王慧娟
- 作品数：59 被引量：200H指数：9
- 供职机构：南京医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金南京医科大学科技发展基金南京医科大学科技发展基金资助更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 人类系统性红斑狼疮血清对内皮(逆)穿越模型中树突状细胞表型成熟的影响被引量：9
- 2005年
- 目的:研究人类系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)血清对正常人单核细胞(monocyte,Mo)分化形成的树突状细胞(dendriticcell,DC)的表型成熟的影响。方法:分离正常人外周血单个核细胞(PBMC),加入内皮细胞穿越模型中,分别以正常人血清和SLE血清加入培养体系中,36h后收集2次穿越内皮单层得到的,经形态学鉴定的DC细胞,流式细胞术测DC的CD80、CD86、HLA鄄DR的表达情况。结果:SLE血清诱导的DC其CD80的表达水平明显低于正常人血清刺激组,而二者均高表达CD86、HLA鄄DR。结论:DC的表型成熟和血清环境有一定关系。
- 张江全季晓辉张明顺杨晓帆王慧娟顾镭王书奎
- 关键词：红斑狼疮树突状细胞单核细胞血清
- 系统性红斑狼疮患者外周血CD_4^+CD_(25)^+ T细胞亚群的初步研究被引量：12
- 2004年
- 目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的比率改变。方法采用微量全血三色标记法,以流式细胞技术检测SLE患者外周血CD4+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群,分析阳性细胞百分率和平均荧光强度(Meanfluorescenceintensity,MFI)。结果SLE患者外周血中CD4+T细胞百分率,活动期(29.29%±8.86)%和非活动期(29.55±8.96)%均低于正常对照(37.41±3.29)%(P均<0.05);CD4+CD25+T细胞百分率SLE活动期(10.30±5.60)%显著高于正常对照(5.39±1.43)%(P<0.05),非活动性SLE病人组(5.63±2.49)%和正常组差异无显著性(P>0.05);CD4+CD25+CD45RO+T细胞百分率SLE活动期(3.96±3.51)%显著高于正常对照(1.39±0.63)%,非活动期(0.75±0.66)%显著低于正常对照(P均<0.05)。平均荧光强度分析表明SLE患者组和正常组的CD25和CD45RO抗原密度差异并无显著性(P均>0.05)。结论SLE患者外周血中存在CD4+CD25+及CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群比率异常增高,且与病情活动性相关。
- 张春兵杨晓帆王慧娟张明顺苏定雷柯瑶季晓辉
- 关键词：红斑狼疮外周血细胞CD4^+CD25^+T细胞
- SLE患者外周血淋巴细胞凋亡异常及血清中IL-10的影响被引量：9
- 2004年
- 目的 :研究SLE患者外周血单个核细胞 (PBMCs)中淋巴细胞亚群的凋亡特点。方法 :采用三色荧光流式细胞术检测CD3、CD4、CD8、CD19细胞亚群的早期凋亡 ;ELISA法检测PBMCs培养上清中的sFas、sFasL ;实时荧光半定量RT PCR方法检测细胞内FasmRNA的表达水平。结果 :SLE患者PBMCs中CD3+ 细胞凋亡明显增多 ;CD4 + 和CD8+ 细胞亚群凋亡均有明显增加 ,但以CD4 + 细胞凋亡增多更为明显 ;相应地 ,其PBMCs中CD4 + 、CD8+ 细胞百分率下降 ,CD4 CD8比值降低。SLE患者血清可诱导CD3+ 、CD4 + 、CD8+ T细胞亚群凋亡增多 ,sFas、sFasL水平增高及FasmRNA表达增加 ;抗 IL 10抗体则可中和SLE血清的上述作用。结论 :SLE患者体内T细胞凋亡增多 ,以CD4 + T细胞凋亡增加更为显著 ,导致CD4 CD8比值下降 ;SLE血清中高水平的IL 10可能通过诱导Fas、FasL表达增高而促进T细胞凋亡的发生。
