李业南
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 流行性乙型脑炎病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立
- 为建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)的定量检测方法,本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针,并以E基因重组质粒作为标准品,建立检测JEV的TqMan荧光定量PCR方法.结果显示,该方法的灵敏度可达到10个...
- 霍红李业南薛遥郭立平王晓磊步志高华荣虹
- 关键词：基因检测荧光定量聚合酶链反应
- 文献传递
- 流行性乙型脑炎prM蛋白剪切位点突变的prM-E蛋白表达细胞系的建立被引量：1
- 2013年
- 为建立稳定共表达乙型脑炎病毒(JEV)完整M前体蛋白(prM)和E蛋白的BHK-21细胞系,本研究在prM蛋白furin蛋白酶剪切位点编码基因中引入突变,将突变后的prM基因克隆于质粒中构建重组表达质粒pCAG-JEV-prM(R89A)E。将重组质粒转染BHK-21细胞,转染48 h后细胞用含G418的选择性培养基选择培养,进一步经细胞克隆纯化制备表达剪切位点突变的JEV prM-E蛋白的稳定细胞系。经IFA和western blot鉴定表明,该细胞系能表达JEV prM与E蛋白,所表达的prM蛋白未发生剪切;细胞经多次传代后仍能够稳定地共表达prM与E蛋白。该细胞系的建立为研究prM蛋白剪切对JEV粒子形成的影响以及亚单位疫苗的制备奠定了基础。
- 李业南陈振师步志高华荣虹
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒细胞系
- 流行性乙型脑炎病毒prM蛋白furin蛋白酶剪切位点突变分析及稳定表达细胞系的构建
- 流行性乙型脑炎（Japanese encephalitis，JE）是亚洲地区最为严重的流行性脑炎，是一种人兽共患性急性传染病。该病严重威胁人类健康，同时对养殖业造成巨大危害。该病目前没有特异治疗方法，疫苗免疫是预防控制该...
- 李业南
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒细胞系病毒样颗粒
- 文献传递
- 稳定表达鸭坦布苏病毒prM-E蛋白细胞系的构建
- 为了构建稳定表达鸭坦布苏病毒prM-E蛋白的哺乳动物细胞系及研制鸭坦布苏病毒病亚单位疫苗,本研究构建了鸭坦布苏病毒prM-E蛋白基因真核表达质粒,转染BHK-21细胞后经免疫荧光与western blot筛选,获得了稳定...
- 华荣虹李业南陈振师柳金雄步志高
- 关键词：丙种球蛋白细胞系亚单位疫苗
- 文献传递
- 猪流行性乙型脑炎病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立被引量：2
- 2014年
- 为建立猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)的定量检测方法,本实验根据JEV的E基因保守序列设计一对特异性引物及探针,并以E基因重组质粒作为标准品,建立检测JEV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果显示,该方法的灵敏度可达到10个拷贝,是常规PCR灵敏度的100倍。该方法对其它相关猪病病毒的检测显示均为阴性。重复性试验表明该方法的组间和组内的变异系数均小于2%。通过检测未免疫猪和免疫减毒活疫苗猪在感染JEV后的病毒血症样品,将该方法与JEV传统病毒分离方法进行比较,结果表明该方法与乳鼠脑内接种方法灵敏度相同,比细胞分离方法灵敏度高。该方法可以作为临床检测JEV及评价疫苗保护效力的检测方法。
- 霍红李业南薛遥郭立平王晓磊步志高华荣虹
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒
- 稳定表达乙型脑炎病毒NS1蛋白细胞系的建立被引量：1
- 2011年
- 为建立稳定表达乙型脑炎病毒(JEV)NS1蛋白的真核细胞系,本研究将编码JEV NS1蛋白的人工合成基因克隆到真核表达载体pCAGG-TK-neo中,构建了重组质粒pCAGG-opti-NS1。重组质粒经脂质体转染RK-13细胞,以含G418的选择性培养基选择培养,经细胞克隆纯化,以间接免疫荧光试验(IFA)筛选表达目的基因的细胞。结果表明,转染的RK-13细胞经G418加压及IFA筛选后,获得表达JEV NS1蛋白的阳性RK-13细胞系。经RT-PCR、western blot和IFA鉴定,该细胞系在传代至第15代后仍然可以稳定表达NS1蛋白。本实验获得了能够稳定表达JEV NS1蛋白的细胞系,为进一步开展JEV相关的研究奠定了基础。
- 陈振师刘立科汪恩强李业南华荣虹
- 关键词：乙型脑炎病毒NS1蛋白细胞系
- 流行性乙型脑炎病毒病毒样颗粒的表达及免疫原性研究
- 引言流行性乙型脑炎病毒（JEV）可以感染人类及多种动物,是一种危害严重的蚊媒传播的人兽共患病病原[1]。马感染可导致脑炎,猪感染可导致种猪严重的繁殖障碍与仔猪发生神经系统疾病[2,3]。疫苗免疫是预防控制该病毒病的有效措...
- 华荣虹李业南陈振师刘立科霍红王晓磊郭立平步志高
