李宝华
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：天津市第三中心医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 环境胁迫下细菌非编码小RNA对基因表达的调控被引量：3
- 2019年
- 细菌非编码小RNA(sRNA)是长度约为50~500个核苷酸的RNA分子。其编码基因位于基因间区域,在细菌基因组中可被转录但不被翻译为蛋白质,随着生物信息学和RNA测序技术的发展,sRNA功能受到广泛关注。在不断变化的环境中,细菌遇到各种各样生存压力,sRNA通过感应环境变化调节相应基因的表达。在细菌适应环境的过程中发挥了重要作用。本文对环境胁迫下细菌sRNA的表达变化和其对基因的表达调控进行综述,揭示sRNA细菌基因转录后调控、生物适应性进化等生命过程的重要意义。
- 李宝华戈海泽刘树业
- 关键词：细菌基因表达
- miR-499在肝癌发生和发展中的作用机制研究被引量：2
- 2020年
- 目的以肝癌细胞系Huh7细胞为模型,研究miR-499在肝癌发生和发展中的作用机制。方法通过TCGA和GEO数据库分析miR-499在肝癌患者及健康人中的表达差异,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌组织及正常癌旁组织中miR-499的表达差异。通过临床病例分析miR-499与肝癌患者临床指标的关系。采用CCK-8试验、集落形成试验检测miR-499对Huh7细胞活性及集落形成的影响。采用流式细胞术检测miR-499对Huh7细胞周期及相对凋亡率的影响。用TargetScan7.1、MicroRNA.org、MiRDB等数据库预测miR-499的下游靶基因。通过RT-qPCR及Western blot试验证明miR-499对RAB5C mRNA及蛋白水平的影响。结果TCGA和GEO数据库数据显示,miR-499在肝癌患者中呈低表达。RT-qPCR结果表明,miR-499在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织。临床数据整理表格显示,肝癌患者中miR-499高表达的患者普遍肿瘤体积较小、TNM分期较低、淋巴结转移能力较弱且分化良好。miR-499 mimics转染Huh7细胞后,通过CCK8试验和集落形成试验发现,miR-499抑制Huh7细胞增殖及集落形成能力。流式细胞术细胞周期与凋亡试验表明,miR-499抑制Huh7细胞的周期进程,并且促进Huh7细胞的凋亡能力。RT-qPCR及Western blot试验证明,RAB5C确为miR-499的靶基因。结论miR-499通过直接靶定并下调RAB5C的表达,从而抑制肝癌的发生和发展。
- 李宝华戈海泽刘树业
- 关键词：肝癌HUH7细胞细胞增殖
- miR-193a在肝癌中的表达水平及临床意义被引量：1
- 2019年
- 目的探讨微RNA-193a(microRNA-193a,miR-193a)在肝癌中的表达水平,并在分子水平研究其相关作用机制。方法数据库分析和RT-PCR试验检测人肝癌组织及其癌旁组织中miR-193a的表达水平;CCK-8法检测miR-193a对Huh7细胞活性的影响;细胞集落形成和Transwell试验分别检测miR-193a对Huh7细胞集落形成、迁移和侵袭能力的影响;荧光素酶报告试验检测miR-193a与其候选靶基因KRAS的靶向关系;RT-PCR和Western blot检测miR-193a对KRAS mRNA和蛋白水平的影响。结果与癌旁组织比较,肿瘤组织中miR-193a的表达水平明显降低,这与GEO和TCGA数据库中的数据结果一致;转染miR-193a mimics的肝癌细胞Huh7的细胞活性、集落形成能力、迁移能力及侵袭能力都低于转染miR-NC组;miR-193a能够直接靶向KRAS并下调其表达。结论 miR-193a通过下调KRAS表达抑制了肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力。
- 李宝华戈海泽刘树业
- 关键词：肝肿瘤HUH7细胞KRAS
