杜国英 作品数:27 被引量:107 H指数:5 供职机构: 中国海洋大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家908专项 国家烟草专卖局基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 天文地球 环境科学与工程 更多>>
地高辛标记的cDNA探针检测烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒及马铃薯Y病毒 <正>TMV,CMV和PVY是引起烟草病毒病的主要病毒。在烟草生产中,迫切要求对苗床烟草幼苗进行带毒鉴定,以便尽早采取防治措施。核酸杂交技术可以使用制备好的探针试剂盒进行检测,既可达到较高的灵敏度,操作也简便实用,所需仪... 杜国英 王锡锋 周广和文献传递 红藻DNA条形码分析技术研究进展 被引量:3 2014年 DNA条形码是指利用一段相对较短的标准DNA片段,对物种进行识别和鉴定。目前该技术在动物、植物物种鉴定领域已经得到了广泛的研究和应用。在藻类的研究中,尚未确定一条统一的标准条形码基因,现阶段都是使用2条或2条以上基因序列来完成物种鉴定。对于形态多样、种类繁多的海洋红藻,常用的DNA条形码基因有COI基因(Partial cytochrome c oxidase I gene)、UPA基因(Partial 23SrRNA gene,universal plastid amplicon)、LSU基因(Partial 28SrRNA gene)和rbcL基因(The large subunit of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase)等,这些基因中2个或3个基因的互补运用准确有效地提高了红藻的鉴定准确率,尤其是COI基因的种间差异大足够区分相近物种。本文在概述条形码的原理及其标准的基础上,阐述了红藻DNA条形码鉴定研究的新进展以及常用几种基因片段的优缺点,并对条形码在红藻鉴定中存在的问题进行了分析,对其应用前景进行了展望。 茅云翔 吴菲菲 杜国英关键词:DNA条形码 红藻 COI基因 藻类 激光显微切割条斑紫菜叶状体的参数优化 被引量:1 2021年 本研究以经济红藻条斑紫菜(Pyropia yezoensis)为研究对象,应用激光显微切割技术(Laser Microdissection,LMD)分离不同时期、不同部位、不同组织紫菜叶状体细胞团。统计细胞团中成活细胞比例,测定成活率,并应用叶绿素荧光成像法测定成活细胞光合活性,建立适合不同类型细胞的激光显微切割流程。结果表明:(1)整个切割流程需要在30 min内完成,不同材料成活率由高到低为:精子囊、成熟紫菜顶部、紫菜幼苗基部、成熟紫菜基部、幼苗顶基部,同株紫菜相同区域的中央与边缘细胞切割后成活率相近;(2)显微切割获得的紫菜细胞团的各项叶绿素荧光参数中,最大光量子传递效率Fv/Fm、实际光量子传递效率Y(Ⅱ)、光化学淬灭qP下降、非光化学淬灭qN上升,其中Fv/Fm、Y(Ⅱ)变动均高于其他参数,可作为指示切割细胞团光合能力的敏感指标;(3)不同时期紫菜适用的切割技术不同:成熟条斑紫菜在10、20、63倍镜下切割的直径100~300μm细胞团,幼苗在6.3、10、20倍镜下切割的直径150~300μm细胞团,成活率高且具有较高的光合活性。本研究针对条斑紫菜不同材料摸索形成适宜的切割技术参数,最少可从100μm直径细胞团(约20细胞)中获取1~6个成活细胞,为细胞的精确分离提供了新的技术手段。 曹逸飞 李小姣 曲伟华 茅云翔 杜国英关键词:条斑紫菜 激光显微切割 细胞分离 光合活性 一种基于光谱遥感影像的养殖紫菜生物量测定方法 本发明提供一种基于光谱遥感影像的养殖紫菜生物量测定方法,是基于养殖海藻的反射率光谱与其生物量相关关系,选定特征光谱波段及特征参数,构建了养殖紫菜的多光谱遥感监测模型。根据模型,通过对多光谱遥感图像的反演,获得大面积紫菜生... 杜国英 茅云翔 车帅 王宁 何堃文献传递 低温胁迫下条斑紫菜的生长和光合生理生化响应 2024年 为探讨在低温胁迫下条斑紫菜(Neopyropia yezoensis)的生长及光合生理生化响应,本实验以条斑紫菜叶状体为研究对象,测定2℃低温处理条件下条斑紫菜的相关光合生理指标、光合色素含量以及日生长率。