李运雄
- 作品数：33 被引量：95H指数：5
- 供职机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 子痫前期胎盘组织中Apelin/APJ的表达及其临床意义
- 目的：检测Apelin/APJ在子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织中的表达差异。方法：选取轻度子痫前期患者10例(mPE组)，重发子痫前期患者20例(sPE组).正常妊娠妇女20例(对照组)，收集其胎盘组织.通过免疫细化方法...
- 江燕萍孟锦绣陈观娣游可理李运雄马颖文韩凤珍
- 关键词：病理妊娠子痫前期发病机制胎盘组织
- 文献传递
- 探讨脑梗死患者凝血象和血小板变化被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨脑梗死患者凝血象和血小板变化情况。方法:选取2008年3月～2013年3月我院收治的100例脑梗死患者(观察组)以及健康体检者100例(对照组),均检测凝血象与血小板,并对检测结果进行比较分析。结果:APTT、PT及TT几项凝血象指标方面,观察组检测水平均相对较低,FIB水平则相对较高;PLT血小板参数检测水平,观察组明显低于对照组,PDW与MPV则明显高于对照组;以上相关比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:检测凝血象以及血小板相关指标,对诊断脑梗死有重要的临床参照价值,值得临床推广应用。
- 李运雄李广华黄革郑有为钱靖琳
- 关键词：脑梗死凝血象血小板
- 3T3-L1脂肪细胞诱导分化与肿瘤抑制因子PTEN的表达研究被引量：5
- 2007年
- 目的优化3T3-L1脂肪细胞分化条件,研究信号因子PTEN在分化过程中的表达,以了解PTEN是否通过表达量来调节正常脂肪细胞形成,为探索PTEN的药物靶标作用奠定基础。方法DMEM高糖培养基培养3T3-L1脂肪前体细胞,地塞米松、3-异丁基1-甲基黄磦呤(IBMX)和胰岛素按2种组合方案分别诱导3T3-L1细胞分化,油红O染色鉴定脂肪细胞,蛋白裂解液提取细胞总蛋白,SDS-PAGE和Western blotting鉴定分化过程中PTEN的表达量,用生物信息学进行小鼠和人类PTEN的同源性分析。结果1μmol/L地塞米松、0.5μmol/LIBMX和5μg/ml胰岛素诱导48h后,再用含5μg/ml胰岛素的DMEM高糖营养液培养48h的方案对3T3-L1细胞诱导分化效果较好,脂肪细胞分化率高且均一,在分化第10天可见90%以上细胞分化为脂肪细胞。PTEN在脂肪细胞分化过程中表达量在第0、4th、6th、9th和第12天时不一致,在12天时明显下降,显著低于诱导前。同源性比对分析表明,小鼠和人类的PTEN mRNA编码序列匹配率为96%,而氨基酸序列匹配率为100%。结论内源性PTEN在小鼠3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化为脂肪细胞的时相过程中表达量有所变化,提示PTEN可能在生理条件下即可发挥提高胰岛素敏感性和促进脂肪细胞形成的作用。
- 李运雄孟锦绣蔡雪珍李东风荣卡彬蒋文玲张仁礼余细勇
- 关键词：PTEN脂肪细胞IBMX
- 多重PCR快速检测金黄色葡萄球菌中氨基糖苷类抗生素耐药基因及其临床应用被引量：4
- 2009年
- 目的建立金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因的多重PCR快速检测体系,了解耐药基因acc(6′)-Ie+aph(2″)、aph(3′)-Ⅲat ant(4′)-Ia在广州地区的流行分布。方法采用VITEK-60或PHOENIX-100微生物自动鉴定系统鉴定菌株及药敏试验,利用琼脂扩散法检测4种氨基糖苷类抗生素的耐药表型。通过优化PCR体系建立多重PCR并应用于检测金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因。结果构建了四重PCR快速检测体系,124株金葡菌临床分离株中,acc(6′)-Ie+aph(2″)、aph(3′)-Ⅲa和ant(4′)-Ia的检出率分别为62.1%、32.3%和1.6%;所有庆大霉素、奈替米星以及阿米卡星耐药的金葡菌菌株均检测到上述3个耐药基因中的1个或1个以上基因;74株mecA阳性菌株中72株(97.3%)检测到acc(6′)-Ie+aph(2″)基因。结论所构建的多重PCR检测体系为临床实验室提供快速而有效的菌株耐药基因检测手段。编码AAC(6′)-APH(2″)双功能酶的acc(6′)-Ie+aph(2″)基因是金葡菌最重要的氨基糖苷类抗生素耐药基因,其次为aph(3′)-Ⅲa,ant(4′)-Ia则少见。
- 黄革周晓红蒋文玲李运雄荣卡彬罗宪玲赵莹
- 关键词：金葡菌多重聚合酶链反应
- 广州管圆线虫抗原IF的中间纤维蛋白组织来源分析和定位被引量：1
- 2007年
- 目的对广州管圆线虫抗原IF进行中间纤维蛋白家族分类和细胞组织定位。方法IPTG诱导重组基因pET-IF在大肠杆菌中表达广州管圆线虫抗原IF,用组氨酸亲和层析纯化表达产物,用Western blot方法鉴定抗原IF的中间纤维蛋白类型;小鼠皮下多点注射法制备抗IF抗体血清,用免疫组织化学方法检测抗原IF在虫体组织和细胞上的定位。结果广州管圆线虫抗原IF在体外成功表达并纯化,其属于中间纤维蛋白家族的角蛋白,定位于广州管圆线虫成虫肠管壁,存在于细胞质中。结论广州管圆线虫抗原IF分布于虫体肠管壁,同时从组织学角度证明广州管圆线虫存在中间纤维结构。
- 孟锦绣何蔼程梅徐贵峰李卓雅余细勇蒋文玲李运雄詹希美
- 关键词：广州管圆线虫抗原中间纤维抗原定位
- 风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库的构建和分析被引量：1
- 2012年
- 目的:构建风湿性心脏病患者心脏组织噬菌体表达文库。方法:外科手术治疗中取风湿性心脏病患者新鲜心耳组织,用QIAGEN试剂盒提取RNA,用逆转录酶合成cDNA第一链,用长距离PCR合成双链cDNA,SfiⅠ酶切cDNA后过柱分级收集,用T4 DNA连接酶重组连接入λTripl Ex2载体,最后用λ噬菌体包装后构建成原始文库,用PCR、X-gal等方法进行文库质量鉴定。结果:构建了风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库,原始文库滴度为3.3×106pfu/mL,重组率为99%,81.25%外源重组片段大于1kb。结论:成功构建了高质量的风湿性心脏病患者心肌组织噬菌体表达文库,为风湿性心脏病的分子机制寻找新的研究策略奠定了实验基础。
- 李运雄孟锦绣朱平卢聪郑少忆余细勇
- 关键词：风湿性心脏病
- 免疫筛选获得风湿性瓣膜性心脏病的自身抗原THYN1
- 目的风湿性瓣膜性心脏病是风湿热继发心脏损害导致死亡的重要原因,A组乙型溶血性链球菌模拟心脏瓣膜组织蛋白分子达到免疫逃避的同时,也导致人类产生自身抗体造成心脏组织的免疫性损伤,这种被链球菌模拟了的自身抗原与自身抗体的长期作...
