朱小玲
- 作品数：10 被引量：28H指数：5
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目上海市教育委员会重点学科基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 日本沼虾VASA蛋白的原核表达、抗体制备及其免疫鉴定被引量：6
- 2010年
- Vasa基因具有在性腺中特异表达的特点,在生殖细胞分化与发育过程中起重要作用。从日本沼虾精巢cDNA中克隆了vasa基因的阅读框,连接到pET-32a载体,构建重组表达质粒pET32a-vasa,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导融合表达,表达产物经SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约85ku,表达量约占包涵体总蛋白的48.7%,Western-blotting检测表明,融合蛋白可特异地被anti-HIS标签抗体识别。用Ni2+-NTA纯化后的融合蛋白免疫家兔,制备获得多克隆抗体,ELISA显示该抗体效价达1∶160000,Western免疫鉴定显示该抗体不仅能识别融合蛋白,而且也能识别日本沼虾性腺粗提液中的内源性VASA蛋白,免疫组化进一步显示,VASA蛋白主要分布在卵母细胞核周围和精原细胞质中,成熟精子中无信号,暗示VASA在日本沼虾生殖细胞发育分化过程中扮演重要角色。
- 崔峥朱小玲邱高峰
- 关键词：日本沼虾原核表达多克隆抗体
- 日本沼虾蜕皮激素受体(EcR)的cDNA克隆及其在胚胎发育过程中的表达分析被引量：8
- 2009年
- 从日本沼虾中克隆了cDNAs编码的蜕皮激素受体基因(MnEcR)核苷酸序列。将编码区中的配体结合域(LBD)氨基酸序列与甲壳纲和昆虫纲中已知EcR s的该区域进行比对,结果显示了高度的相似性,构建的系统进化树表明MnEcR与甲壳类物种的同源性要高于昆虫类物种。采用RT-PCR技术对MnEcR转录本在组织中的表达进行检测,结果显示在所有检测的组织中均有表达,并且在眼、头胸甲下的表膜和卵巢中表达尤为突出。接着采用实时RT-PCR技术对MnEcR转录本在胚胎发育各期的表达情况进行分析,结果显示从卵裂期到原肠期的表达水平逐渐上升,从前无节幼体期开始至后无节幼体期表达水平呈显著的增加,并在后无节幼体期时达到最大,随后在前溞状幼体期和溞状幼体期表达水平又显著下降。由此说明MnEcR可能作为与胚胎发生相关的某些蜕皮甾类信号分子的媒介物,并间接说明在胚胎发生中某些蜕皮甾类参与了重要的生理反应。
- 陈辉王文清朱小玲
- 关键词：日本沼虾胚胎发生克隆
- 日本沼虾原始生殖细胞特化遵循先成模式的证据
- 动物原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)特化主要有两种模式:在胚胎发育早期由来自卵母细胞的生殖质(母源决定因子)决定,称为先成模式;或者在胚胎发育后期接受来自周围体细胞的诱导信号分化形成,即后...
- 陈瑛崔峥朱小玲邱高峰
- 日本沼虾原始生殖细胞特化与迁移模式
- 动物原始生殖细胞特化主要有两种方式:在胚胎发育早期由来自卵母细胞的生殖质(母源决定因子)决定,称为先成模式;或者在胚胎发育后期接受来自周围体细胞的诱导信号分化形成,即后成模式.然而十足目甲壳动物原始生殖细胞特化模式至今尚...
- 邱高峰陈瑛崔峥朱小玲
- 日本沼虾DEAD-box家族基因vasa和PL10的克隆及其在卵巢发育过程中的表达比较分析
- vasa和PL10同属于DEAD-box基因家族，具有依赖ATP的RNA解螺旋酶活性。在本次研究中，我们克隆了日本沼虾DEAD-box家族的两个成员，分别为vasa(Mn-vasa)和PL10(Mn-PL10)。其中Mn...