- 徐娟刘晓华王慧娟沈友轩孙可一王书奎季晓辉
- 关键词：IL-10FAS
- 系统性红斑狼疮26例IL-10及IL-12的异常表达及其相互作用被引量：6
- 2006年
- 目的:了解系统性红斑狼疮(SLE)患者白细胞介素(IL)-10、IL-12异常表达的相互关系,探讨IL-10对IL-12分泌的影响。方法:取26例SLE患者及正常对照18例志愿者的外周血(PBMCs),用ELISA法测定其血清、单个核细胞(PBMCs)培养上清、植物血凝素(PHA)刺激培养上清中IL-10、IL-12水平;在SLE患者及正常对照PBMCs中分别加入正常人血清、SLE血清、SLE血清+IL-10抗体,PHA刺激培养24h,用ELISA法测培养上清中IL-12的水平。结果:SLE患者血清、PBMCs培养上清中自发产生和PHA刺激诱生的IL-10及IL-12P40水平均异常增高。然而仅血清IL-10水平与SLEDAI呈正相关,但血清IL-12P40水平、PBMCs培养上清自发产生的及PHA刺激诱生的IL-12P40水平均与SLEDAI呈正相关。尽管SLE患者血清IL-10水平与IL-12P40血清及PBMCs培养上清水平呈正相关,但体外实验时,在PBMCs培养中,加入SLE血清,可显著抑制IL-12的产生,采用IL-10抗体中和掉SLE血清中的IL-10后,正常人或SLE患者的PBMCs培养上清中IL-12可明显增多。结论:SLE患者IL-10及IL-12表达水平异常增高,且血清水平与SLE活动性正相关;体外细胞培养实验中SLE血清中IL-10可明显抑制IL-12的分泌,但在细胞因子网络环境中两者之间相互作用更为复杂。
- 邢美芬刘晓华姜玉章王慧娟杨晓帆季晓辉
- 关键词：系统性红斑狼疮白细胞介素-12白细胞介素-10
- 白细胞介素10的异常表达在系统性红斑狼疮（SLE）病理机制中的意义
- 为研究IL-10在SLE发病机制中的生物学作用，选取50例SLE患者和30名健康对照，应用ABC-ELISA法检测血清及细胞培养上清的IL-10水平，同时以荧光定量RT-PCR分析IL-10mRNA的表达。流式细胞术用来...
- 王慧娟
- 关键词：红斑狼疮白细胞介素10流式细胞术
- 文献传递
- IL-17A基因敲除导致肾间质纤维化加速的分子机制
- 研究背景:IL-17A作为固有免疫应答中的重要炎性因子,并可以促进心肌、肺、肝等组织的纤维化进程,而在肾纤维化发展过程中角色未名。目的:本文旨在探讨IL-17A在肾间质纤维化发展过程中所扮演的角色。方法:建立UUO肾间质...
- 王慧娟王慧张璐杨晓帆孙彬周洪季晓辉
- 关键词：肾间质纤维化细胞外基质TGF-Β1
- 文献传递
- 脐血CD34^+造血干细胞来源的树突状细胞体外培养体系的优化被引量：5
- 2006年
- 目的:优化脐血CD34+造血干细胞(HPC)来源的树突状细胞(DCs)诱导培养方法,为体外研究CD34+HPC诱导产生功能性树突状细胞(DCs)的影响因素奠定基础。方法:淋巴细胞分离液(Ficoll)分离获得脐血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD34+HPC,并用流式细胞术鉴定CD34+HPC纯度;比较GT(GM-CSF+TNF-α)方案和GTI(GM-CSF+TNF-α+IL-4)方案及GTI方案中TNF-α和IL-4不同时段加入对诱导培养产生的DCs成熟的影响;通过激光共聚焦显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞表型及3H-TdR检测DCs激发异体T细胞增殖能力。结果:免疫磁珠阳性分选CD34+HPC纯度可达90%以上;将CD34+HPC按GT方案和GTI方案进行培养,均可诱导产生DCs,但经GT方案诱导的DCsCD14表达较高,CD80、CD86、CD83、CD1a表达不如经GTI方案诱导的高;而GTI方案中,以TNF-α0h加入、IL-448h加入诱导培养的DCs各表型表达相对较佳,并具有激发异体T细胞增殖能力。结论:CD34+HPC经过合适的培养体系能够诱导分化为功能性DCs,以GM-CSF与TNF-α0h加入、IL-448h加入的GM-CSF+TNF-α+IL-4方案更为可取。
