李新泉
- 作品数:4 被引量:16H指数:4
- 供职机构:新疆农业大学林学与园艺学院更多>>
- 发文基金:新疆维吾尔自治区科技计划项目新疆维吾尔自治区重点学科建设项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 枣实蝇及其他5种检疫性实蝇的PCR-RFLP快速鉴定被引量:4
- 2014年
- 枣实蝇(Carpomya vesuviana Costa)是一种新入侵检疫性有害生物。应用PCR-RFLP技术,快速区分鉴定了枣实蝇与我国口岸截获频率较高的5种检疫性实蝇。研究表明:设计出的2对引物对6种供试实蝇线粒体DNA(mtDNA)进行PCR扩增,其扩增片断大小分别为350 bp和450 bp。PCR扩增产物用2种限制性内切酶Dra I和MseI进行酶切,根据不同的酶切位点准确区分了6种供试的实蝇。此方法可用于口岸截获实蝇的快速检疫鉴定。
- 程晓甜阿地力·沙塔尔张伟李新泉
- 关键词:枣实蝇检疫性实蝇PCR-RFLP线粒体DNA
- SYBR Green实时荧光PCR快速鉴定枣实蝇技术被引量:7
- 2014年
- 应用SYBR Green实时荧光PCR技术,建立SYBR Green实时荧光PCR快速鉴定枣实蝇的方法。利用枣实蝇(mtDNA)中COⅠ基因序列,设计筛选出1对种的特异引物CarF/CarR。引物的特异性分别用桔小实蝇、瓜实蝇、南瓜实蝇、番石榴实蝇和桃果实蝇5种实蝇来验证。SYBR Green PCR实时荧光反应的灵敏度用40,20,10,1,0.1,0.01,0.001 ng·μL^-1 7个浓度枣实蝇DNA模板来检测。结果表明:SYBR Green PCR的检测限度达0.01 ng·μL^-1以下,最适模板DNA浓度为1~20 ng·μL^-1。SYBR Green实时荧光PCR的可靠性可用枣实蝇不同虫态(幼虫、蛹、成虫)的扩增曲线、熔解曲线及PCR产物的琼脂糖凝胶电泳来检验。成虫、幼虫和蛹3种不同虫态的枣实蝇有一致的扩增曲线,熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳条带分别用来确认实时荧光PCR产物的特异性;其平均熔解温度为(75.3±0.1)℃,并获得一段长为205 bp的特异性目标片段,说明在枣实蝇成虫为模板的基础上建立的SYBR Green实时荧光PCR方法同时适用于幼虫、蛹的快速鉴定,可将不同虫态的枣实蝇与近似种类区分开来。
- 程晓甜阿地力·沙塔尔张伟李新泉玛依拉
- 关键词:枣实蝇SYBR实时荧光PCR
- 枣实蝇特异引物PCR鉴定技术被引量:11
- 2013年
- 在设计的枣实蝇15对引物中,利用种特异引物PCR(SS—PCR)和琼脂糖凝胶电泳技术筛选出1对枣实蝇的特异性引物,引物的特异性用桔小实蝇、瓜实蝇、南瓜实蝇、番石榴实蝇和桃果实蝇等5种实蝇来验证。SS—PCR方法的检测灵敏度用40,20,10,1,0.1,0.01,0.001ng·μL^-1等7个不同浓度系列的枣实蝇DNA模板来检测。结果表明,SS.PCR方法的检测限度达0.01ng·μL^-1以下,最适模板DNA浓度为1~20ng·μL^-1。所设计的引物对枣实蝇不同虫态均能进行特异性扩增,结果准确可靠。该技术体系可用于枣实蝇的鉴定识别与检测监测,对阻止其进一步扩散蔓延具有重要意义。
- 程晓甜阿地力.沙塔尔张伟温俊宝李新泉陈梦
- 关键词:枣实蝇琼脂糖凝胶电泳
- 枣实蝇4个地理种群的线粒体Cytb、基因序列分析被引量:4
- 2014年
- 新人侵重大检疫性害虫枣实蝇(Carpomya vesuviana)于2007年首次在吐鲁番地区发现,对该地区枣(Zizyphus jujuba)产业造成了毁灭性损失,且疫情有向其他地区扩散的趋势。枣实蝇原产印度,现已扩散至阿富汗、塔吉克斯坦、泰国、意大利等国家(张润志等,2007)。枣实蝇以成虫产卵和幼虫蛀食危害枣果,成虫产卵于果实表面,致使产卵孔周围组织发育停止,形成凹陷或畸形。
- 程晓甜阿地力·沙塔尔张伟李新泉
- 关键词:枣实蝇CYTB进化树