- 孟锦绣李运雄朱平林秋雄卢聪郑少忆余细勇
- 文献传递
- 5个中间型β-地中海贫血家系临床结果分析
- 2011年
- 目的了解现行PCR-RDB法对中间型β-地贫基因诊断的准确性。方法对5个中间型β-地贫家系进行血常规、血红蛋白电泳和β-地贫基因的PCR-RDB法检测,并用长链PCR法检测家系1和家系2中的先证者及母亲的β-地贫基因的缺失突变。结果 5例先证者HbF含量均增高,其中2例为轻度贫血,3例为中度贫血;4例先证者PCR-RDB法结果为杂合子与其表现的临床症状不符,1例先证者PCR-RDB结果为纯合子与父母基因检测结果不符;先证者1及其母亲长链PCR法显示阴性,先证者2及其母亲长链PCR法均为东南亚(SEA)缺失型HPFH。结论若在产前诊断时仅用PCR-RDB法检测β-地贫基因,会造成缺失型β-地贫基因漏诊,引起一系列严重的社会问题。
- 陈冬郑有为梁敏文林婷钱靖琳李运雄
- 关键词：Β-地中海贫血基因分析
- 中间型β地中海贫血家系基因分子生物学特征分析被引量：15
- 2009年
- 目的分析在中国人群中发现的中间型β地中海贫血家系的分子生物学特征。方法表型检测采用标准的血液学分析技术测量RBC参数，采用高效液相色谱方法检测Hb组分。采用反向斑点杂交技术诊断β地中海贫血基因突变，利用跨越断裂点PCR技术（gap—PCR）扩增断裂点基因序列并进行测序分析。结果先证者Hb浓度为86g/L，属中间型地中海贫血表型。先证者父亲呈典型的小细胞低色素改变，平均红细胞容积（MCV）为63．7n，平均红细胞血红蛋白量（MCH）为20．4pg，均降低；血红蛋白A2（HbA2）增加，属地中海贫血杂合子表型。而先证者母亲、外祖母和妹妹的MCV及MCH均正常，但胎儿血红蛋白（HbF）较高，HbF分别为28．3％、21．1％及33．7％，属于胎儿血红蛋白持存综合征（HPFH）杂合子表型。进一步的基因分析表明，先证者为β^41-42／HPFH-6基因型的中间型地中海贫血患儿，其父母基因型分别为β^41-42／β^N和HPFH-6杂合子。其外祖母和妹妹均为HPFH-6杂合子。结论发现1例β^41-42／HPFH-6中间型地中海贫血病例，可为产前诊断提供可借鉴的临床经验。
- 荣卡彬黄革蒋文玲李运雄罗宪玲孟锦绣余细勇
- 关键词：Β地中海贫血胎儿血红蛋白系谱聚合酶链反应
- 广州管圆线虫中间纤维蛋白的体外表达和初步免疫学鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的对广州管圆线虫中间纤维蛋白(intermediate filament,IF)基因进行体外表达、纯化、鉴定和抗原性质分析。方法将IF基因的重组表达载体pET-IF在大肠杆菌中表达,表达产物经组氨酸亲和层析纯化,SDS-PAGE鉴定蛋白质分子量,质谱分析氨基酸序列,生物信息学分析蛋白质结构,Western blot鉴定与人、大鼠和小鼠感染血清及人IgG4亚类的抗原反应性。结果SDS-PAGE、质谱分析和Western blot证明本研究获得的纯化蛋白为预期蛋白IF,其分子量为47.8kDa,肽指纹图谱与秀丽杆线虫IF蛋白家族具有高度同源性,并具有典型的IF结构特征,且IF结构的尾部存在抗原决定簇,融合蛋白IF能与大鼠感染血清、小鼠感染血清和患者血清IgG结合,也能与患者IgG4亚类结合。结论体外获得了抗原IF纯化蛋白,研究显示其可用于人类外周血检测并有助于检测现症感染和疗效考核。
- 孟锦绣何蔼程梅徐贵峰李卓雅余细勇蒋文玲李运雄詹希美
- 关键词：广州管圆线虫抗原基因
