杨婷
- 作品数：10 被引量：15H指数：2
- 供职机构：新疆农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
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- 以GFP为报告基因优化农杆菌介导海岛棉转基因体系的研究被引量：2
- 2011年
- 为了进一步建立优化的根癌农杆菌介导海岛棉外源基因转化体系,提高海岛棉外源基因转化率。以生理状态基本一致的海岛棉新海30号的胚性愈伤组织为受体材料,以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因,将浸染时间和共培养时间作为试验要素,筛选适宜的浸染时间和共培养时间。结果表明,根癌农杆菌介导的海岛棉外源基因转化体系的最佳浸泡时间为15 min,共培养时间为24 h。
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- 关键词：海岛棉GFP基因PCR
- 农杆菌介导海岛棉胚性愈伤高效遗传转化体系的研究被引量：8
- 2011年
- 以新海30和新海16的胚性愈伤组织为转化受体,用农杆菌介导法将苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白(Bt)基因导入新海30和新海16。结果表明,在相同的转化条件下,新海30遗传转化效率大于新海16。培养基中无机盐浓度为1/2MS,凝固剂gelrite浓度为2.0 g/L时,能够提高胚状体萌发和成苗率,降低畸形苗频率。通过T1代PCR及T2代RT-PCR检测证实Bt基因已整合到了海岛棉基因组中,获得转基因植株。
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- 关键词：海岛棉农杆菌再生植株
- 海岛棉与陆地棉激素诱导胚性愈伤组织的研究被引量：2
- 2013年
- 以新疆主栽品种新海25号、新海16号、新陆早39号和新陆早42号下胚轴为外植体,通过不同浓度两种激素的4种组合进行诱导,获得了胚性愈伤组织,并进一步发育成苗,为拓宽海岛棉与陆地棉再生基因型和转基因研究奠定了基础。研究结果得出:所用的4种激素组合均能有效诱导愈伤组织;0.05 mg.L-12,4-D+0.1mg.L-1KT为陆地棉愈伤组织最佳诱导条件,0.1 mg.L-12,4-D+0.1 mg.L-1KT为海岛棉愈伤组织最佳诱导条件;诱导出的愈伤组织继代于无激素且KNO3含量加倍的培养基中可产生胚性愈伤组织,铺滤纸有利于胚状体的成熟,并产生发达根系;陆地棉的分化速度和胚胎发生的速度快于海岛棉。4个品种在10～12个月内都成功得到再生苗。
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- 关键词：海岛棉陆地棉激素组合植株再生
- 海岛棉枯萎病抗性相关基因RGBCH的克隆、原核表达及抑菌活性分析被引量：1
- 2013年
- 为明确海岛棉抗枯萎病相关基因(RGBCH)是否抑制海岛棉重要土传真菌枯萎菌的生长,克隆了海岛棉抗枯萎病基因相关基因RGBCH的全长编码序列,将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体pET-30a上,构建成pET-30a-RGBCH融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式表达的pET-30a-RGBCH重组蛋白。经过裂解、洗涤、溶解、复性等处理,获得了纯化的pET-30a-RGBCH融合蛋白。体外抑菌试验表明,RGBCH蛋白显著抑制枯萎病病原菌的生长。
- 刘艳杨婷曲延英
- 关键词：克隆抑菌活性枯萎菌
- 海岛棉遗传转化体系及转NAC6基因的研究
- 本研究通过诱导不同基因型海岛棉下胚轴的体细胞胚胎发生,以新海16号、新海24号、新海30号胚性愈伤组织为受体材料,进一步优化海岛棉遗传转化体系,通过农杆菌介导法转化NAC转录子家族,获得转基因再生植株T0代,使用PEG6...