- 朱小玲
- 关键词：日本沼虾卵巢发育原位杂交
- 文献传递
- 日本沼虾不同亚型维甲酸类X受体(RXR)cDNA克隆及序列分析被引量：7
- 2010年
- 采用RT-PCR和RACE末端扩增技术,从日本沼虾(Macrobrachium nipponense)卵巢组织中获得了5种不同构型的RXR基因cDNA序列。结果显示:RXR基因中MnRXRL2含有最长的开放阅读框(open reading frame,ORF),其全长1698 bp,编码337个氨基酸。对比5个不同构型的核苷酸序列,有四个不同的剪接位点,一个发生在5′端A/B区域,产生了3种不同形式的5′端序列;一个在RXR受体结构的D区即铰链区域,使T-盒区长度也有3种形式(VQEERQR/VQVGGIEEERQR/VQVGGIE);两个发生在LBD区,其中一个是在H2-H3螺旋区域,产生了2种不同形式(MnRXRL/MnRXRS),另外一个是在D区产生了中断,缺失了E/F区域(MnRXRM)。将各个序列编码的氨基酸序列与其他物种相比,与甲壳类的同源性较高,表明RXR在进化中较为保守。
- 王文青朱小玲
- 关键词：CDNA序列
- 日本沼虾DEAD-box家族基因vasa和PL10的克隆及其在卵巢发育过程中的表达被引量：5
- 2010年
- vasa和PL10同属于DEAD-box基因家族,具有依赖ATP的RNA解螺旋酶活性。本研究中,克隆了日本沼虾DEAD-box家族的两个成员,分别为vasa(Mnv-asa)和PL10(MnP-L10)。其中Mn-vasa全长2 408bp,包含1 803 bp的开放阅读框,编码601个氨基酸;Mn-PL10全长2 607 bp,包含2 127 bp的开放阅读框,编码709个氨基酸。成体组织的组织检测表明,Mnv-asa仅在性腺中表达,而Mn-PL10在性腺和其他器官中均有表达。Mn-vasa和MnP-L10在卵巢的原位杂交结果显示:Mn-PL10和Mnv-asa都在卵黄发生前期,卵黄发生期的早期和中期表达,而在卵黄积累末期不表达,但Mn-PL10在卵黄发生中期定位于卵母细胞的两端,而Mn-vasa则是均匀的分布在卵母细胞细胞质中。
- 朱小玲
- 关键词：VASA日本沼虾克隆卵子发生
- 日本沼虾dead-boz家族基因vasa和pl10的cdna克隆及其在卵巢和胚胎发育过程中的表达比较分析
- vasa和pl10同属于dead-box基因家族，具有依赖atp的rna解螺旋酶活性，在细胞rna代谢中具有重要作用。vasa基因仅在生殖细胞（包括原始生殖细胞）表达，因而可以作为研究生殖细胞的分子标记，追踪原始生殖细胞...
- 朱小玲
- 关键词：日本沼虾胚胎发育CDNA克隆
- 文献传递网络资源链接
- 日本沼虾胚胎发育的形态及组织学观察被引量：8
- 2012年
- 在解剖镜和显微镜下对日本沼虾胚胎发育进行了形态学和组织学观察。根据日本沼虾胚胎发育过程中的形态特征,将其划分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、前无节幼体期、后无节幼体期、前溞状幼体期以及膜内溞状幼体期。日本沼虾卵裂属于完全卵裂和不完全卵裂之间的过渡类型,无囊胚腔。3对附肢原基在前无节幼体期形成,胚胎在前溞状幼体期腹部开始分节,复眼色素也在前溞状幼体期出现,随后复眼色素区域逐渐增加,到膜内溞状幼体期孵化时复眼结构成熟。腹部分节和复眼色素的出现表明胚胎进入前溞状幼体期。随着胚胎发育的进行,由于附肢的形成和分化,与前几个时期相比,胚胎发育的最后4个时期所持续的时间较长。研究亮点:针对日本沼虾胚胎无节幼体期和溞状幼体期划分目前存在的争议,通过胚胎外部形态与组织切片相结合的观察方法,对其胚胎发育过程进行了再研究,澄清了这两个时期的划分。同时,阐明日本沼虾卵裂类型,并分析了日本沼虾发育时间长的原因。
- 陈瑛朱琴陈辉朱小玲崔峥邱高峰
- 关键词：日本沼虾胚胎发育形态学组织学
- 日本沼虾DEAD-box家族基因vasa和PL10的cDNA克隆及其在卵巢和胚胎发育过程中的表达比较分析
- vasa和PL10同属于DEAD-box基因家族，具有依赖ATP的RNA解螺旋酶活性，在细胞RNA代谢中具有重要作用。vasa基因仅在生殖细胞（包括原始生殖细胞）表达，因而可以作为研究生殖细胞的分子标记，追踪原始生殖细胞...
- 朱小玲
- 关键词：日本沼虾胚胎发育CDNA克隆
