杨敬
- 作品数：29 被引量：39H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外制备同种抗原特异性的Tscm细胞
- 研究背景：抗原刺激使T细胞经过以下阶段分化：Tn,Tscm,Tcm,Tem,Tscm是一种具有干细胞特性的记忆性T细胞.研究表明,与其他分化阶段的T细胞相比较,过继输注Tscm细胞的抗肿瘤效应最持久.但是Tscm细胞在外...
- 官立萍翁秀芳梁智辉杨敬吴雄文
- 关键词：CO-CULTURE
- CD8~(low)CD28~-T细胞—抗原特异性的抑制性T细胞亚群
- 研究背景:上世纪70年代,人们认识到可溶性HLA分子具有一定的免疫调节作用;同时也发现了表达CD8的抑制性T细胞亚群(Ts),但是对于他们的关系尚未阐明。目的:探讨可溶性HLAI类分子和Ts细胞之间关系方法:用仅表达HL...
- 吴雄文翁秀芳梁智辉杨敬
- 文献传递
- K^+通道阻断剂四乙铵对胰岛β-细胞凋亡的作用机制研究
- 2006年
- 目的研究K+通道阻断剂四乙铵(TEA)对诱导胰岛β细胞凋亡的作用及机制。方法以IFNγ+IL1β诱导NIT细胞凋亡,同时加入TEA,通过AnnexinV检测、PI染色,利用四唑蓝比色实验(MTT法)检测不同浓度TEA对链脲佐菌素(STZ)处理细胞活性的影响;使用流式细胞术检测TEA对诱导NIT细胞凋亡的影响;通过硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸TBA法、化学比色法、黄嘌呤氧化酶法、分别测定培养上清液中NO和氧自由基含量以及细胞裂解物中NO合成酶(NOS)及超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性。结果1mmolLTEA能显著抑制IFNγ+IL1β诱导的NIT细胞凋亡。IFNγ+IL1β可显著增加NOS活性,降低SOD的活性,从而导致培养上清液中NO及氧自由基的含量显著增加;TEA可显著抑制STZ的作用。结论K+通道在胰岛β细胞的凋亡中可能起着重要作用;K+通道阻断剂TEA可显著抑制IFNγ+IL1β诱导的胰岛β细胞凋亡,其机制可能与下调NIT细胞诱导性NO合成酶(iNOS)活性,上调SOD活性,减少NO的产生以及增强其清除氧自由基的能力有关。
- 虞涛雷萍朱慧芬邵静芳杨敬张悦沈关心
- 关键词：K^+通道胰岛Β细胞
- 抗CD4人-鼠嵌合抗体的表达和抗增殖效应被引量：2
- 2002年
- 目的 制备抗CD4人 鼠嵌合抗体。方法 从分泌抗CD4单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA ,通过RT PCR扩增出VH 和VL 的DNA片段 ,对VH 和VL 进行DNA序列测定和分析 ,证实VH 和VL 具有小鼠Ig可变区完整的结构功能后 ,将VH 亚克隆至重链表达载体pγ1 Expr,VL 亚克隆至轻链表达载体pκ Expr,转化XL2 Blue细菌 ,通过菌落或质粒PCR筛选阳性克隆。通过电转染将VH pγ1、VL pκ共转染至小鼠骨髓瘤细胞X6 3Ag8.6 5 3,通过G418筛选、ELISA和免疫荧光鉴定。结果 得到分泌抗CD4人 鼠嵌合抗体的阳性转染瘤细胞克隆。所得到的嵌合抗体在体外对PHA和IL 2诱导的PBMC增殖具有抑制作用。结论 人 鼠嵌合抗体得到成功表达 。
- 朱志刚沈关心朱慧芬张悦邵静芳杨敬
- 关键词：嵌合抗体增殖抑制
- 钾通道阻断剂四乙胺对胰岛β细胞凋亡的作用机制研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究钾通道阻断剂四乙铵(TEA)对诱导胰岛β细胞凋亡的作用及机制。方法以STZ诱导小鼠胰岛细胞株(NIT)细胞凋亡,同时加入TEA,通过AnnexinV检测、PI染色、Rho-damine123染色,使用流式细胞术检测TEA对NIT细胞凋亡的影响;测定培养上清中NO和氧自由基含量,以及细胞裂解物中过氧化物歧化酶(SOD)活性。结果STZ可显著诱导NIT细胞凋亡,并可降低SOD的活性,显著增加培养上清中氧自由基及NO的含量;1mmol/LTEA能显著抑制STZ的作用。结论钾通道在胰岛β细胞的凋亡中可能起重要作用;TEA可显著抑制STZ诱导的胰岛β细胞凋亡,其机制可能与上调NIT细胞SOD活性,增强其清除氧自由基的能力及减少NO的产生有关。
