杨浪
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人RUNX2基因的shRNA及其重组干扰载体和应用
- 本发明公开了人RUNX2基因的shRNA及其重组干扰载体和应用，shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2第5位至第52位所示，该序列能够干扰RUNX2基因表达，降低细胞成球能力、降低细胞克隆形成能力和降低细胞侵袭能...
- 郭政军卞修武杨浪任勇刘强姬成东崔巍王强崔有宏
- 文献传递
- 人食管鳞癌细胞系EC109中肿瘤干细胞的分离(富集)与鉴定被引量：4
- 2012年
- 目的运用无血清成球培养法从人食管鳞癌细胞系EC109中分离/富集肿瘤干细胞,并对其"干性"特性进行鉴定。方法将EC109细胞接种至添加1XB27的干细胞培养基(DMEM/F12 1:1,无血清),于poly-Hema包被的培养皿或低黏附培养板中培养,获取细胞球。采用实时定量PCR方法检测其干性相关转录因子的基因表达,连续传代和平板克隆形成实验评价其自我更新能力,免疫荧光细胞化学法检测其分化前后干性相关转录因子和分化标志物的表达变化,以裸鼠移植瘤实验检测其体内成瘤能力。结果培养5d能获得EC109细胞的细胞球。细胞球细胞高表达Oct4等干性相关转录因子,具有自我更新能力、分化潜能。裸鼠体内1×104个细胞球细胞能启动肿瘤形成,而单层培养细胞则需要1×105个细胞,且同数量级的细胞球细胞较单层培养细胞所形成的肿瘤体积大。结论无血清成球培养法能从食管鳞癌细胞系EC109获得细胞球,细胞球富集了肿瘤干细胞。
- 崔翔杨浪于茜任勇郭政军刘强刘庆崔有宏卞修武张成武
- 关键词：食管鳞状细胞癌肿瘤干细胞细胞球EC109
- Cripto-1在食管癌细胞迁移和侵袭中作用的初步研究
- 目的:探讨Cripto-1表达对食管癌迁移、侵袭能力的影响.方法:应用Cripto-1基因特异shRNA慢病毒载体转染食管癌细胞株TE-1和EC109,以实时荧光定量RT-PCR和western blot方法从mRNA和...
- 刘强卞修武崔翔任勇杨浪郭政军崔巍于茜姬成东崔有宏
- 关键词：食管癌细胞迁移
- 文献传递
- 食管癌干细胞的分离与鉴定
- 目的肿瘤干细胞是目前肿瘤研究的前沿,现已从多种肿瘤中分离得到肿瘤干细胞,然而对食管癌干细胞的研究尚处于起步阶段。本研究以成球培养法分离食管癌干细胞,并鉴定其"干性"特性。方法将食管鳞癌细胞系EC109接种入无血清条件培养...
- 杨浪于茜王清良章容崔有宏卞修武
- 文献传递
- 内皮细胞通过Hedgehog通路促进胶质瘤干细胞自我更新被引量：3
- 2013年
- 目的探讨Hedgehog通路在内皮细胞促进胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)自我更新中的可能作用。方法实验以GL261细胞系中分离的GSC和内皮细胞系b.END3为研究材料,采用Transwell双室细胞培养、极限稀释法成球实验、实时定量PCR、Western blot、体内移植瘤实验以及慢病毒载体基因干扰等方法,检测内皮细胞对GSC成球、成瘤能力、干性基因表达以及Hedgehog信号通路相关的部分基因表达的影响。结果与对照组相比:①GSC与内皮细胞共培养后其体外成球能力明显增强,表现为形成干细胞球数目明显增多,体积明显增大,尤其在每孔5个(24.3%vs 11.3%)和每孔10个细胞(39.4%vs 25.8%)的极低浓度下更加明显(P<0.05)。②共培养体系中,GSC的干性相关基因Oligo2、Bmi1与Hedgehog信号通路相关基因Gli1的mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。③体内移植瘤实验发现,与内皮细胞共同注射的GSC成瘤能力明显增强,所形成的移植瘤体积显著大于对照组(P<0.05),而且出现了部分瘤体破溃、小鼠死亡。④通过慢病毒载体基因干扰Smo基因表达抑制Hedgehog信号通路后,内皮细胞促进GSC自我更新的上述现象消失。结论内皮细胞可能通过激活Hedgehog信号通路促进GSC自我更新。
- 闫广宁杨浪崔有宏郭德玉
- 关键词：胶质瘤干细胞内皮细胞信号转导HEDGEHOG通路
- 内皮细胞对胶质瘤干细胞增殖的影响及可能机制
- 背景近来越来越多的实验证据支持肿瘤干细胞起源学说,认为肿瘤干细胞是肿瘤发生、演进、治疗抵抗和复发的主要根源,其所处的微环境对肿瘤干细胞具有重要的调节作用。肿瘤干细胞与其微环境的相互作用的关系,是目前肿瘤研究的重要前沿领域...
