Ｃｐ－Ｅｎｔ）。除产气荚膜梭菌之外的其他菌种培养液２３８份标本（３４株），ＲＰＬＡ与生物学试验结果完全一致，均为阴性。产气荚膜梭菌１２６份标本（１８株）中有７０份标本的ＲＰＬＡ同生物学诸法完全一致地检出了Ｃｐ－Ｅｎｔ．有１株７份标本（ＣｐＮＣＴＣ８７９７）的ＲＰＬＡ为阳性，而各生物学试验却均为阴性，该菌株经ＰＣＲ检查证明确为肠毒素原性产气荚膜梭菌，表明ＲＰＬＡ比生物学试验法更灵敏。有５株（ＣｐＮＣＴｃ８２３８，ＣｐＮＣＴＣ１０６１１，ＣｐＮＣＴＣ１０６１４，ＣｐＮＣＴＣ１０６１２，ＣｐＬ－５２）３５份标本ＲＰＬＡ与各生物学试验结果均为阴性，但经ＰＣＲ检吉证明该５株菌均为肠毒素原性产气荚膜梭菌，后经超声波破碎菌体提取物对其中部分菌株进行试验的结果仍然显示了ＲＰＬＡ与生物学法的一致性。有２株（ＣｐＮＣＴＣ８６８６，ＣｐＮＣＴＣ８４４９）１４份标本的所有结果均为阴性。; 吕存女王成怀; 关键词：产气荚膜梭菌肠毒素

聚合酶链式反应快速检测E型肉毒神经毒素基因被引量：4: 1998年; 目的Ｅ型肉毒中毒是人类肉毒中毒的主要型别之一，本试验旨在建立用于Ｅ型肉毒梭菌鉴定的ＰＣＲ方法。方法用人工合成的寡核苷酸引物扩增Ｅ型肉毒神经毒素基因的一段３６８ｂｐ的ＤＮＡ片段，快速检测Ｅ型肉毒神经毒素基因，对梭状芽胞杆菌属的４０株保藏菌株及３３份土壤标本进行了鉴定，用Ｅ型肉毒梭菌ＣＭＣＣ（Ｂ）６４５０１对其灵敏度进行了检查。结果从所有Ｅ型神经毒素原性菌株或标本均能扩增出目的片段，且能用特定的限制性内切酶切成相应的片段。其它菌株均未能扩增出目的片段。灵敏度试验可从３０个菌体扩增出目的片段。结论此方法用于Ｅ型神经毒素原性梭菌的鉴定具有较高的灵敏度及特异性。; 王兴民孟筱琦邹开勇邝欣王成怀; 关键词：E型肉毒神经毒素基因聚合酶链反应

A 型肉毒神经毒素基因的 PCR 检测及 A 型肉毒梭菌的鉴定被引量：10: 1997年; 建立快速诊断及定型神经毒素对肉毒中毒的治疗、降低死亡率具有十分重要的意义。用一对Ａ型肉毒梭菌特异的寡核苷酸引物，扩增Ａ型肉毒神经毒素基因轻链区域一段４７２ｂｐ的ＤＮＡ片段，对梭状芽胞杆菌属的１０种６８株菌进行了鉴定，并对ＰＣＲ检测Ａ型肉毒神经毒素基因的灵敏度进行了检查。结果表明，所有２０株Ａ型肉毒梭菌ＰＣＲ扩增均为阳性，其余各型肉毒梭菌及其它各种梭菌均为阴性。扩增产物经限制性内切酶分析与预期的酶切片段一致。用溴化乙锭对扩增产物染色，可从３×１０３个细菌中检测出Ａ型肉毒神经毒素基因。用酚－氯仿抽提Ａ型肉毒梭菌全菌体ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，可从１０ｐｇ的ＤＮＡ中得到清晰的扩增产物。由此可见，该ＰＣＲ扩增系统用于Ａ型肉毒神经毒素基因的检测具有灵敏度高，特异性强等特点，为Ａ型肉毒梭菌的鉴定及肉毒中毒的快速诊断提供了一种新的手段。; 王兴民孟筱琦王成怀; 关键词：肉毒梭菌肉毒神经毒素基因 PCR

酶联免疫吸附试验检测A型产气荚膜梭菌肠毒素被引量：4: 1994年; 本实验建立了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测产气荚膜梭菌肠毒素的实验体系。以家兔单特异ＩｇＧ包被酶标板，辣根过氧化物酶标记的绵羊ＩｇＧ作为指示物，可检测出１．２５ｎｇ／ｍｌ（０．１２５ｎｇ）的产气荚膜梭菌肠毒素，线性范围大，重复性及稳定性好，对培养上清及粪便滤液检查无非特异反应。是产气荚膜梭菌食物中毒实验室诊断的一种快速可靠的检测方法。; 王兴民王成怀; 关键词：产气荚膜梭菌肠毒素 ELISA 食物中毒

首次自肉毒中毒食品中分离的一株产生E型肉毒毒素的酪酸梭菌被引量：8: 1996年; 对某卫生防疫站委托本研究室分离病原菌的一份引起肉毒中毒的食品一＂黄豆冬瓜酱＂进行检测和病原菌的分离，从中再次检出了Ｅ型肉毒毒素并分离到一产毒菌种，对该菌种的生物学及生化学特性进行检查，并检测其毒素基因（ＰＣＲ试验）。结果：该分离菌能产生Ｅ型肉毒毒素，ＰＣＲ检测结果也证明其具有Ｅ型肉毒神经毒素基因，但其多项生化特性与Ｅ型肉毒梭菌有明显差异，而与酪酸梭菌完全一致。结果说明该分离菌系产生Ｅ型肉毒毒素的酪酸梭菌，而非Ｅ型肉毒梭菌。由酪酸梭菌引起的食物中毒型肉毒中毒并从中毒食品中分离到该病原菌，这在国际上尚属首次报告。; 邹开勇邝欣孟筱琦王兴民吕存女王成怀; 关键词：肉毒中毒食物中毒

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王成怀

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