王刚
- 作品数:600 被引量:1,643H指数:18
- 供职机构:北京大学第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学电子电信自动化与计算机技术更多>>
- 经胸超声心动图在室间隔缺损经导管封堵术中的应用价值
- 2005年
- 陈颖程冠昌洪岩万琪琳王刚朱丹茹宋涛
- 关键词:经胸超声心动图室间隔缺损经导管封堵术
- 人源性抗角蛋白单链抗体的构建及表达被引量:3
- 2005年
- 目的:克隆抗角蛋白抗体的可变区(V区)基因,构建抗角蛋白单链抗体(scFv)表达载体并表达。方法:根据人源性抗角蛋白Fab段的基因序列设计引物,用PCR方法克隆抗角蛋白抗体的V区基因,并重组到scFv的表达载体中,在大肠杆菌进行表达,表达产物经体外变性复性后进行SDS-PAGE鉴定。用ELISA检测其特异性结合活性。结果:成功地克隆抗角蛋白抗体的V区基因,构建了scFv的表达载体,并在大肠杆菌中表达。ELISA检测证实,表达的scFv保留了亲本Fab抗体的特异结合活性。结论:获得功能性抗角蛋白的scFv,可用于进一步的临床应用研究。
- 张国民陈宇萍王刚刘玉峰
- 关键词:角蛋白SCFV
- 中国银屑病生物制剂治疗指南(2021)被引量:65
- 2021年
- 生物制剂在银屑病治疗中的应用越来越广泛,在治疗中重度、难治性及特殊类型银屑病方面发挥了积极的作用。在我国获批上市并已用于治疗银屑病的生物制剂包括肿瘤坏死因子α抑制剂、白细胞介素12/23抑制剂和白细胞介素17A抑制剂三大类7种制剂,如何合理有效安全地使用生物制剂已经成为临床工作中备受关注的问题。为此,我国银屑病诊疗及相关领域专家依据国内外研究数据和临床经验,结合中国银屑病患者的特点,在深入讨论的基础上制订本指南,从生物制剂的应用原则与方法、疗效与安全性、患者的筛查与监测、常见问题与对策以及特殊人群应用的注意事项等方面,为临床医生提供具体的指导意见。
- 中华医学会皮肤性病学分会中国医师协会皮肤科医师分会中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会王刚张学军
- 关键词:银屑病生物制剂
- 等离子光纤溶脂术在面部年轻化中的应用及体会
- 目的 介绍等离子光纤溶脂术在颜面微雕、面部年轻化中的应用,操作经验及常见并发症的处理方法 2013 年 8 月~2014 年5 月,我科采用离子光纤溶脂技术共治疗患者54 例.
- 赵涛廖文俊王刚
- 噬菌体抗体库几种筛选方法的比较被引量:11
- 2001年
- 目的 对多种不同的噬菌体抗体库筛选方法进行比较研究 .方法 应用抗原固相化吸附筛选法、生物素化抗原液相筛选法和解离速率筛选法对半合成噬菌体抗体库或轻链替换库进行抗角蛋白噬菌体抗体的筛选 ,比较各自的筛选效率和优缺点 .结果 3种方法筛选抗角蛋白抗体均获成功 ,抗原固相化吸附筛选法效果可靠 ,所获抗体特异性高但抗原消耗量大 ;生物素化抗原液相筛选法方法敏感且节省抗原 ,可以根据实验目的和抗体库性质灵活调节筛选体系 ,其不足是筛选获得的克隆中容易出现非特异性结合的克隆 ;而解离速率筛选是选择性获得高亲和力抗体的有效手段 .结论 不同的筛选策略各具优势 。
- 王刚刘玉峰王琰化冰
- 关键词:噬菌体抗体库
- 等离子光纤溶脂术在面部年轻化中的应用及体会
- 目的 介绍等离子光纤溶脂术在面部精细溶脂微雕及年轻化中的应用,操作经验及常见并发症的处理.方法 2013年8月~2014年3月,我科采用离子光纤溶脂技术共治疗患者63例(中轻度眼袋27例、面部皮肤松弛伴脂肪堆积36例)....
