熊静
- 作品数：52 被引量：67H指数：5
- 供职机构：集美大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 不同方法提取鳗鲡病原菌DNA模板的差异分析被引量：3
- 2012年
- 利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚-氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析.结果表明:1)不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DNA为模板,均能成功扩增到细菌16S rD-NA和外膜蛋白的保守序列.其中,酚-氯仿提取的模板DNA浓度较低、纯度较高;水煮法和碱裂解法提取的模板DNA浓度较高、纯度较低.2)电泳显示,3种方法获得的模板DNA扩增出的16S rDNA保守序列条带均一,没有显著差异,但在外膜蛋白保守序列的扩增中却因菌种和模板提取方法的不同而存在差异.
- 熊静关瑞章郭松林黄文树关淑芳
- 关键词：碱裂解法外膜蛋白基因
- pH和色谱柱对日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果的影响及抗菌活性检测被引量：3
- 2013年
- 为了能够快捷地分离纯化出单一的抗菌肽,实验采用不同pH值(离子交换流动相pH3.0、4.0、5.0;反相液相层析流动相pH 2.0、4.5、7.0)缓冲液,不同色谱柱(离子交换和凝胶过滤层析柱分别与反相液相层析柱)联用对日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果进行了比较,并分析了琼脂板扩散法和微孔液体培养法检测抗菌活性的优缺点。结果显示:pH 4.0缓冲液为最佳离子交换流动相,蛋白提取率为16.43%,得到2个洗脱峰;反相液相层析3种pH缓冲液分离效果均不理想,凝胶过滤层析柱与反相液相层析柱联用能明显改善日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果,洗脱峰数量较多,峰形单一且尖锐狭窄,基线平而低。琼脂板扩散法检测抗菌活性操作简单,实验结果直观,但所需蛋白量较多,可用于蛋白粗提物抗菌活性的检测;微孔液体培养法检测抗菌活性灵敏,所需蛋白较少,可用于后期色谱分离纯化蛋白抗菌活性的检测。
- 张东玲关瑞章黄文树熊静徐继松宋宝东
- 关键词：日本鳗鲡抗菌肽PH色谱柱抗菌活性
- 多重实时荧光定量PCR技术快速检测鳗鲡肠毒性及溶血性气单胞菌
- 多重实时荧光定量PCR技术快速检测鳗鲡肠毒性及溶血性气单胞菌，属于生物技术领域。设计基于TaqMan探针的qPCR引物，如序列表SEQ ID NO.1～12所示。提供基于Taqman探针的双重(act+ast,alt+h...
- 熊静黄文树黄艺馨邓睿李林益
- 一种日本鳗鲡IFNc1基因启动子及其应用
- 本发明涉及日本鳗鲡IFNc1基因启动子及其应用。本发明日本鳗鲡IFNc1基因启动子具有较强的启动子活性，可为研究鱼类IFNc1基因的表达调控机制的研究提供良好的实验系统，同时也可以利用该启动子构建表达载体后高效表达外源基...
- 黄文树相超黄贝李东利熊静焦志远
- 石榴皮有效抑菌部位萃取工艺的比较分析
- 2016年
- [目的]优化石榴皮有效抑菌部位的萃取工艺。[方法]采用超声辅助萃取法,选取纯水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正己烷6种溶剂萃取石榴皮抑菌药液。通过琼脂平板法测定石榴皮抑菌药液对9株水产常见致病菌的最低抑菌浓度,正交试验方法考察溶剂浓度、料液比、温度、超声时间对抑菌率的影响,进一步优化石榴皮抑菌药液的萃取工艺。[结果]比较不同溶剂抑菌效果,表明乙醇为最佳萃取溶剂,其萃取部位平均最低抑菌浓度为0.517 mg/m L。在乙醇体积分数70%、料液比1∶20 g/m L、萃取温度60℃、超声时间40 min的最佳萃取工艺条件下,萃取药液平均最低抑菌浓度为0.442 mg/m L。[结论]研究可为石榴皮在水产养殖细菌性疾病防控中的应用和石榴皮抗菌剂的研制及工业化生产提供理论依据。
- 张坤林茂李忠琴刘宏伟熊静赖晓健
- 关键词：石榴皮超声辅助萃取抑菌正交试验
- 7株鳗鲡致病性气单胞菌毒力基因\胞外产物及其活性的比较
- 为探讨致病性气单胞菌的致病力与其胞外产物和毒力因子之间的关系,联合利用PCR、SDS-PAGE、平板扩散及分子进化等方法对7株鳗源气单胞菌的胞外毒力因子进行比较研究.结果显示,该7株致病菌所含有的胞外毒力基因(hly、a...