- 郭德玉杨浪崔有宏蒋雪峰卞修武
- 文献传递
- TLR2在胶质瘤细胞GL261的高表达及其激活后增强迁移的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨小鼠胶质瘤细胞系GL261主要高表达的Toll样受体(TLRs)家族成员及其在GL261细胞迁移中的作用。方法运用实时荧光定量PCR检测TLRs在GL261细胞的表达情况;GL261细胞经TLR2配体Pam3CSK4刺激后,应用Transwell迁移实验检测其对迁移能力的影响;慢病毒稳定干扰TLR2表达后,观察Pam3CSK4刺激对GL261细胞迁移能力的改变。结果GL261细胞主要高表达TLRs家族中的TLR2;Pam3CSK4激活TLR2后显著增强GL261细胞迁移能力;沉默TLR2基因表达后,Pam3CSK4促进GL261细胞迁移能力的作用消失。结论小鼠GL261胶质瘤细胞TLRs家族中主要高表达TLR2,其激活具有促进GL261细胞迁移的作用,下调TLR2可抑制该细胞的迁移。
- 王凡叶显宗杨浪崔有宏卞修武
- 关键词：胶质瘤细胞
- Bmil基因在内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨B细胞特异的莫洛尼病毒插入位点1（Bmil）基因在内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型中的可能作用。方法以小鼠胶质瘤细胞系GL261和小鼠脑内皮细胞系b．END3为材料，采用Transwell双室细胞共培养、极限稀释法成球实验、实时定量PCR、Western印迹、流式细胞术、体内移植瘤实验以及siRNA基因干扰等方法，检测内皮细胞对胶质瘤细胞体外成球能力和体内成瘤能力、CD133阳性细胞比例、Bmil基因表达的影响以及抑制Bmil基因表达对上述现象的影响。结果与胶质瘤细胞单独培养的对照组相比：（1）胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后其体外成球能力明显增强，形成干细胞球数目明显增多（40个细胞／孔的浓度时为62．5％±1．5％比25．0％±4．6％，P=0．000），体积明显增大；内皮细胞与胶质瘤细胞共同移植后所形成的移植瘤出现早、体积更大[（0．798±0．297）比（0．362±0．123）cm2，P=0．000]。（2）胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后其CDl33阳性细胞群比例增大（8．48％±0．78％比4．81％±0．37％，P=0．000）。（3）胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后Broil基因的mRNA（2．72±0．18比1．00±0．15，P=0．000）和蛋白表达明显增加。（4）利用siRNA干扰胶质瘤细胞Bmil基因表达后，内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型的上述作用明显减弱，敲低Bmil基因的GL261细胞共培养的CDl33阳性比例显著低于共培养的普通GL261细胞（0．34％±0．21％比1．70％±0．69％，P=0．025）。结论内皮细胞可能通过上调胶质瘤细胞Bmil基因表达促进胶质瘤细胞的干性表型。
- 闫广宁杨浪崔有宏蒋雪峰王清良郭德玉
- 关键词：神经胶质瘤内皮细胞
- 人RUNX2基因的shRNA及其重组干扰载体和应用
- 本发明公开了人RUNX2基因的shRNA及其重组干扰载体和应用，shRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2第5位至第52位所示，该序列能够干扰RUNX2基因表达，降低细胞成球能力、降低细胞克隆形成能力和降低细胞侵袭能...
- 郭政军卞修武杨浪任勇刘强姬成东崔巍王强崔有宏
- 文献传递
- 免疫印迹法抗体表面静置孵育实验装置
- 本实用新型公开了一种免疫印迹法抗体表面静置孵育实验装置，包括设有顶盖的外盒，所述外盒内设有漂浮于水面上的载体，所述载体顶部外表面为一个疏水平面且顶部外表面与底部表面平行，载体顶部外表面上设有薄膜。通过在外盒里设置一个漂浮...
- 刘强卞修武杨浪郭政军刘庆崔有宏
- 文献传递