- 杨婷
- 关键词：海岛棉胚性愈伤组织生理指标
- 文献传递
- 农杆菌介导海岛棉胚性愈伤组织遗传转化影响因素分析
- 2012年
- 以3个栽培海岛棉品种新海30、新海24、新海16诱导而来的胚性愈伤组织为受体材料,分析了3种农杆菌菌株EHA105、LBA4404、GV3101和3种已构建质粒pCAMBIA1301、pCAMBIA1304、pBI121对已建立的农杆菌介导海岛棉外源基因转化体系的影响。研究结果表明,菌种和质粒对转化率有极其显著的影响,而两者之间的互作关系也比较显著。最终得到农杆菌介导转化海岛棉胚性愈伤组织的最佳菌种和质粒是GV3101和pBI121。
- 杨婷曲延英李琼刘艳孟灵真陈全家
- 关键词：海岛棉菌种质粒胚性愈伤组织
- 农杆菌介导的bar基因和Bt基因的遗传转化研究被引量：1
- 2013年
- 【目的】探讨不同基因对不同棉花品种的遗传转化差异。【方法】以新海14号、新海16号、新海24号和新海30号四个不同基因型海岛棉胚性愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导法分别将pBI121-bar/Bt和pBI121-Bt转化至四个品种中,对遗传转化体系中的PPT浓度和Cef浓度进行筛选,观察比较不同浓度下不同基因型胚性愈伤的生长状况,并对单价表达载体和双价表达载体转化不同基因型胚性愈伤的生长状态进行比较。【结果】转化体系的筛选确定双价表达载体的PPT筛选浓度为3.0 mg/L,Cef的筛选浓度为800 mg/L;转化单价表达载体LBA4404/pBI121-Bt的Cef的筛选浓度为600 mg/L。转化单价表达载体后,新海14号的出愈率最高,新海30号的出愈率最低;转化双价表达载体后,新海14号的出愈率最高,新海24号的出愈率最低。【结论】不同基因型对PPT的敏感性有差异;转化不同基因后,胚性愈伤对抗生素的敏感度有所不同;转化相同基因后,不同品种的胚性愈伤生长存在差异。
- 孟灵真陈全家杨婷阿依夏木.古丽王希东曲延英
- 关键词：PPT胚性愈伤组织
- 抗除草剂bar基因植物表达载体的构建与抗性功能的检测被引量：2
- 2013年
- 根据GenBank上发表的抗除草剂bar基因序列设计引物,通过高保真DNA聚合酶进行PCR扩增,获得bar基因片段,连接在pMD18-T中间克隆载体上,用限制性内切酶XbaⅠ和BamHⅠ酶切后连接到pBI121上获得pBI121-bar。用HindⅢ内切酶切含Bt-4AB基因的质粒并与pBI121-bar重组,重组质粒命名为pBI121-bar/Bt。重组质粒导入农杆菌LBA4404工程菌中,转化新海24号棉花胚性愈伤组织。PPT抗性实验证明,构建的pBI121-bar/Bt载体获得抗除草剂抗性,并筛选出PPT临界筛选浓度为3.0mg/L。
- 孟灵真陈全家杨婷阿依夏木.古丽王希东曲延英
- 关键词：抗除草剂抗虫
- 海岛棉两种转Bt基因方法的研究被引量：2
- 2012年
- 以新疆海岛棉军海1号为受体,利用农杆菌菌液喷雾法(Floral spray)和质粒注射法(Plasmid injection)导入外源Bt基因。经过对转化植株T1和T2代大田筛选和PCR、Southern检测,并经孟德尔遗传规律符合度分析,结果表示:农杆菌菌液喷雾法T0代成铃率比质粒注射法高8.3百分点;两种方法均可获得转基因植株,农杆菌菌液喷雾法较质粒注射法转化率高3.4百分点;农杆菌菌液喷雾处理后代较符合孟德尔遗传规律且单拷贝插入几率高。因此,农杆菌菌液喷雾法优于质粒注射法。
- 李琼曲延英杨婷王莉萍刘正周丽容陈全家
- 关键词：海岛棉BT基因
- 一种转基因海岛棉培育方法
- 本发明涉及植物基因工程领域，提供了一种转基因海岛棉培育方法，包括以下步骤：1）制备无菌苗；2）培养初生胚性愈伤组织；3）制备农杆菌侵染液；4）初生胚性愈伤组织与带有植物表达载体的农杆菌菌液共培养；5）筛选抗性初生胚性愈伤...
- 曲延英陈全家杨婷孙国清
- 文献传递
