朱静
- 作品数：13 被引量：151H指数：6
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质被引量：32
- 2000年
- 由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉１４９发酵液中存在两型木聚糖酶，依次为Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ．通过硫酸铵分级沉淀及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０柱层析分别将Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由ＳＤＳ一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ的分子量分别为３７ｋＤａ，７６ｋＤａ，２４ｋＤａ和２３ｋＤａ，Ｘ－Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为２７６％和７．３％。Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ最适反应温度分别为５０℃和５５℃，ｐＨ为４６和５．２。在ｐＨ４．６～９．２和ｐＨ４．０～１０．０之间Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ活力稳定。５０℃保温２４ｈ，Ｘ－Ⅰ活力仍为１００％，而Ｘ－Ⅱ的活力已降为２．８％。ＨｇＣｌ２和ＡｇＮＯ３显著抑制Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ的活力。Ｘ－Ⅰ与Ｘ－Ⅱ水解不同来源的木聚糖，其产物有所不同。
- 陈红歌朱静梁改芹严自正贾新成张树政
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶纯化纸浆漂白
- 酸性木聚糖酶产生菌的筛选及产酶条件被引量：39
- 1999年
- 从１５０株真菌中筛选到８株产木聚糖酶活力在１００Ｕ／ｍＬ以上的菌株，其中活力最高的为黑曲霉（编号１４９）（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ）。该菌株产酶较适培养基为：麸皮半纤维素４％，ＮａＮＯ３１％，麸皮１％，用不加（ＮＨ４）２ＳＯ４和尿素的Ｍａｎｄｅｌｓ氏营养盐液配制。２８℃～３０℃振荡培养６０ｈ，酶活力最高可达３７５．２Ｕ／ｍＬ。该酶最适作用ｐＨ为４６，在ｐＨ３～１１之间基本稳定。该菌株发酵液中含有木聚糖酶（相对活力１００）外还有淀粉酶（１８），甘露聚糖酶（０９８），β木糖苷酶（０９４）和纤维素酶（０１７）。
- 陈红歌朱静梁改芹严自正张树政
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶发酵条件
- 分枝犁头霉α-半乳糖苷酶的底物特异性被引量：1
- 1989年
- α-半乳糖苷酶作用于棉子糖后产物为半乳糖和蔗糖,作用于蜜二糖后产物为半乳糖和葡萄糖。对蜜二糖,棉子糖及水苏四糖的水解速率顺序为:蜜二糖(82.2%)>水苏四糖(13.7%)>棉子糖(7.5%)。对于酶的不同底物pNpGal、蜜二糖、棉子糖及α-甲基-D-半乳糖苷,其K_m值分别为0.29、5.0、79.4及55.5mmol/L,V_(max)值分别为1.43、0.23、0.21及0.16μmol·min^(-1)·ml^(-1)。测定了43种碳水化合物对酶活力的影响。其中半乳糖、甘油醛及纤维二糖使酶活力下降50%以上,D-阿拉伯糖、塔格糖、半乳糖醛酸、D-核糖、L-阿拉伯糖、D-葡萄糖酸内酯,乳糖及蔗糖使酶活下降到70%左右;而二羟丙酮、2-脱氧-D-半乳糖及异丙基β-D-硫代半乳糖苷使酶活提高50%左右;其余的碳水化合物对酶活无明显影响。测定了Hg^(2+)、甘油醛及半乳糖对酶的抑制类型。结果表明,Hg^(2+)是α-半乳糖苷酶的非竞争性抑制剂,半乳糖及甘油醛是酶的竞争性抑制剂,后两者的K_i值分别为8.3及12.5mmol/L。
- 朱静严自正张树政
- 关键词：半乳糖苷酶底物特异性
- 麦芽四糖淀粉酶的晶体培养及初步衍射研究被引量：2
- 1997年
