王凤君
- 作品数：104 被引量：364H指数：13
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- 不同营养支持途径对烧伤大鼠肠三叶因子表达的影响
- 目的 探讨不同营养支持途径对烧伤大鼠肠三叶因子(ITF)及其mRNA表达的影响及可能的机制.方法 采用30%体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型,随机分成伤前对照(C),静脉营养(PN)及肠道营养(EN)组.EN和PN组除营养支持途...
- 彭曦谭银玲陶麟辉王凤君赵云汪仕良
- 文献传递
- 高效稳定表达人缺氧诱导因子抑制因子肠上皮细胞株的建立被引量：1
- 2008年
- 目的通过转染含有人FIH全长cDNA的质粒pcDNA3.1-V5-His-A-FIH,建立FIH高效表达的肠上皮细胞株。方法对pcDNA3.1-V5-His-A-FIH进行扩增、提取,用脂质体Lipofectamine 2000将pcDNA3.1-V5-His-A-FIH转入Caco-2细胞,经G418筛选并逐步传代,RT-PCR和Western blot法检测阳性细胞克隆FIH mRNA和蛋白表达。结果转染pcDNA3.1-V5-His-A-FIH后Caco-2细胞FIH mRNA是普通Caco-2细胞的1.98倍,而FIH蛋白含量是普通Caco-2细胞的1.70倍。结论成功建立了高效、稳定表达人FIH基因的肠上皮细胞株。
- 王裴戚华兵陈传莉刘依凌赵云王凤君
- 关键词：肠上皮细胞基因表达
- 严重烫伤小鼠主要器官自噬变化的实验研究被引量：4
- 2014年
- 目的严重烧伤后常发生主要器官结构与功能损害,其发生机制尚不完全明确。文中旨在通过初步观察严重烫伤早期不同时相点小鼠主要器官的自噬变化情况,为研究自噬在严重烧伤后器官结构与功能损害中的作用奠定基础。方法选取BALB/C小鼠24只,随机分为6组,即烫伤前组(正常对照)、烫伤后1h、2h、6h、12h和24h组,烫伤各组常规制备30%总体表面积(total body surface area,TBSA)Ⅲ度烫伤小鼠模型。采集各组动物的心、肝、肺、肾组织,用免疫印迹法检测自噬相关蛋白Beclin 1、LC3蛋白表达,透射电镜观察细胞内自噬溶酶体情况。结果小鼠烫伤后1h心、肝、肺、肾组织Beclin 1较烫伤前逐渐增加[(0.70±0.19)vs(0.60±0.16)、(0.95±0.11)vs(0.65±0.20)、(0.88±0.08)vs(0.80±0.07)、(0.82±0.12)vs(0.70±0.14)],烫伤后1 h LC3蛋白表达较烫伤前逐渐增加[(3.48±1.25)vs(2.58±0.93)、(1.24±0.52)vs(0.91±0.24)、(1.12±0.27)vs(0.87±0.29)、(1.05±0.41)vs(0.68±0.21)],肝、肺、肾组织Beclin 1(1.37±0.18、1.27±0.06、1.51±0.20)及LC3蛋白表达(2.03±0.57、1.66±0.59、2.12±0.75)于伤后12 h达高峰,随后回落,但至伤后24h时仍高于正常对照。心组织Beclin 1及LC3蛋白表达则是持续性逐渐增加,至伤后24h时仍显著高于正常对照。透射电镜下烫伤小鼠心、肝、肺、肾组织细胞内自噬溶酶体较正常对照增多。结论严重烫伤后器官细胞自噬增加,可能在烫伤后器官组织结构与功能变化中起着重要作用。
- 孙春红陈刚王凤君闫柏刚
- 关键词：烫伤自噬器官BECLIN1LC3
- GLP-2R上调表达的Caco2细胞株克隆转染、筛选与鉴定
- 目的建立高血糖素样多肽-2受体(Glucagon Like Peptide-2 Receptor,GLP-2R)上调表达的 Caco2细胞株,为 GLP-2肠道保护机制构建体外模型。方法扩增抽提 GLP-2R/PCDNA...
