杨湘越
- 作品数：117 被引量：225H指数：9
- 供职机构：南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：福建省农科院青年科技人才创新基金福建省科技计划重点项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C204及其筛选方法和应用
- 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C204及其筛选方法和应用，所述核酸适配体C204的序列为：AGGGCCGAGCTCACTTGTCTTAGTCCGACATGGTGCCTCCCTGCCCCAGAGCTCC...
- 王开宇兰小鹏廖剑洪笑迁闫慧慧杨湘越
- 文献传递
- 人自身抗原U1RNP 70K的酵母重组分泌表达及斑点免疫金渗滤检测法的建立被引量：1
- 2011年
- 目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-U1RNP 70K。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western b lot)鉴定。用所表达的蛋白包被硝酸纤维素膜,建立检测U1RNP抗体的斑点免疫金渗滤法(dot immuogold filtrationassay,D IGFA)。结果 PCR产物约为1300 bp,接近于预期的1314 bp,pPIC9k-U1RNP 70K重组阳性克隆测序结果与Gen-Bank中的U1RNP 70K序列完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物U1RNP 70K的相对分子质量约70 000。W estern b lot证实表达产物具有天然U1RNP 70K分子的免疫原性,阴性对照菌无目的条带表达。D IGFA的检测结果与欧蒙酶免疫斑点法的阳性符合率为94.74%(54/57),阴性符合率为98.00%(49/50),总符合率为96.26%(103/107)。2种方法检测结果无统计学显著差异(P=0.617)。结论在毕赤酵母中成功地高分泌表达了U1RNP 70K蛋白,并建立了简便、快速、准确检测U1RNP抗体的DIGFA方法。
- 杨湘越张惠菊徐秀云兰小鹏朱忠勇
- 关键词：自身抗原克隆巴斯德毕赤酵母斑点免疫金渗滤法
- 猪囊尾蚴抗原cC1酵母表达产物性状的比较分析
- 猪囊尾蚴抗原cC1是孙树汉教授在猪囊尾蚴cCDA文库中筛选并命名的一个具有免疫保护作用的人猪共同抗原<'[1]>,也是一个有希望的猪囊尾蚴候选亚单位疫苗.目前已在大肠杆菌和巴斯德毕赤酵母中获得了高效表达<'[2,3]>,...
- 杨湘越兰小鹏颜宏利陈蕊雯孙树汉
- 关键词：猪囊尾蚴抗原酵母表达免疫保护毕赤酵母表达系统
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C205及其筛选方法和应用
- 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C205及其筛选方法和应用，所述核酸适配体C205的序列为：AGGGCCGAGCTCACTTGTGGGGCAGGTGATCGGCAGTGGCTTTGGCGCGCGCTCC...
- 王开宇兰小鹏廖剑洪笑迁闫慧慧杨湘越
- 文献传递
- 筛选环孢霉素A适体的SELEX技术的建立(英文)被引量：10
- 2007年
- 体外合成一个全长78个核苷酸,中间含35个随机序列的随机单链寡核苷酸序列(ssDNA)文库,运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,以环孢霉素A(CsA)为靶目标,以磁珠作为筛选介质,利用生物素-链酶抗生物素-辣根过氧化物酶系统,检测每轮ssDNA文库与CsA的亲和力,筛选并鉴定CsA特异性的适体.经过11轮的筛选,ssDNA文库与CsA的亲和力呈上升趋势.将第10轮筛选产物克隆测序并运用相关软件进行一级结构和二级结构分析.随机挑选的19个克隆适体,根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环(发夹)为主,这可能是适体与CsA作用的部位.CsA特异性的适体将用于酶联法、免疫荧光法等对CsA进行检测.
- 李卫滨兰小鹏杨湘越周长邵
- 关键词：环孢霉素A适体
- 诺氟沙星金属盐的合成及体外抑菌实验被引量：3
- 2007年
- 目的:制备诺氟沙星金属盐类新化学单体及观察其体外抑菌活性。方法:以诺氟沙星及数种金属盐为原料进行化学合成,以固体培养基平板药敏试验方法对合成品作体外抑菌试验观察其活性。结果:完成诺氟沙星银、诺氟沙星锌、诺氟沙星铈、诺氟沙星钴、诺氟沙星铋5种金属盐的合成及其初步质量标准考察。结论:体外抑菌实验表明,诺氟沙星银、诺氟沙星锌、诺氟沙星铈、诺氟沙星钴、诺氟沙星铋对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓假单胞菌的抑制作用明显高于磺胺嘧啶银。
- 贺全山杨昌云陈维中杨湘越戎姜凯
- 关键词：诺氟沙星锌体外抑菌
- Annexin32的酵母表达及免疫原性分析被引量：2
- 2003年
- 杨湘越张毅颜宏利陈蕊雯武圣明孙树汉
- 关键词：酵母表达免疫原性细胞凋亡菌种
- 猪囊尾蚴cC1亚单位疫苗毕赤酵母高表达体系的优化
- 2003年
- 杨湘越兰小鹏孙树汉
- 关键词：猪囊尾蚴疫苗毕赤酵母囊虫病菌种
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C202及其筛选方法和应用
- 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素C2的核酸适配体C202及其筛选方法和应用，核酸适配体C202的序列为：AGGGCCGAGCTCACTTGTCACGGGCACCCTAACTGGGAGGAGGCAGGATAACACCGC...
- 王开宇兰小鹏廖剑洪笑迁闫慧慧杨湘越
- 文献传递
- 基于毕赤酵母系统表达的重组自身免疫调节生物制剂的研究进展
- 免疫调节制剂的靶目标为免疫系统相关分子如细胞因子、共刺激分子等，在治疗自身免疫病中很有潜力。免疫调节制剂的生产需要合适的表达系统，而毕赤酵母系统具有便于基因操作、易培养和高密度发酵等特征；更重要的是，毕赤酵母为真核细胞，...
- 杨湘越康伟兰小鹏
- 关键词：毕赤酵母表达系统自身免疫病