- 麦芽四糖淀粉酶是水解方式独特、其产物又具有较广泛应用价值的一种淀粉酶。应用悬滴汽相扩散法，用从产碱菌发酵培养液分离纯化得到的麦芽四糖淀粉酶成功地培养出了质量较好的单晶体。测得该种晶体属正交晶系，空间群为Ｐ２１２１２１，晶胞参数ａ＝４６．６Ａ。，ｂ＝６５．８Ａ。，ｃ＝１７０．９Ａ。，一个不对称单位含一个麦芽四糖淀粉酶分子。用ＭａｒＲｅｓｅａｒｃｈＩＰ面探测器收集了一套分辨率高于２．７Ａ。的衍射强度数据。
- 马建华王耀萍韩毅毕汝昌朱静严自正
- 关键词：淀粉酶麦芽四糖淀粉酶生物物理衍射
- 微生物产生的木聚糖酶的功能和应用被引量：44
- 1996年
- 木聚糖是一种异质多糖,主要由木糖和阿拉伯糖组成。微生物产生的木聚糖酶来源广泛,能将木聚糖水解为木寡糖和D-木糖。该酶具有极大的应用价值,如可用于纸浆的漂白以减少环境污染,也可将造纸工业及农业废料中的木聚糖转化为D-木糖。
- 朱静严自正
- 关键词：微生物木聚糖酶
- 产碱菌麦芽四糖淀粉酶多型性的形成
- 1997年
- 产碱菌培养液的酶谱呈一主带Ｇ４Ａ１及两次带Ｇ４Ａ２与Ｇ４Ａ３，分别进行纯化并鉴定其水解产物，均为麦芽四糖，说明三者全是麦芽四糖淀粉酶，它们以多型性形式存在于产碱菌培养液中。培养液中没有检出糖苷酶，２４，７２，９６ｈ培养液中不含蛋白酶（仅４８ｈ培养液中有微量蛋白酶），说明多型性不是糖苷酶和蛋白酶造成的。改变培养条件不影响多型性产生。
- 朱静车凤琴严自正梁改芹张树政
- 关键词：产碱菌麦芽四糖淀粉酶多型性
- 产碱菌麦芽四糖淀粉酶水解淀粉的特性被引量：2
- 1996年
- 产碱菌麦芽四糖淀粉酶水解不同来源淀粉的产物组成有差异:G4占81.5％～98.8％,G_3占0％～9.6％,G_2占0％～5.9％。不同淀粉的水解速度在4170～9036mgGlch^-(1)·mg^(-1)之间。对可溶性淀粉的水解产物为6-型。麦芽四糖淀粉酶能被小麦、玉米及马铃薯的生淀粉吸附,其吸附率分别为60.2％、50.0％及52.2％,相对水解率分别为4.5％、2.7％及0％,水解生淀粉的主要产物为G_4。
- 朱静严自正周健张树政
- 关键词：产碱菌细菌麦芽四糖淀粉酶淀粉
- 木聚糖酶的制备及其在麦草浆漂白中的应用被引量：23
- 2002年
- 由黑曲霉菌株制备出酸性和偏碱性的木聚糖酶,研究了酶的基本特性,优化了酶的预处理条件,并进行了麦草浆酶预处理-漂白的实验室实验和生产试验。结果表明:当漂白用氯量为5%时,酶处理浆比对照浆提高白度4.5%ISO,在达到相同的纸浆白度时,酶处理浆可节省用氯量28%。
- 冯文英李振岩常清荣梁改芹朱静严自正
- 关键词：木聚糖酶麦草浆漂白造纸
- 分枝犁头霉α-半乳糖苷酶的氨基酸组成及化学修饰被引量：2
- 1991年
- α-半乳糖苷酶进行氨基酸组分分析,结果为含有较多的酸性及巯水性氨基酸,较少的组氨酸、酪氨酸及半胱氨酸。 用几种蛋白质侧链修饰试剂对α-半乳糖苷酶进行化学修饰。在一定条件下,当巯基及酪氨酸残基分别被NEM、IAA及NAI修饰后,酶活力不受影响,说明这些基团与活力无关。当羟基、组氨酸及色氨酸残基分别被EDC、DEP、NBS及HNBB修饰后,酶活力大幅度下降,说明这些基团或者参与了酯催化作用或者位于酯活性位区附近。
- 朱静严自正张树政
- 关键词：Α-半乳糖苷酶氨基酸化学修饰
- 分枝犁头霉α-半乳糖苷酶的纯化和性质被引量：2
- 1989年
- 分枝犁头霉菌丝体球经金刚砂磨碎用水提取的粗酶液,用两种方法纯化,一是用制备垂直平板凝胶电泳;另一是经硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-200、DEAE-Sephadex A50及羟基磷灰石等柱层析。这两种方法纯化后的样品经PAGE鉴定皆为均一带,无其他糖苷酶活性。酶反应最适温度为55—60℃,在50℃保温7h,剩余活力为50%,70℃保温10min,则全部失活。最适pH为5.0,pH6.0—8.5稳定。紫外吸收峰最高在波长272nm处,最低在248nm。激发光谱高峰在波长280nm,荧光发射光谱在300—400nm之间,最高在336nm。用浓度梯度PAGE测定分子量为323000,SDs-PAGE测亚基分子量为81000。薄层凝胶等电聚焦测pⅠ值为4.2。 Pb^(2+)和Mn^(2+)对酶有激活作用,Hg^(2+)、Ag^(2+)及Cu^(2+)有强烈的抑制作用。4mol/L尿素使酶活剩余70%,1.5mol/L盐酸胍使酶活剩余50%。2% SDS使酶活剩余25%。
- 严自正朱静朱梅芳徐桃献张树政刘波
- 关键词：半乳糖苷酶糖苷酶
