李玉清
- 作品数:8 被引量:11H指数:2
- 供职机构:第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 一种多价精子抗原表位肽的设计与合成被引量:1
- 2002年
- 目的 :开发可供两性使用的多价合成嵌合肽疫苗。方法 :选择小鼠精子 /睾丸特异性抗原 SP1 7、Cyritestin中特异性氨基酸序列与牛核糖核酸酶非限制性 T细胞表位作为骨架 ,按一定连接方式设计、合成新抗原 3 5肽 ,并与等量弗氏佐剂混悬后免疫雌性 BALB/c小鼠。结果 :在 43 0 A固相自动肽合成仪上成功地合成了 3 5肽 ,并经 HPLC纯化、质谱鉴定证实其纯度达 95 %以上 ;新抗原免疫小鼠后获得的特异性抗血清可识别小鼠、大鼠及人睾丸组织蛋白提取物中相应分子量的蛋白质 ,且血清中特异性 Ig G抗体滴度最高达 1∶ 6 0 0 0 ,阴道粘膜冲洗液中特异性 Ig A抗体滴度最高达 1∶ 3 0 0。结论 :由含有两种特异性精子抗原、具有特异性氨基酸序列的新抗原所制备的抗血清可识别两种天然抗原 ,并在小鼠体内激发出较理想的特异性体液免疫 。
- 何畏梁志清史常旭李玉清
- 关键词:肽疫苗避孕精子免疫
- 多价精子抗原表位肽的设计与免疫效应研究
- 2002年
- 目的 开发可供两性使用的多价合成嵌合肽疫苗。方法 选择小鼠精子 /睾丸特异性抗原SP1 7、Cyritestin中特异性氨基酸序列与牛核糖核酸酶非限制性T细胞表位作为骨架 ,按一定连接方式设计、合成新抗原 35肽 ,并与弗氏佐剂混悬后免疫雌性BALB/C小鼠。结果 在 430A固相自动肽合成仪上成功地合成 35肽 ,并经HPLC纯化、质谱鉴定证实其纯度达 95 %以上 ;免疫后小鼠血清特异性IgG抗体滴度最高达 1∶6 0 0 0 ,阴道粘膜冲洗液中特异性IgA抗体滴度最高达 1∶30 0 ;小鼠脾脏淋巴细胞增殖率达 50 %左右 ,淋巴细胞分泌的INF γ和IL 4分别为 60、1 0 8μg/ml;实验组BALB/C雌鼠妊娠率平均降至 60 % ,每胎产仔数平均降低 58%~71 %。结论 含有两种特异性精子抗原中特异性氨基酸序列的新抗原可激发小鼠产生较理想的特异性体液免疫和粘膜免疫 ,并使小鼠受孕率下降 。
- 何畏梁志清吴玉章李玉清贾正才周伟史常旭
- 关键词:免疫效应肽疫苗避孕
- 一种精子蛋白嵌合肽的实验研究被引量:3
- 2002年
- 目的 探讨可供两性使用的免疫避孕疫苗的可能性。方法 设计含有小鼠精子 /睾丸特异性抗原SP17、Cyritestin中特异性氨基酸序列的新抗原 35肽。经合成、鉴定及纯化后 ,免疫雌性Balb/C小鼠 ,并了解其免疫原性 ,同时观察其抗生育效应。结果 获得的新抗原 35肽经质谱鉴定证实其合成正确 ,经高压液相色谱 (KPLC)纯化后纯度达 95 %以上 ;嵌合肽与钥孔血蓝蛋白 (KLH)偶联后免疫小鼠获得的特异性抗血清可识别小鼠、大鼠及人睾丸组织蛋白提取物中相对分子质量的蛋白质 ;与等量弗氏佐剂混悬后免疫小鼠 ,其血清中特异性IgG抗体滴度最高达 1∶6 0 0 0 ,阴道粘膜冲洗液中特异性IgA抗体滴度最高达 1∶30 0 ;免疫后小鼠受孕率降至 6 1.11% ,平均每胎产仔量也减至 4 .3只。结论 新抗原 35肽可在雌性Balb/C小鼠体内激发出较强的特异性体液和粘膜免疫 ,使小鼠受孕率和每胎产仔数明显下降。
- 何畏梁志清吴玉章史常旭贾正才周伟李玉清
- 关键词:肽类避孕
- 多价精子抗原表位多肽-免疫刺激复合物的抗生育作用研究被引量:7
- 2002年