- 熊静赖晓健余钦郭松林徐继松黄文树
- 关键词：鳗鲡致病性气单胞菌毒力基因胞外产物生物活性
- 检测实验动物金黄色葡萄球菌的gyrB引物组合
- 检测实验动物金黄色葡萄球菌的gyrB引物组合，属于实验动物病原微生物检测技术领域。所述引物组合包括外引物F3、B3，内引物FIP、BIP，反应体系；反应体系包括FIP、BIP、F3、B3、2×反应缓冲液、Bst DNA聚...
- 熊静黄文树赖晓健徐继松
- 文献传递
- 7株鳗鲡致病性气单胞菌毒力基因胞外产物及其活性比较被引量：9
- 2017年
- 为探讨致病性气单胞菌的致病力与其胞外产物和毒力因子之间的关系,联合利用PCR、SDS-PAGE、平板扩散及分子进化等方法对7株鳗源气单胞菌的胞外毒力因子进行比较研究。结果显示,该7株致病菌所含有的胞外毒力基因(hly、aer、ast、act、alt、ahpA、epr和exu)在种类和数量上差异显著,其中hly可能是鳗源气单胞菌重要的致病因子;不同致病菌的胞外蛋白在种类和数量上都存在差异,其中分子质量约为50.7ku的蛋白,其分泌量高且在鳗源气单胞致病菌中较保守;该7株致病菌胞外产物均具有溶血、酪蛋白酶和卵磷脂酶活性,胞外产物活性与毒力基因的分布一致;胞外毒素基因hly和ahpA具有较高的属间保守性,而exu则具有较好的种间特异性。
- 熊静赖晓健余钦郭松林徐继松黄文树
- 关键词：气单胞菌胞外产物毒力基因
- 鳗鲡疱疹病毒和圆环病毒双重实时荧光定量PCR检测方法
- 鳗鲡疱疹病毒和圆环病毒双重实时荧光定量PCR检测方法，涉及分子生物学。1)设计特异性引物组合，基于Taqman探针的双重定量PCR检测鳗鲡疱疹病毒和圆环病毒的特异性引物组合的核酸序列如序列表SEQ ID NO.1～6所示...
- 熊静黄文树黄艺馨汪钰哲黄贝
- 基于亲水性可控棉线有效分离苏丹I和罗丹明B
- 2021年
- 近年来,食品安全问题引起了人们的广泛关注。非食用色素因价格低廉、着色能力强而被非法用于食品加工过程,严重威胁消费者生命健康。苏丹I和罗丹明B是食品加工中最常被滥用的两种典型非食用有机着色剂,进入人体后会在相应酶的作用下产生致癌物。高效液相色谱法是用于违禁色素分离检测的主要方法,但该方法所需仪器昂贵,专业程度高且操作繁琐,限制了其在色素鉴定中的应用。棉线作为一种低成本固定相已被用于有机色素的色谱分离,但是对于其亲疏水性在色素分离中的作用目前仍不清楚,也未见将该系统直接用于色素分离收集的报道。针对上述问题,本研究采用等离子体可控预处理的方式实现对棉线亲疏水性能的调控,并进一步探究了棉线亲疏水性在棉线基色谱分离和收集过程中的作用。在等离子体处理过程中,调整了棉线的缠绕方式、等离子体功率和暴露时间,并通过扫描电镜、接触角测试和线上液体流动实验对棉线内部结构以及棉线亲疏水性进行了表征。结果表明,等离子体处理并不影响棉线的加捻结构和纤维间空隙大小;棉线以“之”字形悬空缠绕在支架上可增大暴露面积,从而获得更高的亲水性能;棉线的亲水性高度依赖于等离子处理时间和仪器功率,在10.15 W的等离子机中处理8 min被证明是最佳处理参数,可使棉线具有最高的亲水性能。X射线光电子能谱分析(XPS)表明,经等离子体处理后棉线的含氧基团显著增多,这可能是棉线亲水性提高的原因。以乙醇/水溶液为展开剂,探究了棉线亲水性对色素分离的影响,发现棉线亲水性提高可以显著增强色素的分离效果。色素与棉线的结合力以及流动相在棉线上的流动能力可能是色素分离效果的决定性因素。在色素分离收集实验中,分别以乙醇/水溶液和甲酸/甲醇溶液作为展开剂对罗丹明B和苏
- 熊静李亚丹伍亮李亚丹王鑫梁莉萍乔琰鲁志松余玲
- 关键词：棉线色谱法亲水性微流体