- 顾镭邢美芬季晓辉孙志达杨晓帆王慧娟张明顺
- 关键词：脐血树突状细胞体外培养
- CD4^+CD25^+Foxp3^+:与SLE疾病相关的Treg标志被引量：4
- 2012年
- 目的:研究与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)病理活动相关的调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)标志。方法:分离正常人和SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs),用三色流式细胞术(flowcytometer,FCM)检测CD4和CD8 T细胞亚群的CD25、Foxp3表达,分析T细胞Foxp3+/CD4+T、CD25+Foxp3+/CD4+、Foxp3+/CD4+CD25+、Foxp3+/CD8+、CD25+Foxp3+/CD8+、及Foxp3+/CD8+CD25+的比值变化,及其与SLE疾病活动指数(SLE disease activity index,SLEDAI)、抗-dsDNA阳性、补体C3/C4水平降低、血清IgG水平增高、肾脏损害、关节病变、白细胞减少、疾病初/复发的关系。结果:①与正常人相比,SLE患者T细胞CD4+CD25+/CD4+比值无明显改变,但中/重度SLE患者外周血T细胞Foxp3+/CD4+、CD25+Foxp3+/CD4+、及Foxp3+/CD4+CD25+比值均显著下降,并与SLEDAI呈负相关;其中CD25+Foxp3+/CD4+比值还与SLE的抗-dsDNA阳性、补体C3/C4水平降低、血清IgG水平增高相关,在疾病初发、肾脏损害、白细胞减少患者该比值下降更为显著;②SLE患者CD8+T细胞中CD25+、Foxp3+亚群比例未见明显减少,仅中/重度活动性SLE患者Foxp3+/CD8+CD25+比例减少,但与SLEDAI无相关性。结论:以CD25+Foxp3+作为Treg标志,可以明显反映出SLE患者CD4+Treg存在数量缺陷,并与疾病活动性、免疫功能紊乱和病理损害密切相关,故将CD4+CD25+Foxp3+作为标志进行Treg检测对辨明SLE患者免疫系统功能状态具有一定的临床参考价值。
- 徐安琪杨晓帆王慧娟张缪佳季晓辉
- 关键词：红斑狼疮调节性T细胞FOXP3
- 霉酚酸及地塞米松对系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡的影响被引量：2
- 2005年
- 目的:以地塞米松(DEX)为对照,观察新型免疫抑制剂霉酚酸(MPA)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞凋亡的作用。方法:分离12例SLE患者及8例健康对照的外周血单个核细胞(PBMCs),分别加或不加MPA/DEX培养48h,用ELISA法测培养上清中sFas与sFasL的水平,用AV鄄FITC/PI双标记流式细胞术测PBMCs的凋亡率。结果:SLE患者PBMCs培养上清中的sFasL水平较正常对照显著增高,而MPA及DEX均可使其分泌的sFas及sFasL水平显著下降,且MPA使sFasL降低的程度较sFas更显著,而DEX却正相反。SLE患者培养的PBMCs凋亡率较正常对照显著增高,MPA及DEX均可使凋亡率进一步增加,而DEX较MPA对凋亡的诱导作用更加显著。结论:MPA及DEX对SLE患者PBMCs具有促进凋亡的作用,但这一作用可能并非通过Fas鄄FasL途径;而且,在诱导凋亡方面,MPA与DEX的作用既有相同,又存在差异。
- 李元媛苏定雷宣恒报王慧娟衡春李玉峰季晓辉
- 关键词：系统性红斑狼疮霉酚酸凋亡SFASSFASL
- 系统性红斑狼疮患者白介素10表达的研究被引量：11
- 2003年
- 王慧娟季晓辉刘晓华沈友轩柯瑶
- 关键词：系统性红斑狼疮白介素10细胞因子组织相容性抗原
