王利
- 作品数:83 被引量:336H指数:9
- 供职机构:上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 一种抗T淋巴细胞瘤的自身T细胞疫苗及制备方法
- 本发明涉及一种抗T淋巴细胞瘤的自身T细胞疫苗,及其制备方法和用途。一种抗T淋巴细胞瘤的自身T细胞疫苗,是利用健康的减活的自身活化T细胞作为疫苗。该疫苗的制备方法是自体活化T细胞于培养基DMEM中,于10%小牛血清、10m...
- 李宁丽沈佰华王利
- 文献传递
- 两种人乳头瘤病毒分型检测方法的比较被引量:3
- 2008年
- 目的通过比较PCR联合地高辛标记探针杂交法与实时荧光定量PCR法检测宫颈液标本中人乳头瘤病毒(HPV)感染的一致性,评价PCR联合地高辛标记探针杂交法的临床应用价值。方法将4型HPV(16、51、54和56)探针3′端加尾地高辛标记,检测标记探针的灵敏度和特异性。收集63例第二代杂交捕获(HC-Ⅱ)阳性和18例HC-Ⅱ阴性的宫颈液标本,采用HPV通用引物MY11/09对所有标本L1区基因序列进行PCR扩增,利用地高辛标记探针杂交法对PCR产物进行检测分型;同时利用实时荧光定量PCR对这81例标本进行检测,将两者的检测结果进行比较。结果地高辛标记探针杂交法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型40例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,分别占HC-Ⅱ阳性标本的63.5%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;实时荧光定量PCR法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型39例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,占HC-Ⅱ阳性标本的61.9%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;重复性检测显示两种方法检测4型HPV感染的变异系数(CV)为0-1.45%和0-1.50%,检测标本中4型感染的符合率为97.5%-100%。结论PCR联合地高辛标记探针杂交法具有较好的灵敏度和特异性,可能对于临床HPV分型检测有应用价值。
- 蒋卫张艳王瑛沈佰华王利李宁丽
- 关键词:人乳头瘤病毒杂交实时荧光定量聚合酶链反应
- T细胞疫苗接种对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠免疫机制的调节作用被引量:1
- 2004年
- 目的 探讨 T细胞疫苗 ( TCV)接种对实验性自身免疫性脑脊髓炎 ( EAE)免疫机制的调节作用。方法 取正常及 EAE大鼠腹股沟淋巴结细胞 ,经 MBP抗原诱导 ,制备 MBP特异的 TCV用于接种 ,以 HE染色观察髓鞘病变 ,MTT法检测细胞毒反应 ,FACS方法检测 T细胞亚群 ,ELISA方法检测血清中细胞因子含量。结果 接种 TCV后 ,CD8+细胞百分率上升 ,T细胞对脑细胞的杀伤率下降 ,血清中 IFN-γ与 TNF-α含量下降以及脑髓质炎症反应减弱 ,EAE发病率下降。结论 特异性 TCV接种可降低自身免疫反应性。 TCV通过淋巴细胞亚群的变化及细胞因子的调节 ,发挥对
- 余奇文沈帆霞柏峻马安伦张继英王利沈佰华陈生弟张冬青
- 关键词:T细胞疫苗LEWIS大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎
- 抗β-干扰素单克隆抗体及其应用
- 一种抗β-干扰素单克隆抗体,由由保藏号为CCTCC NO:C201121的杂交瘤细胞株产生。与β-干扰素SEQ ID No 1特异结合后,对β-干扰素具有中和作用。该抗β-干扰素单克隆抗体可用于对β-干扰素亲和层析纯化和...
- 余奇文张冬青张继英李宁丽马安伦席波聂红沈伯华沈天伟柏峻王利
- 文献传递
- 一种抗T淋巴细胞瘤的自身T细胞疫苗及制备方法
- 本发明涉及一种抗T淋巴细胞瘤的自身T细胞疫苗,及其制备方法和用途。一种抗T淋巴细胞瘤的自身T细胞疫苗,是利用健康的减活的自身活化T细胞作为疫苗。该疫苗的制备方法是自体活化T细胞于培养基DMEM中,于10%小牛血清、10m...
