- HLA-G低表达通过MAPK信号通路影响滋养细胞生物学行为
- 滋养层细胞是胚胎与母体直接接触的部分,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞、绒毛外细胞滋养层细胞三个亚群。妊娠早期滋养层细胞具有高增殖能力及类似恶性肿瘤细胞的侵袭能力等独特的生物学功能。滋养细胞侵入母体蜕膜后,不被母体排斥...
- 李会俭
- 关键词：HLA抗原组织相容性抗原I类小分子干扰RNA
- 文献传递
- 靶向人类白细胞抗原G1(HLA-G1)的siRNA真核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 目的:构建靶向人类白细胞抗原G1(HLA-G1)的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体(pSUPER-HLA-G1),并检测其在滋养细胞系HTR-8/SVneo中的敲减效率。方法:将设计的HLA-G1 siRNA寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-HLA-G1真核表达载体,并用脂质体法将其转染入HTR-8/SVneo细胞系中。pSUPER-HLA-G1质粒转染后采用RT-PCR检测HLA-G1在HTR-8/SVneo细胞中的基因转录情况,Western blotting检测HLA-G1蛋白的表达情况。结果:构建的真核表达载体pSUPER-HLA-G1可在HTR-8/SVneo细胞中表达,HLA-G1 mRNA和其蛋白表达抑制率分别为74.85±7.43%和71.07±6.11%。结论:构建的人HLA-G1 siRNA蛋白真核表达载体pSUPER-HLA-G1有效地沉默了HLA-G1在HTR-8/SVneo滋养细胞中的基因表达及蛋白表达,为今后以HLA-G1为靶点的基因研究奠定了基础。
- 李会俭刘学渊顾蔚蓉李笑天
- 关键词：RNA干扰(RNAI)真核表达载体子痫前期
- 人类白细胞抗原G基因表达对滋养细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响被引量：3
- 2011年
- 目的 探讨人类白细胞抗原G（HLA-G）基因表达变化对滋养细胞侵袭力、滋养细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）及磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）蛋白表达的影响.方法 对滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞进行体外培养并分组,将细胞分为实验组[转染HLA-G小分子干扰RNA（siRNA）]、阴性对照组（转染阴性对照siRNA）和空白对照组（仅转染脂质体2000）.分别用逆转录（RT）PCR技术测定转染后细胞中HLA-G mRNA的表达;蛋白印迹法测定HLA-G蛋白的表达来验证核糖核酸干扰（RNAi）敲减效率;穿膜小室侵袭实验检测细胞的侵袭力;蛋白印迹法检测p-p38MAPK积分吸光度（IA）与p38MAPK IA的比值;检测加入抑制剂SB203580后穿膜小室的侵袭细 胞数.结果 （1）HLA-G mRNA表达：实验组为0.26±0.08,阴性对照组为0.71±0.11,空白对照组为0.79±0.07.实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;实验组HLA-G mRNA表达抑制率为（69.8±6.3）%,阴性对照组HLA-G mRNA表达抑制率为（14.9±2.2）%,空白对照组为0.（2）HLA-G蛋白表达：实验组为0.20±0.15,阴性对照组为0.75±0.12,空白对照组为0.76±0.21.实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;实验组HLA-G蛋白表达抑制率为（81.1±14.4）%,阴性对照组HLA-G蛋白表达抑制率为（18.0±7.7）%,空白对照组为0,实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.（3）穿膜小室下室的侵袭细胞数：实验组为（57±38）个,阴性对照组为（364±79）个,空白对照组为（260±84）个.实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.（4）p-p38MAPK与p38MAPK蛋白比值：实验组为0.74±0.04,阴性对照组为0.47±
- 李会俭顾蔚蓉李笑天
- 关键词：HLA抗原组织相容性抗原I类滋养层P38丝裂原活化蛋白激酶类
