柏立新
- 作品数：147 被引量：722H指数：14
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生水利工程更多>>
- 绿盲蝽丝氨酸蛋白酶基因AlSP3的鉴定及表达谱分析被引量：5
- 2012年
- 从绿盲蝽成虫体内克隆了1个丝氨酸蛋白酶基因,命名为AlSP3(GenBank序列号JQ609681)。经序列分析,该基因开放阅读框长1 041 bp,编码346个氨基酸,预测分子量为3.872×104,理论等电点为9.35,N-末端疏水区包含有19个氨基酸组成的信号肽。蛋白质特征分析结果表明,该基因翻译后的蛋白质具有丝氨酸蛋白酶的典型特征。利用荧光定量PCR技术对绿盲蝽取食不同寄主植物后AlSP3基因的表达谱进行分析,结果表明:相对于其他寄主植物,雌成虫取食转Bt基因棉花后AlSP3基因的表达量最高,比对照上升了11.62倍,并显著高于取食常规棉(P<0.01);雌成虫取食常规棉后,AlSP3基因的表达量上升了6.42倍,仅次于取食Bt棉和豇豆,并显著高于取食其他寄主植物(P<0.01)。雄成虫取食常规棉后,AlSP3基因的表达水平仅次于取食蚕豆,上升了9.37倍,并显著高于取食Bt棉(P<0.01)。由此可见,AlSP3基因是绿盲蝽成虫取食常规棉后的重要消化酶基因,并对雌成虫适应取食Bt棉具有重要作用。
- 孙洋柏立新张永军肖留斌谭永安盛洋
- 关键词：绿盲蝽丝氨酸蛋白酶表达谱分析寄主BT棉
- 寄主植物对Q型烟粉虱生长发育、海藻糖含量及2种酶活性的影响被引量：5
- 2012年
- 以番茄、黄瓜、棉花及苘麻为供试寄主,测定了取食这4种寄主后的Q型烟粉虱的体型、发育历期、存活率等生物学参数与海藻糖含量及2种酶活性。结果表明:Q型烟粉虱若虫在番茄和黄瓜上的体型大于棉花和苘麻上的;在番茄上的若虫历期最短(17.01 d),其余依次为黄瓜(18.25 d)、苘麻(20.31 d)、棉花(20.57 d);Q型烟粉虱在番茄、黄瓜、棉花及苘麻上存活率分别为63.71%、61.33%、53.77%和51.76%;与棉花和苘麻相比,番茄和黄瓜明显有利于Q型烟粉虱的种群繁殖,在番茄、黄瓜、棉花及苘麻上的成虫寿命和单雌产卵量分别为24.55 d和268.20粒、24.65 d和202.65粒、23.30 d和173.45粒、17.10 d和146.70粒;以取食番茄的Q型烟粉虱海藻糖含量最高(1头9.38μg),取食棉花的最低(1头7.15μg),但海藻糖酶活性和海藻糖含量并未呈正相关关系;取食番茄的Q型烟粉虱碱性磷酸酶活性也最高[58.57 OD/(min.ml)]。总之,番茄是Q型烟粉虱最嗜好寄主。
- 谭永安肖留斌孙洋柏立新
- 关键词：Q型烟粉虱寄主海藻糖海藻糖酶碱性磷酸酶
- 绿盲蝽膜结合型海藻糖酶ALTre-2基因表达、纯化及酶学特性被引量：6
- 2013年
- 以绿盲蝽为材料,在前期获得绿盲蝽膜结合型海藻糖酶(ALTre-2)基因的基础上,构建了ALTre-2原核表达载体(pET28a-ALTre-2),经IPTG诱导表达、变性、复性和蛋白纯化后,获得具海藻糖酶活力的重组蛋白,最后在以海藻糖为底物及重组蛋白浓度为1.1 mg·mL-1的条件下,对纯化得到的重组ALTre-2蛋白进行活性检测,确定了其酶促反应的最佳pH和最适温度。试验结果表明:ALTre-2基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够高效表达一个约60 kD大小的蛋白,SDS-PAGE显示该蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性及蛋白纯化获得了具海藻糖酶活力的重组蛋白;该重组ALTre-2蛋白在pH为7.0时活性最高,同时重组ALTre-2蛋白酶活性最适温度是50℃。研究结果为深入探讨绿盲蝽膜结合型海藻糖酶分子调控机制奠定基础。
- 谭永安肖留斌柏立新孙洋
- 关键词：绿盲蝽原核表达酶学特性
- 绿盲蝽危害对棉花防御性酶活性及丙二醛含量的诱导被引量：43
- 2010年
- 以2种转基因棉品种国抗22、sGK321及其亲本泗棉3号、石远321为材料,研究受绿盲蝽危害胁迫后,其叶片防御性酶活性及丙二醛含量等生理指标的动态。结果表明:接种绿盲蝽前后,2种转基因棉花品种叶片防御性酶活性及丙二醛含量与其亲本棉花相比差异均不显著,说明外源基因的导入对棉花各项生理指标的变化无影响。同一棉花品种在绿盲蝽不同刺吸诱导的时间中,叶片防御性酶活性及丙二醛含量差异均达到极显著水平;在品种和接虫时间互作效应中,SOD、MDA、PAL活性或含量差异达显著或极显著水平,说明品种与接虫时间在这几个指标水平上存在真实的交互作用,而其余生理指标的差异不显著。
- 谭永安柏立新肖留斌魏书艳赵洪霞
- 关键词：棉花绿盲蝽丙二醛
- 绿盲蝽超气门蛋白特异性多克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种绿盲蝽超气门蛋白(ultraspiracle protein，ALUSP)的多克隆抗体及其制备方法和应用。本发明将经原核表达纯化的ALUSP重组蛋白应用于免疫家兔后制备了多克隆抗体，通过利用ELISA法确...