- 李宁丽沈佰华王利
- 文献传递
- 空肠弯曲菌蛋白抗原分析被引量:10
- 1995年
- 超声粉碎和高速离心获得C.j-S131lysate,SDS-PAGE显示位于10-92KD间24条蛋白条带,薄层扫描发现43KD蛋白是菌体最主要成份,其次是15KD和17KD蛋白。Westernblotting发现C。j-S131lysate中43KD蛋白抗原性最强,也最早诱导相应抗体产生。用凝胶过滤和液相制备型等电聚焦分离获得了纯化的92KD、43KD、15KD三种蛋白。本文结果为进一步研究空弯菌诱致自身免疫综合征的分子机理打下了基础。
- 臧星星马宝骊曹鹤年黄冬生柏峻王利谢雅莉
- 关键词:空肠弯曲菌蛋白抗原
- 苯乙酸钠增强肿瘤细胞表面HLA分子的表达被引量:5
- 1996年
- 以分化绣导剂苯乙酸钠处理肿瘤细胞,以ELISA检测肿瘤细胞表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子表达的变化。结果发现MCF-7、MDA-453、MKN-45以及Hela细胞表面HLA Ⅰ类分子表达较低,而MKN-28和3AO细胞表面HLA Ⅰ类分子高表达。MDA-453、MKN-28、MKN-45、Hela以及3AO细胞表面亦表达HLA Ⅱ类分子,而MCF-7细胞表面缺乏HLA Ⅱ类分子。苯乙酸钠能够诱导MCF-7细胞表面表达HLA Ⅱ类分子;增强MCF-7细胞表面HLA Ⅰ类分子,MDA-453、MKN-28、MKN-45、Hela以及3AO细胞表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子的表达。并且肿瘤细胞表面HLA Ⅰ类分子的表达与苯乙酸钠的作用时间和剂量呈正相关。
- 吉家祥马宝骊王利张继英张汉明
- 关键词:苯乙酸钠肿瘤细胞ELISA
- 肺癌患者外周血调节性T细胞检测的临床意义被引量:4
- 2010年
- 目的:探讨肺癌患者外周血调节性T细胞(CD4+CD25+FoxP3+,Treg细胞)的变化及其与病理参数的相关性。方法:应用流式细胞仪检测56例肺癌患者和18名健康对照者(健康对照组)外周血单个核细胞(PBMC)中Treg细胞占CD4+T细胞的百分率,分析其与年龄、性别、肺癌分期、病理类型以及是否合并胸腔积液等的关系。结果:①肺癌患者外周血Treg细胞百分率高于健康对照组[(6.15±3.15)%比(3.65±2.48)%,P<0.01]。早期组(TNM分期:Ⅰa期~Ⅲa期)[(5.04±2.40)%]、晚期组(TNM分期:Ⅲb期~Ⅳ期)[(6.83±3.09)%]分别与健康对照组[(3.65±2.48)%]比较,Treg细胞百分率均明显升高(P<0.01)。②晚期肺癌患者中,非老年组(年龄≤60岁,12例)患者外周血Treg细胞较老年组(年龄>60岁,26例)明显升高[(8.79±3.49)%比(4.86±2.69)%],差异有统计学意义(P<0.01)。③根据病理类型分为非小细胞肺癌52例(18例鳞癌、34例腺癌),小细胞肺癌4例,非小细胞肺癌患者外周血中Treg细胞百分率较小细胞肺癌有增高趋势[(6.44±3.16)%比(3.44±1.97)%],但尚无统计学意义(P>0.05)。④肺癌患者外周血中Treg细胞百分率与性别、有无胸水无相关性(P>0.05)。⑤回归分析显示晚期肺癌患者外周血中Treg百分率与年龄呈负相关(P<0.05)。结论:肺癌患者处于免疫抑制状态,其外周血中Treg细胞百分率与肺癌分期、年龄有关。
- 邹静刘斌陈雪华李宁丽王利查琼芳
- 关键词:肺肿瘤外周血调节性T细胞
- Cyr61促进RA滑膜细胞增殖及炎症因子调控研究被引量:6
- 2010年
- 目的:采用类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞的体外培养,研究基质蛋白Cyr61在RA滑膜细胞增殖中的作用及其机制。方法:通过Real-time PCR、Western blot和免疫组化检测RA病人的滑膜组织和细胞中Cyr61的表达情况;用3H-TdR掺入法检测滑膜液(SF)对滑膜细胞增殖的影响;用ELISA方法检测RA患者滑膜液中Cyr61蛋白的水平。结果:RA病人的滑膜组织和细胞中高表达Cyr61;SF能刺激滑膜细胞发生明显增殖;且RA患者滑膜液中含高浓度的Cyr61蛋白。用SiRNA干扰技术抑制滑膜细胞中Cyr61基因表达,再加入滑膜液后,则滑膜细胞增殖明显降低。同时,将SF与anti-Cyr61抗体共同孵育后再刺激滑膜细胞,FLS也不再发生明显增殖。进一步研究滑膜液中与上调Cyr61表达有关的炎症细胞因子,发现SF中IFNγ-和TNFα-具有上调Cyr61蛋白表达的作用。结论:Cyr61蛋白是促进滑膜细胞增殖的重要调控基因;RA患者滑膜液中含有高浓度的炎症因子IFNγ-和TNFα-,通过上调Cyr61蛋白表达而促进滑膜细胞增殖,可能是促进RA病理性滑膜增生的重要因素之一。
- 林锦骠吴娟娟王利邹静沈佰华李宁丽
- 关键词:类风湿性关节炎
- 类风湿关节炎患者T细胞抗原受体BV基因的限制性取用初步研究被引量:4
- 2005年
- 目的研究类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)患者病灶部位即关节滑膜组织浸润的受某种自身抗原驱动的T淋巴细胞抗原受体(Tcellreceptor,TCP)"链的取用格局。方法采用实时定量聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)的方法分析RA患者病灶部位T淋巴细胞抗原受体"链的取用;采用PCR-SSP方法对所调查的RA患者的人类白细胞抗原(humanleucocyteantigen,HLA)进行了分型。结果研究发现中国人群RA患者病灶关节滑膜浸润的T淋巴细胞抗原受体主要取用BV14和BV16家族;中国人群RA患者HLA基因型主要以HLADRB1*0405为主要特征,与白种人RA患者不同。结论研究提示中国人群RA患者病灶区自身反应性T细胞具有TCRBV14和BV16的限制性取用,其中TCRBV16的偏移为国内外首次报道。而HLADRB1*0405类风湿关节炎患者表现出TCRBV16取用的趋势,提示TCRBV16取用受主要组织相容性复合体(MHC)的约束,这为进一步分析诱发RA的发生的免疫异常和自身反应性T细胞的生物学特性提供了重要试验基础。
- 何东仪许荣倪立青沈杰姜婷陈广洁张冬青李伟毅王利沈佰华李宁丽
- 关键词:人类白细胞抗原自身反应性T细胞