- 赵涛马翠玲王刚
- GDDR转基因小鼠的基因表达鉴定及功能初步分析
- 2015年
- 目的:对构建的胃癌相关下调基因GDDR(Gastric Dramatic Down-related)转基因小鼠进行鉴定及功能初步检测,为深一步研究GDDR的生物学功能提供可靠的动物模型。方法:对GDDR转基因和野生对照(未经过基因修饰)小鼠胃组织使用实时定量PCR检测其基因转录情况,western blot和免疫组化检测其组织蛋白表达水平及表达部位。通过胃组织进行糖原染色和胃粘膜表面主要糖蛋白MUC5AC行免疫组化染色对小鼠表型进行初步分析。结果:实时定量PCR、western blot和免疫组化结果均显示在GDDR转基因小鼠中胃粘膜GDDR的表达水平明显高于野生组。糖原染色结果显示GDDR转基因小鼠的粘液分泌及粘液厚度高于正常对照组,糖蛋白MUC5AC的表达也显著强于野生组。结论:经过鉴定GDDR转基因小鼠的外源性基因GDDR得到成功表达。通过对GDDR转基因小鼠表型的初步分析,提示GDDR可能参与胃粘膜粘液层的组成和增加粘液分泌从而发挥着保护胃粘膜的作用。
- 王刚方诚李先贵王飞赵占伟杜建军
- 关键词:转基因小鼠功能分析
- 从大容量人源噬菌体抗体库中筛选抗黑素瘤特异性抗体被引量:9
- 2005年
- 目的:用黑素瘤(MM)细胞系筛选大容量人源噬菌体抗体库,获得能与MM细胞特异性结合的人源性单链抗体(scFv)。方法:用完整的MM细胞对大容量人源噬菌体抗体库进行4轮“吸附-洗脱-扩增”筛选,并通过细胞ELISA法对随机挑选的克隆进行抗原结合活性测定,得到的阳性克隆进一步做DNA序列测定和免疫组化染色鉴定。结果:从80个随机挑选的克隆中,筛得1株抗MM细胞的抗体,该抗体对人的鳞癌细胞、角质形成细胞、黑素细胞、角蛋白、胰蛋白酶、转铁蛋白及小鼠IgG等细胞或抗原的结合反应均呈阴性。免疫组化染色显示,该抗体与MM细胞系Libr的染色呈阳性,对黑素细胞和痣细胞的染色呈阴性。DNA测序结果表明,该抗体VH属于人IgGVH5亚群,VL属于人Vκ亚型。结论:通过筛选噬菌体抗体库获得到1株抗MM细胞的特异性抗体,为MM的靶向治疗研究奠定了基础。
- 李淼陈宇萍王刚李春英殷河慧田艳丽高天文
- 关键词:噬菌体抗体库恶性黑素瘤单链抗体
- 胃癌穿孔的诊断与术式选择探讨被引量:1
- 2006年
- 目的:探讨胃癌穿孔的临床特点和不同术式的选择指征。方法:回顾性分析21例胃癌穿孔病人临床表现、术式选择和预后。结果:术前、术中诊断胃癌穿孔18例,误诊3例。行胃癌根治9例,姑息性胃癌切除5例,穿孔修补7例,3种术式术后各死亡1例,中位生存期分别为26.5、15.8和5.7个月。结论:提高术前、术中确诊率,据病人情况选择合适的术式是保障患者生命安全、延长患者生存时间、提高生存质量的关键。
- 王丁王刚张翀
- 关键词:胃肿瘤消化性溃疡穿孔外科手术
- 胃癌相关下调基因在胃癌及癌前病变中的表达及其意义被引量:10
- 2014年
- 目的观察胃癌相关下调基因(GDDR)在胃癌及癌前病变中的表达变化,探讨GDDR在胃黏膜癌变过程中的作用和意义。方法应用免疫组化SP法测定经胃镜活检和病理确诊的40例正常胃黏膜组织,40例慢性浅表性胃炎,40例慢性萎缩性胃炎,40例胃的肠上皮化生,20例轻度异型增生,20例重度异型增生和40例胃癌中的GDDR蛋白表达情况。结果从正常胃黏膜组织、慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃肠上皮化生、轻度异型增生、重度异型增生、胃癌的发展过程中,GDDR蛋白表达逐渐下调(平均秩次分别为190.70、182.70、146.24、104.40、70.33、47.20和40.20),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GDDR表达下调发生在胃癌形成早期,提示GDDR在胃癌的早期诊断和治疗中起重要作用,有望成为胃癌早诊的分子标记物和分子治疗的新靶点。
- 赵占伟方诚王飞双剑博王刚华谨杜建军
- 关键词:胃肿瘤癌前病变免疫组化