- 虞涛陈群力胡萍邵静芳杨敬沈关心
- 关键词：胰岛Β细胞钾通道阻滞剂细胞凋亡
- 绿舒筋总生物碱对人肝癌细胞抑制作用
- 2004年
- 目的 :研究绿舒筋对体外培养肝癌细胞株的抑制效应。方法 :采用乳酸脱氢酶释放法测定绿舒筋、5 Fu、环磷酰胺对体外培养肝癌细胞株的毒性作用。结果 :绿舒筋具有抑制肿瘤生长作用 ,并随药物浓度增加其效应增强 ,其效应类似于 5 Fu和环磷酰胺。结论 :绿舒筋具有较好的抗肿瘤细胞生长作用 。
- 吴建国沈关心杨敬
- 关键词：绿舒筋肝癌细胞株细胞毒效应
- FADDdel的构建、表达及其保护靶细胞的体外实验研究
- 本研究通过体外实验研究证实细胞因子如IFN-γ和TNF-α诱导B胰岛细胞表面Fas的表达可能在Ⅰ型糖尿病(IDDM)的病理损伤中起重要作用,为进一步研究移植免疫和自身免疫性疾病的发生机理打下了良好的基础,从而为通过细胞因...
- 周华荣胡萍雷萍邵静芳朱慧芬张悦杨敬沈关心
- 文献传递
- 可溶性mPDL1-hIgGFc表达载体构建、表达及对诱导细胞增殖与凋亡的影响
- 研究背景:PD-1(Programmed death 1)是B7家族的一个新成员,分子量为55 KD,属免疫球蛋白超家族成员。PDL1(B7-H1)和PDL2(B7-DC)是PD-1的两个配体,均定位于人染色体9p24....
- 杨敬廖雯君王国华何峰蓉朱惠芬戴红周玮吴雄文张金元沈关心
- 文献传递
- 双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究被引量：1
- 2002年
- 目的:构建高靶向性基因转移及表达系统,并研究其介导HSV-tK/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法:通过重组技术分别构建anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白表达载体ScFv-GAL4-pET28a及合AFP启动子、GAL4特异性识别序列(GAL4rec)的HSV-tk真核表达载体pEBAF/tk-GAL4rec。IPTC诱导后,利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tk-CAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2,SMMC7721及A549。潮霉素筛选后,MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。结果:双酶切鉴定、SDS-PAGE电泳及测序分别证明anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白及重组pEBAF/tk-CAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中,高分泌AFP(845ng/ml)的HepG2/tk细胞对GCV很敏感,且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关;而低分泌AFP(2ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感;不分泌AFP的A549/tk细胞则不敏感。结论:双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建成功,并显示出很好的靶向性。
- 王骞曹利民周华荣朱慧芬张悦邵静芳杨敬沈关心
- 关键词：HSV-TK基因转铁蛋白受体肝癌
- Wee1基因修饰细胞抗CTL诱导的凋亡效应被引量：2
- 2004年
- 目的 研究Wee1转基因细胞抗CTL介导的凋亡效应及抗穿孔素抗体的对此抗凋亡效应的影响。方法 采用DNA转染技术将重组体Wee1Hu GFP导入哺乳动物细胞NIT(鼠胰岛细胞瘤细胞 ) ;以转染重组体前、后的NIT为靶细胞 ,采用ELISA凋亡试剂盒检测CTL介导的凋亡效应。结果 转染Wee1及加入抗穿孔素抗体的NIT组发生凋亡的细胞数最少。结论 Wee1基因转染靶细胞在一定程度上可抵抗CTL介导的细胞凋亡 ,而穿孔素抗体可协同增强此抗凋亡效应。
- 胡萍王峰姚飞王国华朱丽娟朱慧芬杨敬沈关心
- 关键词：凋亡
