武乃金
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结肠癌细胞系SW620中ALDH1br细胞特性的研究
- 目的:检测结肠癌细胞系SW620中ALDH1br细胞是否具有肿瘤干细胞样细胞的特性。
方法:按照ATCC标准培养SW620细胞,用ALDEFLUOR试剂盒联合FACS分选ALDH1br细胞,无血清培养2w后再次进行...
- 武乃金
- 关键词：结肠癌细胞系SW620干细胞样细胞耐药蛋白FACS
- 人结直肠癌细胞株来源的HCT116肿瘤细胞球的转移相关特性被引量：2
- 2011年
- 目的:无血清悬浮培养生成HCT116肿瘤细胞球,检测球中CD133表面标志分子的细胞定位,以及CD133+细胞所占的比例,并探索肿瘤细胞球发生上皮-间质转化与其转移能力之间的可能联系。方法:HCT116细胞在添加了细胞生长因子的无血清培养液(serum-freemedium,SFM)中悬浮培养生成细胞球,应用激光共聚焦和流式细胞仪检测CD133表面标志分子的细胞定位及细胞球中CD133+细胞的含量。Transwell小室实验、免疫荧光及反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)法分别检测细胞球的体外转移能力以及上皮-间质转化关键分子的表达情况。结果:HCT116细胞球中CD133表面标志分子定位于各个球层面的细胞膜,并且CD133+细胞比例显著增多。细胞球高表达间质化分子N-cadherin及Vimentin,而上皮化分子E-cadherin表达水平下降,并具有更强的转移能力。结论:HCT116细胞球中富含CD133+细胞,CD133表面标志分子定位于细胞膜,细胞球可能通过上皮-间质转化而获得更强的转移能力。
- 贾健锋程勇武乃金任林飞徐维刘弈武杨小丁
- 关键词：肿瘤干细胞上皮-间质转化
- LoVo细胞系中结肠癌干细胞样细胞的分离、培养及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:从结肠癌LoVo细胞系中分离、鉴定具有CD44+/EPCAMhigh特异表型的结肠癌干细胞样细胞,观察其生物学行为,证实该细胞系中结肠癌干细胞样细胞的存在。方法:从普通血清培养的LoVo细胞系中以流式细胞仪分选具有CD44+/EPCAMhigh表型的细胞,接种于添加生长因子的无血清培养基中,观察其增殖过程,继而诱导分化。MTT法、流式细胞术检测CD44+/EPCAMhigh、EPCAMlow和未分选LoVo细胞的增殖能力及细胞周期分布。3种细胞接种裸鼠,比较不同细胞的成瘤率;免疫荧光技术检测小鼠次代CD44+/EPCAMhigh细胞中CD44/EPCAM的表达。结果:LoVo细胞中有17.4%的CD44+/EPCAMhigh细胞,并能在添加生长因子的无血清培养基中呈细胞球样生长,且可连续传代;在血清的诱导下,呈贴壁分化生长,其形态与未分选LoVo细胞无差别。CD44+/EPCAMhigh细胞增殖能力高于EPCAMlow细胞及未分选LoVo细胞,且细胞周期多集中在G0/G1期。以500个CD44+/EPCAMhigh细胞接种裸鼠成瘤率为90%(9/10),而1×104个EPCAMlow细胞成瘤率为0(0/10)。小鼠移植瘤中次代CD44+/EPCAMhigh细胞仍能少量表达CD44和EPCAM。结论:LoVo细胞中存在CD44+/EPCAMhigh结肠癌干细胞样细胞,CD44+/EPCAMhigh可用于结肠癌肿瘤干细胞的深入研究。
- 张洪也程勇胡祥吕原武乃金
- 关键词：结肠癌LOVO细胞株肿瘤干细胞干细胞样细胞
- 结肠癌细胞系SW620中ALDH1^(br)细胞特性的研究被引量：1
- 2011年
- 目的检测结肠癌细胞系SW620中是否存在肿瘤干细胞样细胞。方法按照ATCC标准培养SW620细胞,用AL-DEFLUOR试剂盒联合荧光激活细胞分类术(FACS)分选ALDH1br细胞,无血清培养2周后再次进行FACS检测,观察ALDH1br细胞自我更新及增殖情况;检测ALDH1br细胞血清诱导1周后分化标志物CK20含量、ALDH1活性及耐药蛋白ABCG2含量的变化;Transwell小室实验检测ALDH1br细胞的迁移能力。结果经FACS检测,SW620中ALDH1br细胞比例为3.59%;无血清培养2周后,ALDH1br细胞增加至43.0%±2.2%,且不对称性分裂为ALDH1br细胞和ALDH1-细胞;经血清诱导1周后,ALDH1br细胞分化标志物CK20含量明显增高(0.64±0.040、.01±0.02,P<0.05),且ALDH1br细胞比例下降(1.73%);分选后ALDH1br细胞的耐药蛋白ABCG2含量也明显增加(0.27±0.03、0.90±0.05,P<0.05);ALDH1br细胞比普通的SW620细胞具有更强的迁移能力(细胞穿孔数分别为58.5±3.6、9.4±2.1,P<0.05)。结论运用ALDEFLUOR试剂联合FACS从结肠癌细胞系SW620中分选出的ALDH1br细胞具有肿瘤干细胞样特征。
- 武乃金程勇贾健锋任林飞徐维
- 关键词：结肠肿瘤肿瘤干细胞
