杨月莲
- 作品数：5 被引量：29H指数：3
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广西科技厅自然科学基金国家自然科学基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高浓度葡萄糖对胰岛细胞的IRS2表达及细胞凋亡的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨高浓度葡萄糖条件下胰岛细胞胰岛素受体底物2(IRS2)和Bax基因表达和激活情况以及对诱导胰岛细胞凋亡的影响。方法将小鼠胰腺进行分离纯化所得的胰岛细胞进行体外培养,按培养液里葡萄糖浓度不同分为G1组(5.6mmol/L)、G2组(7.8mmol/L)、G3组(11.1mmol/L)、G4组(16.7mmol/L)、G5组(22.2mmol/L)及G6组(27.6mmol/L)。细胞培养至72h后,采用放射免疫法检测各组胰岛细胞胰岛素分泌水平、免疫细胞组织化学法检测IRS2表达、免疫荧光法检测细胞Bax激活和细胞核Hoechst33342染色检测细胞凋亡情况。结果当葡萄糖浓度在5.6～11.1mmol/L时,胰岛素分泌水平升高,IRS2表达和Bax激活分别呈进行性增加,但此时细胞凋亡率无明显改变。随着葡萄糖浓度升高至超过16.7mmol/L时,IRS2表达逐渐减少,胰岛素分泌量明显降低,而Bax激活则逐渐增强,胰岛细胞凋亡率呈明显增加趋势。结论高浓度葡萄糖可以导致胰岛细胞IRS2表达下降,胰岛素分泌量下降;同时Bax激活增强,胰岛细胞凋亡率也明显增加。说明IRS2表达下降与凋亡相关蛋白Bax激活及其胰岛细胞凋亡可能存在必然的联系,而且IRS2表达下降可能是胰岛素分泌减少的原因之一。增强胰岛素信号传导通路中IRS2蛋白的表达可能对于保护胰岛细胞有重要作用。
- 梁瑜祯冯乐平夏宁杨月莲张木勋
- 关键词：胰岛细胞凋亡高浓度葡萄糖BAX
- 高浓度葡萄糖对体外培养小鼠胰岛细胞NF-κB的表达及细胞凋亡的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨核因子κB(NF-κB)在高浓度葡萄糖诱导胰岛细胞凋亡中的作用。方法:对分离纯化的小鼠胰腺胰岛细胞进行体外培养,按DMEM培养液里葡萄糖浓度不同,分为6组:G1组(5.6mmol·L-1葡萄糖)、G2组(7.8mmol·L-1)、G3组(11.1mmol·L-1)、G4组(16.7mmol·L-1)、G5组(22.2mmol·L-1)及G6组(27.6mmol·L-1)。采用放射免疫法检测各组胰岛细胞胰岛素分泌水平;免疫组织化学染色法检测NF-κB活性;免疫荧光法检测细胞色素C释放和细胞核染色检测细胞凋亡。结果:当葡萄糖浓度5.6～11.1mmol·L-1时,随着葡萄糖浓度升高,胰岛细胞胰岛素分泌逐渐增加(P<0.05),NF-κB的活性逐渐增加(P<0.05),但此时细胞凋亡未见显著的变化(P>0.05),细胞色素C释放的组间比较差异无显著性(P>0.05)。当葡萄糖浓度≥16.7mmol·L-1时,与葡萄糖浓度≤11.1mmol·L-1各组比较,NF-κB表达明显增加,细胞色素C的释放也逐渐增强(P<0.05),胰岛细胞凋亡百分率同时也呈明显增加趋势(P<0.05)。结论:高浓度葡萄糖可以诱导胰岛细胞NF-κB表达增加,细胞色素C释放增强,同时诱导胰岛细胞凋亡,提示NF-κB的激活与胰岛细胞凋亡可能存在必然的联系,抑制NF-κB活性可能对于保护胰岛细胞有重要作用。
- 梁瑜祯张木勋夏宁杨月莲冯乐平
- 关键词：细胞凋亡高浓度葡萄糖NF-ΚB细胞色素C类
- 一种高效经济的小鼠胰岛细胞分离纯化新技术被引量：1
- 2009年
- 目的:建立一种经济高效的小鼠胰岛细胞分离纯化方法,为进行NOD小鼠的胰岛移植提供实验条件。方法:将5-7周龄、体重20～25g的雄性昆明小鼠的胆总管结扎,并逆行Hank's液和胶原酶P灌注和分离消化,依次加入84%、67%、50%浓度的Histopaque介质后进行不连续密度梯度离心纯化胰岛细胞。双硫腙(dithizon,DTZ)和台盼兰染色分别鉴定胰岛细胞。用含5.6mmol/L葡萄糖DMEM培养液体外培养胰岛细胞,培养后的第3、5、7、9、11天取细胞上清检测胰岛素水平,并用16.7mmol/L的高浓度葡萄糖进行刺激,检测胰岛素水平确定胰岛细胞功能。结果:每个胰腺的胰岛细胞收获量在1200±124个,且纯度和活性均大于90%;体外培养9天内胰岛细胞基础胰岛素分泌水平无显著差异,至第11天时则明显减少(P<0.05);应用16.7mmol/L葡萄糖刺激后,第5、7、9、11天的胰岛素分泌水平较第3天的明显减少(P<0.05),然而在第7天、9天、11天时的胰岛素水平较第5天时显著降低。结论:胆总管逆行注射Hank's液和胶原酶P消化消化和不连续密度梯度Histopaque纯化的方法可以获得大量状态良好的胰岛,且胰岛细胞数量多,分泌状态良好。本分离方法是一种经济高效的胰岛细胞分离方法,同时离体后于5.6mmol/L葡萄糖DMEM培养第3天胰岛细胞胰岛素储备功能最佳,为移植研究的最佳状态。
- 梁瑜祯杨月莲罗静思刘丹冯乐平
- 关键词：胰岛素细胞培养
- 不同浓度葡萄糖对体外培养小鼠胰岛细胞IRS-2表达的影响
- 目的:探讨不同浓度葡萄糖对体外培养小鼠胰岛细胞IRS-2表达的影响。
方法:将小鼠胰腺进行分离纯化所得的胰岛细胞进行体外培养,按培养液里葡萄糖浓度不同,分为六组:1组/(含5.6mmol//L葡萄糖,G1/)、...
- 杨月莲
- 关键词：胰岛细胞信号转导胰岛素抵抗
- 文献传递
- 氧化应激与2型糖尿病被引量：22
- 2008年
- 氧化应激是体内活性氧化物产生多于清除的氧化还原反应失衡的病理状态。氧化应激可能对2型糖尿病的起病及发展起着关键性作用。机体活性氧簇产生过多,使β细胞成熟障碍和凋亡增加,胰岛素合成和分泌减少,并致胰岛素抵抗;糖尿病的高糖、高脂状态可使活性氧化物产生增多,造成氧化应激,氧化应激和糖尿病二者相互促进,形成恶性循环。
- 杨月莲梁瑜祯
- 关键词：活性氧簇氧化应激Β细胞胰岛素抵抗糖尿病
