李国良 作品数:22 被引量:33 H指数:3 供职机构: 西安交通大学医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 国家级大学生创新创业训练计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
HEK293细胞中杂合状态下无义突变体L539fs/47对野生型HERG电流的作用 2016年 目的研究单独表达无功能的无义突变体L539fs/47在HEK293细胞中杂合状态下对野生型HERG电流的作用。方法用脂质体转染法将野生型HERG及突变体HERG-L539fs/47分别转染HEK293细胞36h后,RT-PCR检测HERG mRNA表达,免疫荧光及免疫印迹检测HERG蛋白定位及表达量,全细胞膜片钳检测IHERG电流密度。结果野生组HERG的mRNA表达量高于L539fs/47突变组(1.066±0.612 vs.0.254±0.397,P<0.01)。免疫荧光检测发现野生型HERG蛋白多于突变体,野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体蛋白大部分滞留胞质。免疫印迹显示:不同于野生型HERG135ku及155ku 2个条带,突变体仅60ku 1个条带。全细胞膜片钳检测WT+MT组IHERG较WT组下降55.23%(22.03±2.62 vs.49.20±2.31pApF,P<0.01)。结论 HEK293细胞中杂合状态下截断突变体L539fs/47对野生型HERG电流的不完全负显性抑制作用。 吕颖 张军波 张爱峰 刘仲伟 王军奎 韩稳琦 潘军强 李国良 孙超峰关键词:HERG 无义突变 HEK293细胞 先天性长QT综合征2型hERG基因G604S突变真核表达载体的构建和表达 2015年 目的:构建长QT综合征(LQTS)2型h ERG基因G604S突变的真核表达载体G604S-h ERG-pc DNA3、G604S-h ERG-p EGFP。方法:采用重叠延伸PCR法在p EGM-h ERG基础上构建G604S突变体PGEM-h ERG-G604S,通过限制性内切酶法和基因重组技术将突变体插入到真核表达载体pc DNA3和p EGFP-C2中并测序验证,用脂质体转染法将G604S-h ERG-p EGFP转染至HEK293细胞并观察其荧光表达。结果:构建的含有突变位点的真核表达载体经DNA测序均成功验证h ERG基因1 810位点碱基G突变为A,构建的G604S-h ERG-p EGFP在HEK293细胞中成功表达绿色荧光。结论:成功构建h ERG基因G604S-h ERG-pc DNA3和G604S-h ERG-p EGFP表达载体。 韩稳琦 霍建华 李国良 蒋永荣 武金娥 孙超峰关键词:先天性长QT综合征 HERG基因 突变 真核表达载体 诱导性多功能干细胞在长QT综合征中的应用 诱导性多功能干细胞(induced human pluripotent stem cells,iPSC),也称诱导性多潜能干细胞,是利用特定基因或是特定基因产物(如蛋白质)诱导成体细胞重新编码,在一定条件下转化为类似胚胎... 李国良 孙超峰关键词:长QT综合征 分化潜能 长QT综合征2型HERG基因绿色荧光真核表达载体的构建及表达 2015年 目的构建先天性长QT综合征2型HERG基因绿色荧光真核表达载体p EGFP-C2-HERG,并检测其于活体细胞中表达及定位。方法采用限制性内切酶双酶切法和基因重组技术将HERG基因片段构建到真核表达载体p EGFP-C2中,通过琼脂糖凝胶电泳和DNA测序验证;构建成功的p EGFP-C2-HERG真核表达载体用脂质体转染法转染HEK293细胞后通过蛋白免疫印迹法再次鉴定重组蛋白的表达,并通过激光共聚焦显微镜观察其荧光蛋白表达及定位。结果琼脂糖凝胶电泳证实新构建的真核表达载体p EGFP-C2-HERG碱基大小正确,DNA测序提示HERG基因碱基序列与模板一致,新构建表达载体成功转染入HEK293细胞并于细胞膜上成功表达。结论成功构建p EGFP-C2-HERG真核表达载体,转染入HEK293细胞并于细胞膜上成功表达通道蛋白;此方法构建的表达绿色荧光的真核表达载体为药物筛查、突变型基因的研究奠定了基础。 韩稳琦 李国良 程功 吕颖 武金娥 蒋永荣 孙超峰关键词:遗传性长QT综合征 HERG基因 基因重组 蛋白表达 非透析慢性肾病室性心律失常的发生率及其预测因素分析 2020年 目的旨在调查和分析非透析性慢性肾病(CKD)患者室性心律失常的发生率及其预测因素,为预防和治疗提供相关依据。方法连续入选于西安交通大学第一附属医院诊治的CKD患者,并行24 h动态心电图、心脏超声及相关实验室检查,对室性心律失常进行分析。结果84例CKD患者(男性53例)中34例(40%)发现室性心律失常,其发生与高龄、肾小球滤过率(GFR)降低、左心室质量及左心功能受损密切相关。经logistic多因素分析显示,高龄、GFR水平和左室射血分数下降是此类患者室性心律失常发生的预测因素。