研究表明,条斑紫菜叶状体在低温胁迫下生长变缓,野生样品在短期(4 d)胁迫下日生长率(DGR)为1.59%·d^(-1)~3.77%·d^(-1),长期(20 d)胁迫后DGR为2.19%·d^(-1)~4.12%·d^(-1);苗期条斑紫菜在低温胁迫(2℃)前2 d时DGR为3.75%·d^(-1),处理4 d时DGR为8.79%·d^(-1),经过6 d胁迫后DGR为7.19%·d^(-1)。此外在低温胁迫下条斑紫菜的光合能力也减弱,野生样品在短期(4 d)低温胁迫下,F v/F m(PSⅡ最大光化学量子产量)、ΦPSⅡ(PSⅡ实际光化学量子产量)和qP(光化学淬灭系数)均降低,NPQ(非光化学淬灭系数)则升高;经过长期(20 d)胁迫后,F v/F m仍显著降低,ΦPSⅡ和qP上升,NPQ降至最低。苗期条斑紫菜在低温胁迫下前2 d F v/F m、ΦPSⅡ、NPQ和qP均降低,胁迫4 d时F v/F m、ΦPSⅡ、NPQ和qP上升,胁迫6 d时各荧光参数与4 d时相比无显著变化。苗期条斑紫菜低温胁迫6 d后,叶绿素a、藻蓝蛋白含量显著下降(P<0.05),藻红蛋白含量极显著下降(P<0.01),别藻蓝蛋白含量极显著上升(P<0.01)。研究结果表明,条斑紫菜在光合生理及生化上响应低温胁迫并最终影响其生长速率,且随着低温胁迫时间的延长表现出一定的适应性。本研究为探讨条斑紫菜对低温胁迫的适应机制和筛选耐低温良种提供数据参考。 谢聪颖 钟雪峰 乌兰 张馨予 田霖 杜国英关键词:条斑紫菜 低温胁迫 光合生理 地高辛标记的cDNA探针检测烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒及马铃薯Y病毒 被引量:19 2004年 根据已发表的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计特异引物,分别以提取的TMV、CMV和PVY侵染的病叶总RNA为模板,反转录PCR进行体外扩增,分别得到长度为0.44、0.77、0.80 kb的目的片段,并克隆到pGEM-T easy质粒载体上,以构建的重组质粒为模板,用PCR方法合成了相应的地高辛标记的双链DNA探针。以合成的探针通过斑点杂交技术检测烟草病叶总RNA和烟草病叶汁液。TMV、CMV和PVY的3种地高辛探针检测各自感染的烟草病叶总RNA的稀释低限分别为1:1 000、1:10 000、1:320,检测各自侵染烟草病汁液的最大稀释倍数分别为1:100、1:100、1:10,而每种探针与健康烟草和其它2种病毒的反应均为阴性。 杜国英 王锡锋 周广和关键词:地高辛标记 CDNA探针 花叶病毒 黄瓜 马铃薯 Y病毒 一种紫菜壳孢子采苗组合装置及采苗方法 本发明公开了一种紫菜壳孢子采苗组合装置及采苗方法,属于海藻养殖领域。为了克服现有技术中紫菜贝壳丝状体放散不均、采苗池管理不便、采苗机械应用困难的技术不足,本发明提供一种紫菜壳孢子采苗组合装置及其采苗方法,紫菜壳孢子采苗组... 茅云翔 唐祥海 刘玮 曹敏 孔凡娜 杜国英文献传递 烟草主要病毒的分子鉴定与检测技术 依据烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)外壳蛋白(CP)基因序列(480nt)片段设计合成了一对引物,以病毒粗提RNA为模板,通过反转录一聚合链式反应(reverse transcriptio... 杜国英关键词:检测试剂盒 烟草花叶病毒 基因序列 病毒检测 文献传递 河口潮间带底栖微藻群落结构的时空间变动 本研究于2006年8月至2008年9月期间调查韩国洛东江河口潮间带底栖微藻生物量及群落结构的时空间变动。该河口底栖微藻群落以羽纹硅藻为主,优势种为Amphora coffeaeformis and Navicula sp... 杜国英 郑异教文献传递 一种大型海藻群落固碳效率的测定方法 本发明的目的是提供一种大型海藻群落固碳效率的测定方法,是将在野外采集的大型海藻按照物种分类,测算各种海藻占整个群落的比例;然后按其群落结构比例,将清洗干净的大型海藻样本集合分成均等份组成模拟群落体系,再进行固碳效率的测定... 茅云翔 杜国英 赵婀姿 刘春蓉文献传递