- 赵云王凤君王裴戚华兵汪仕良
- 文献传递
- 不同营养支持途径对烧伤大鼠肠粘膜上皮细胞周期的影响被引量：13
- 2002年
- 目的 探讨肠道喂养及静脉营养对烧伤早期肠粘膜上皮细胞周期的影响。 方法 6 6只烧伤大鼠随机分为肠道喂养组 (EF组 )及静脉营养组 (PN组 ) ,分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液。每组设伤后 6、12、2 4、4 8、72h 5个观察时相点 ,每时相点 6只大鼠 ,并设正常对照 (6只 )。采用流式细胞技术进行空、回肠粘膜上皮细胞周期分析 ,以Westernblot法检测肠粘膜细胞周期蛋白D1、E及细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 2、4的表达。 结果 (1)肠粘膜上皮G0 /G1期细胞百分比的变化 :在空肠粘膜 ,伤后 72h时EF组明显低于PN组 (P <0 .0 5 ) ;在回肠粘膜 ,6、12、4 8、72h时EF组与PN组比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;(2 )伤后 4 8、72h时EF组S期细胞百分比均显著高于PN组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;(3)肠粘膜细胞周期蛋白D1表达的变化 :与对照值比较 ,EF组在伤后 2 4h及PN组在伤后 4 8h明显增高 (P <0 .0 5 ) ,72h时EF组显著高于PN组 (P <0 .0 5 ) ;(4)EF组肠粘膜细胞周期蛋白E的表达在伤后 72h显著高于对照值和PN组 (P <0 .0 5 ) ;(5 )PN、EF组肠粘膜CDK2的表达与对照值比较以及PN、EF两组间比较 ,差异均无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ,EF组CDK4的表达在 72h明显增高 (P <0 .0 5 )。 结论?
- 王凤君汪仕良赵云尤忠义王裴
- 关键词：营养支持途径肠营养细胞周期细胞周期蛋白类细胞周期蛋白质依赖激酶类肠粘膜上皮细胞
- RNA干扰抑制缺氧诱导因子1α表达对缺氧内皮细胞通透性的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 了解RNA干扰技术特异性抑制缺氧诱导因子1α（HIF-1α）表达对缺氧血管内皮细胞通透性的影响.方法 利用质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR构建针对人HIF-1α基因的RNA干扰表达载体.将VE细胞分为正常对照组、缺氧组（置于含体积分数1%O_2的混合气体环境中缺氧处理6 h）、转染组、转染缺氧组（转染载体后再进行缺氧处理）.采用RT-PCR法检测正常对照组、转染组HIF-1αmRNA表达,采用蛋白质印迹法检测4组细胞HIF-1α蛋白表达.荧光分光光度计检测单层VE细胞的通透性.将上述缺氧处理替换为HIF-1α特异性诱导剂1 mmol/L二甲氧乙二酰甘氨酸（DMOG）,分为DMOG组、转染DMOG组、正常对照组、转染组,采用蛋白质印迹法观察各组HIF-1α蛋白表达.除通透性检测数据用荧光强度值表示外,其他数据用密度比值表示.实验结果进行组间两两t检验.结果 正常对照组细胞HIF-1α mRNA相对含量为0.765±0.069,转染组细胞HIF-1α mRNA相对含量为0.093±0.007,组间比较,差异有统计学意义（t=16.696,P〈0.05）.转染缺氧组细胞HIF-1α蛋白含量为0.591±0.029,显著低于缺氧组（2.612±0.259,t=13.415,P〈0.05）;转染DMOG组HIF-1α蛋白含量为0.566±0.008,显著低于DMOG组（3.243±0.551,t=6.975,P〈0.05）.缺氧组单层血管内皮细胞通透性（41.6±11.1）较正常对照组（9.4±1.5）显著升高（t=6.238,P〈0.05）,转染缺氧组单层血管内皮细胞通透性（13.3±4.5）显著低于缺氧组（t=5.430,P〈0.05）.结论 采用特异性针对HIF-1α基因的RNA干扰技术,能有效抑制内皮细胞HIF-1α表达,并明显抑制缺氧引起的血管内皮细胞通透性增强.