结论非透析CKD患者有较高发生室性心律失常的风险,在临床治疗过程中需要密切监测并进行早期防治,以最大程度地降低其发生率。 师睿 李国良 强华 李红兵 卫月娇 薛小临 孙超峰 殷艳蓉关键词:慢性肾病 室性心律失常 动态心电图 盐酸吡咯列酮对动脉粥样硬化兔主动脉脂联素表达的影响 被引量:1 2014年 目的探讨盐酸吡格列酮对兔动脉粥样硬化斑块内脂联素表达的影响及其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法新西兰兔36只,随机分为对照组、高胆固醇饮食组、高胆固醇饮食加吡咯列酮组,喂养8周后处死每组动物,取出从近主动脉弓部到髂动脉分叉处全部主动脉,测量主动脉粥样硬化斑块面积、内膜厚度及内膜/中膜厚度比值;行Masson染色及免疫组化染色,观察兔主动脉粥样硬化程度及脂联素在各组动脉粥样硬化斑块中的表达。结果高胆固醇饮食加吡咯列酮组动脉粥样硬化斑块面积与动脉内膜面积比值高于正常对照组,低于高胆固醇饮食组,差异有统计学意义(P<0.05);高胆固醇饮食加吡咯列酮组内膜厚度、内膜/中膜厚度比均高于正常对照组,低于高胆固醇饮食组,差异有统计学意义(P<0.05);高胆固醇饮食加吡咯列酮组血管壁脂联素蛋白表达低于正常对照组,高于高胆固醇饮食组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论吡格列酮具有抗动脉粥样硬化的作用,可使主动脉粥样硬化斑块内脂联素蛋白表达水平上调。 潘军强 姚晓伟 周鑫 韩稳琦 李国良 孙超峰关键词:吡格列酮 动脉粥样硬化 脂联素 右冠状动脉闭塞致下壁及右胸导联呈de Winter心电图改变1例报道 2022年 1临床资料患者,男,30岁,以“突发胸痛、胸闷7h”为主诉于2020年4月26日凌晨1:50就诊于西安交通大学第一附属医院。患者7h前无明显诱因出现胸骨后压榨性疼痛,间断发作,伴憋闷,不向肩背部放射,胸痛持续约20min可自行缓解;此后胸痛反复发作,程度逐渐加重。2h前进展为持续性胸痛,程度剧烈,伴出汗、胸闷,就诊于当地医院,心电图检查提示“心肌缺血”,心肌酶正常,考虑“急性冠状动脉综合征”,建议转诊治疗,遂经胸痛中心转诊至我院。患者既往有高血压病史2年,最高血压160/120 mm Hg(1 mm Hg=0.133kPa),规律口服缬沙坦氨氯地平片,血压控制良好。否认吸烟、饮酒史及冠心病家族史。 宁菲菲 吴燕 王亭忠 李国良关键词:右冠状动脉 ST段压低 长QT间期综合征1例 被引量:1 2017年 1临床资料青年女生,20岁,以"发作性晕厥6年,胸闷、气短20d"主诉于2015年10月28日入院。6年前无明显原因突发晕厥,无口吐白沫,无双眼上翻等,醒后不能回忆当时情况。经常于劳累或情绪激动时出现轻微胸闷、呼吸困难、心慌,经休息后可逐渐缓解。20d前活动后呼吸困难、心慌、胸闷,伴黑矇,无猝倒,无晕厥。体格检查:血压90/54mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),脉搏70、心率70次/min,心律齐,各瓣膜区未闻及病理性杂音及额外心音。 马鸿兰 李国良 武金娥 栾慧 孙超峰关键词:长QT间期综合征 尖端扭转性室性心动过速 心律失常 左室心肌致密化不全家系的临床特征及超声心动图表现 被引量:1 2019年 【目的】通过对一个左室心肌致密化不全(Left ventricular noncompaction,LVNC)家系进行系谱和超声心动图(UCG)分析,为该疾病的诊断和治疗提供更多依据。【方法】对一个LVNC家系进行调查、对临床表现和UCG进行分析,绘制该家系的家族系谱,观察记录家系中患者的临床表现及UCG特点。【结果】该LVNC家系中3代15人中,共有6位具有LVNC的临床表现或UCG改变。在该家系中成年患者主要表现为左心功能不全,未成年患者无临床症状。UCG表现为典型的LVNC改变:左室局部心肌存在异常粗大的肌小梁,肌小梁间可见深陷隐窝;收缩末期左室心肌非致密化层/致密化层(N/C)≥2,射血分数<50%。通过对家族系谱进行分析,发现该家系中男女均可患病,患者的父母双亲中必定有一人是患者,家系中每一代均有发病者,提示LVNC在该家系中以常染色体显性遗传方式遗传。【结论】LVNC的遗传方式为常染色体显性遗传,成年患者的临床表现主要为左心功能不全,未成年患者无临床症状。UCG在LVNC的诊断当中发挥着重要作用,能够发现LVNC的典型改变。 朱雯瑾 武金娥 李国良 杨春关键词:超声心动描记术 大蒜素对人ether-à-go-go-related gene通道的急性作用研究 2014年 目的:研究大蒜素对人ether-à-go-go-related gene通道的作用。方法:利用全细胞膜片钳技术检测表达在人胚肾293细胞上的hERG通道产生的电流IKr。结果:大蒜素对hERG通道没有明显的抑制作用。结论:大蒜素对hERG通道没有急性抑制作用。这可能是由于大蒜素对hERG通道没有直接的阻滞作用。因此,还需要通过研究大蒜素对hERG通道的慢性作用来进一步阐明大蒜素发挥抗心律失常生物活性的原因。 刘萍 李国良 武金娥 孙超峰关键词:大蒜 药理学 离子通道 药物作用