- 目的 提高多价小鼠精子抗原表位多肽的免疫性避孕效应。方法 应用固相化学合成法合成具有两种精子抗原蛋白关键表位的 35肽 ,纯化后的多肽与皂甙QuilA及磷脂、胆固醇混合 ,透析制备多肽 免疫刺激复合物 (ISCOMs) ,并用于免疫雌性C5 7小鼠。结果 合成后的 35肽经纯化后纯度大于 95 % ,经质谱仪鉴定质荷比与理论值一致 ;透析法制备的多肽 ISCOMs在电镜下呈规则的蜂巢样、由多个亚单位构成的开放型结构 ;免疫后小鼠的血清及阴道冲洗液中特异性IgG和IgA最高分别为 1∶180 0 0和 1∶16 0 0 ;同时受孕率降为 2 0 0 % ,显著低于对照组 (P≤ 0 0 1)。结论 多肽 ISCOMs复合物具有独特的蜂巢样结构 ,其应用可显著提升多肽的免疫效应 ,尤其是粘膜免疫 ,获得较好的免疫性避孕效果 。
- 何畏史常旭梁志清李玉清
- 关键词:精子抗原ISCOMS多肽免疫刺激复合物
- 以小鼠精子/睾丸特异性抗原为基础的合成肽免疫避孕效应研究
- 2002年
- 目的 研制以精子 睾丸特异性抗原为基础的多价嵌合肽避孕疫苗。方法 选择小鼠精子 睾丸特异性抗原Sp17、Cy ritestin作为对象 ,采用分子设计的方法与外源性牛核糖核酸酶非选择性T细胞表位组合合成新型嵌合肽 3 5肽 ,并对其免疫效应进行研究。结果 该嵌合肽可刺激小鼠产生较高效价的血清和阴道粘膜特异性抗体 ,诱导脾脏淋巴细胞增殖 ,促进细胞因子IL 4的分泌 ;将其与佛氏佐剂混悬 ,免疫雌性BALB c小鼠可明显降低受孕率和每胎产仔率 ,其抗血清可显著抑制体外精 卵结合和融合。结论 新型嵌合肽具有较明确的抗生育作用 ,提示以分子设计、蛋白质优化方案进行多价避孕疫苗的研究是可行的。
- 何畏吴玉章梁志清李玉清史常旭
- 关键词:睾丸特异性抗原免疫避孕精子合成肽
- ISCOMs作为粘膜免疫佐剂在避孕疫苗构建中的作用研究
- 2004年
- 目的 探索有效提高避孕疫苗生殖道粘膜免疫的方法。方法 将合成纯化的 3 5多肽与皂甙QuilA、脂类混合物 (等体积比的磷脂和胆固醇 )以 1∶4∶1比例混合 ,经充分透析后得到 3 5肽 ISCOMs ;将 3 5肽 ISCOMs和 3 5肽 弗氏佐剂混悬物分别免疫纯系BALB c雌性小鼠 ,并比较免疫后小鼠生殖道内特异性IgA的动态变化以及小鼠生育力的变化。结果 制备成功的 3 5肽 ISCOMs在电镜下可见明显的、较规则的蜂巢样结构 ;3 5肽 ISCOMs免疫组IgA抗体在第 10周时达最高值 ( 1∶60 0 ) ,约持续 4周左右 ;而 3 5肽 弗氏佐剂组IgA抗体在第 14周时达最高值 ( 1∶3 0 0 ) ,约持续 1周左右 ;3 5肽 ISCOMs免疫后小鼠的受孕率 ( 14 3 % )显著低于 3 5肽 弗氏佐剂免疫组 ( 60 0 % )。结论 ISCOMs可以显著提高抗原在生殖道内的粘膜免疫效应 ,增强抗生育作用 ,是一种极富潜力的粘膜免疫佐剂。
- 李玉清梁志清何畏史常旭李玉艳
- 关键词:避孕疫苗ISCOMS粘膜免疫佐剂
- 抗精子多肽抗体体外抗受精作用的初步研究
- 2004年
- 目的 评价一种抗人工合成的精子多肽 ( 3 5肽 )抗体对人精子受精功能的影响情况。方法 将含抗 3 5肽抗体的兔血清与人精子共同孵育 ,用计算机辅助精液分析系统 (computeraimedspermassay ,CASA)检测精子活动力 ,以及检测顶体反应率和穿卵率。结果 抗 3 5肽抗体兔血清可显著抑制精子的速度 (包括直线速度、曲线速度和平均路径速度 )、活动精子百分比、顶体反应率及穿卵率。结论 抗 3 5肽抗体可抑制人精子受精功能 ,3 5肽作为一种避孕疫苗有一定开发前景。
- 李玉艳梁志清何畏李玉清史常旭
- 关键词:抗精子抗体
- 人工合成的人精子抗原多肽抗体与人精子结合的生物学特性研究
- 2004年
- 目的 对人工合成的精子多肽 ( 3 5肽 )抗原抗体与人精子的结合情况进行评价。方法 获得抗 3 5肽抗体后 ,用荧光素直接进行标记 ,通过流式细胞仪检测抗体与精子的结合率 ,并在荧光显微镜下观察抗体与人精子的结合部位。结果 人精子抗 3 5肽抗体阳性率为 97 7% ,荧光显微镜下见精子头颈部着色 ,部分见赤道板及头部顶端着色增强。结论 3 5肽在人精子头表面有高度表达 ,抗 3 5肽抗体可与人精子表面高度特异结合。
- 李玉艳梁志清何畏李玉清史常旭
- 关键词:精子合成多肽抗体流式细胞术