- 谭永安肖留斌柏立新孙洋赵静
- 文献传递
- 抗绿盲蝽蜕皮激素受体蛋白的单克隆抗体及其用途
- 本发明公开了一种特异性结合绿盲蝽AlEcR‑A蛋白的单克隆抗体。本发明还公开了一种小鼠杂交瘤细胞株，其保藏编号为CCTCC NO：C2016206。本发明制备的单克隆抗体可与绿盲蝽总蛋白及AlEcR‑A重组蛋白特异性结合...
- 谭永安肖留斌柏立新赵静孙洋
- 文献传递
- 一种绿盲蝽丝氨酸蛋白酶AlSP4、其多克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种绿盲蝽丝氨酸蛋白酶(<i>Apolygus？lucorum</i>？serine？proteases，AlSP4)、其多克隆抗体及其制备方法和应用。本发明将通过原核表达纯化技术，体...
- 孙洋赵静谭永安肖留斌柏立新戴瀚洋
- 文献传递
- 转基因杂交棉南抗3号田间抗棉铃虫效果与结铃性能考察
- 2001年
- ２０００年７月７日、８月７日对转Ｂｔ基因抗虫杂交棉南抗３号两次模拟棉铃虫特大发生年份虫口密度进行棉田大罩笼接虫，考察其抗虫效果和受害后的结铃结构。考察结果表明，南抗３号对棉铃虫具有较高的抗性，受害后仍表现较强的结铃性。两次考察，南抗３号棉铃虫活虫数比对照苏棉１２号分别平均减少８６．２％和９３．８％；蕾害率减少８５．７％和８２．４％；小铃被害减少９２．８％、９１． ７％。 ８月 １７日大铃被害减少 ９２． ９％。南抗 ３号总结铃数比苏棉 １２号增加 ３１． １６％，且结铃早、吐絮快，到１０月１１日平均吐絮率达７９．２９％，比对照４７．２４％高３２．０５个百分点。
- 束春娥柏立新唐灿明张天真
- 关键词：转基因抗虫棉棉铃虫抗虫性
- 高品质抗虫棉花新种质的培育被引量：1
- 2008年
- 以3个野生棉种质渐渗系为基础材料,通过与转Bt基因抗虫棉品种(系)杂交,利用常规育种程序,开展高品质抗虫棉花新种质的培育。通过对9份杂种后代的高世代品系进行抗虫性状的标记基因检测、抗虫性鉴定、农艺性状鉴定和纤维品质检测,培育出4份高品质抗虫棉花新种质。高品质抗虫棉花新种质系可以作为高品质、高产、抗病虫棉花新品种选育的桥梁亲本,多目标性状聚合到同一亲本中,有利于加速育种进程。
- 吴巧娟肖松华刘剑光狄佳春许乃银陈旭升马晓杰柏立新
- 关键词：棉花BT基因抗虫性状
- 绿盲蝽成虫对六种寄主及其挥发物的选择趋势被引量：7
- 2012年
- 针对绿盲蝽Apolygus lucorum(Meyer-Dür)6种主要寄主,分别于5～10叶期和花蕾期,采用室内"Y"型嗅觉仪和田间罩笼接虫方法,研究了绿盲蝽成虫对不同寄主及其挥发物的选择趋势。田间罩笼接虫试验结果表明:5～10叶期的茼蒿、国抗22及泗棉3号上绿盲蝽虫量居多,绿豆次之,大豆和豇豆上的较少;花蕾期的茼蒿、绿豆、国抗22及泗棉3号上绿盲蝽较多,而豇豆、大豆上较少。以5～10叶期和花蕾期的上述6种寄主为实验材料,以无寄主花盆为空白对照,每期各成对设置17个气源组合,采用室内"Y"型嗅觉仪测定绿盲蝽成虫对这6种寄主气源的选择趋性。不同气源组合测定结果表明,绿盲蝽对5～10叶期植物性气源的选择趋势为:国抗22>茼蒿>绿豆>泗棉3号>大豆>豇豆;绿盲蝽对花蕾期植物性气源的选择趋势为:绿豆>茼蒿>国抗22>泗棉3号>豇豆>大豆。上述不同选择性试验结果综合表明,绿盲蝽成虫对5～10叶期和花蕾期不同寄主的选择趋势基本一致。
- 吴国强肖留斌谭永安孙洋柏立新
- 关键词：绿盲蝽寄主生育期