- 刘琛王裴李牧王凤君
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基RNA干扰内皮细胞缺氧通透性
- 不同营养支持途径对烧伤大鼠肠粘液屏障的影响被引量：3
- 2002年
- 目的 观察不同营养支持途径对烧伤大鼠肠粘液屏障的影响并探讨其机制。方法 采用 3 0 %TBSAⅢ度烧伤大鼠模型 ,随机分成伤前对照组 (C组 )、静脉营养组 (PN组 )及肠道营养组 (EN组 ) ,EN组和PN组给予等氮、等热卡、等体积的营养液。在此基础上动态观察肠粘液层厚度、粘液中蛋白质、己糖及唾液酸的含量。 结果 烧伤后肠粘液层变薄 ,粘液中蛋白质、己糖和唾液酸的含量明显低于伤前。两组相比EN组大鼠肠粘液层厚度、粘液中己糖和唾液酸的含量均明显高于PN组 ,而粘液中蛋白质含量两组相差不显著。 结论 严重烧伤后杯状细胞合成粘液的能力下降 ,肠粘液层变薄 ,粘液成分改变。与静脉营养相比 ,肠道营养可减轻伤后杯状细胞受损程度 ,促进肠粘液合成 ,维持肠粘液化学成分的稳定 。
- 彭曦汪仕良王凤君赵云陶凌辉尤忠义
- 关键词：营养支持烧伤
- 肠三叶因子在大鼠肠道中表达的实验研究被引量：13
- 2000年
- 目的 研究肠三叶因子 (ITF)及其mRNA在大鼠肠道的分布规律。方法 采用原位杂交、免疫组化等手段观察了ITF及ITFmRNA在大鼠肠道的表达并使用高效液相色谱仪检测了不同肠段ITF的含量。结果 从十二指肠至结肠均有ITF及ITFmRNA表达 ,主要分布于肠绒毛杯状细胞 ,其中ITFmRNA仅在杯状细胞的基底和边缘表达 ,其它区域的杯状细胞则呈ITFmRNA阴性反应 ,同时发现部分其它部位的肠上皮细胞中亦有少量ITF及ITFmRNA表达。ITF定量分析显示 ,整个肠道中以十二指肠含量最高 ,空回肠次之 ,结肠含量较低 ,各段小肠中ITF含量差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,但都明显高于结肠 (P <0 .0 1)。结论 杯状细胞是合成ITF的主要场所 ,ITF在肠道分布的差异可能同各肠段分泌的粘液性质不同有关。
- 彭曦谭银玲陶凌辉王凤君赵云王裴尤忠义汪仕良
- 关键词：肠三叶因子肠道ITFMRNA
- 大鼠静脉输液装置的设计和制作被引量：17
- 1999年
- 目的：介绍一种自行设计的鼠用静脉输液装置。方法：将静脉留置管、活动套管及转轴连在一起，制成一小巧、灵活的输液装置。结果：大鼠在输液时可自由活动，留置管无脱落、扭曲，置管7d无不良反应。结论：该装置设计合理、制作简单、价格低廉，适用范围广。
- 彭曦汪仕良谭银铃尤忠义王凤君
- 关键词：静脉输液输液装置
- 肠道营养促进烧伤大鼠肠三叶因子表达的实验研究被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨肠道营养对烧伤大鼠肠三叶因子 (ITF)及其mRNA表达的影响。方法 采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,随机分成伤前对照 (C) ,静脉营养 (PN)及肠道营养 (EN)组。采用原位杂交、免疫组化和高效液相色谱等手段检测了烧伤后大鼠肠组织中肠三叶因子 (ITF)及ITFmRNA的变化 ,并观察了两组大鼠肠道受损情况。结果 正常大鼠小肠中ITF及ITFmRNA均有一定表达 ,它们主要分布于肠绒毛杯状细胞中。烧伤后肠道组织结构受损 ,ITFmRNA表达明显降低 ,肠杯状细胞分泌ITF的能力大幅下降 ,特别是ITF二聚体的含量远远低于伤前 (P <0 .0 1)。两组比较 ,尽管肠道营养不能逆转烧伤后ITF下降的趋势 ,但能明显抑制其下降幅度 ,同时EN组肠粘膜受损程度也明显低于PN组。结论 严重烧伤后肠粘膜结构受损是ITF合成下降的主要原因 ,与静脉营养相比肠道营养可减轻肠粘膜受损程度 ,降低ITF特别是ITF二聚体的下降幅度。
- 彭曦谭银玲陶麟辉王凤君赵云汪仕良
- 关键词：肠三叶因子肠道营养静脉营养烧伤
