曾君祉
- 作品数：20 被引量：332H指数：7
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 用花粉管途径获得小麦转基因植株被引量：200
- 1993年
- 本文将带GUS标记基因的质粒pBI121用花粉管途径转化普通小麦(T. aestivum L)品种小山3号的小花。从结实的106粒种子中,经点杂交初步筛选,再经Southern分子杂交鉴定,选出5株转基因小麦,转化率为4.7％。同时用荧光法和X-Gluc染色法测试,检测到这些植株中有GUS基因的表达产物β-葡糖苷酸酶(GUS)存在,证明GUS基因已整合到小麦植株中,并能在植物体中表达。
- 曾君祉王东江吴有强张健周文娟朱小平徐乃正
- 关键词：小麦花粉管途径转基因植株
- 构建及表达小麦高分子量容蛋白基因5′端调控序列缺失突变体嵌合质粒被引量：2
- 1997年
- 通过定点突变，在小麦高分子量（ＨＭＷ）谷蛋白基因５′上游调控序列的ＴＡＴＡｂｏｘ与基因翻译起始密码子ＡＴＧ之间，改变三个碱基，产生新的ＢａｍＨⅠ内切酶位点．在调控序列中，选择四个合适的内切酶，对上游序列进行缺失，分离到四个大小分别为２４００、６１０、４４０和１１０ｂｐ的含有不同调控元件的ＨＭＷ谷蛋白基因启动子，与质粒ｐＢＩ１０１．１的报告基因ＧＵＳ重组，构建了四个嵌合质粒ｐＷＧ２４００、ｐＷＧ６００、ｐＷＧ４４０和ｐＷＧ１００．经基因枪、微束激光和ＰＥＧ等方法将ｐＷＧ２４００转化玉米胚乳悬浮细胞，ＧＵＳ基因获得表达．这为进一步研究ＨＭＷ谷蛋白基因的调控机理奠定了基础．
- 鲍时来徐乃正徐乃正曾君祉
- 关键词：小麦缺失突变体
- 胡萝卜组织培养和高效遗传转化体系的建立被引量：15
- 2005年
- 为了建立高效的胡萝卜遗传转化体系,本实验选用3个胡萝卜(Daucuscarotavar.sativa)栽培品种:‘金笋五寸’、‘Carol’和‘改良黑田七寸’,以它们的下胚轴和子叶为外植体,首先建立了高频愈伤诱导体系。在此基础上,以Carol的下胚轴和愈伤组织为受体材料,利用根癌农杆菌LBA4404介导转化质粒pBI121。经X-Gluc染色,证明GUS基因瞬间表达成功,经PCR方法鉴定,证明GUS基因已整合到胡萝卜的染色体中,从而建立了高效的胡萝卜遗传转化体系。
- 张娅曾君祉周志勇陈毓荃黄华樑
- 关键词：胡萝卜GUS基因遗传转化体系根癌农杆菌PCR方法
- 抗乙型脑炎病毒单克隆抗体重链可变区基因在烟草中的表达被引量：9
- 1997年
- 自Hiatt等1989年首次报道了在植物中进行抗体基因的表达研究以来,至今短短数年,这类研究已日益广泛深入。目前,利用转基因植物和植物细胞表达工程抗体基因进行抗体的生产、作物抗病育种以及植物代谢调控和发育的研究已经成为生物技术中的一个新途径,新的生长点。这是免疫学和植物科学在分子水平上有机结合的产物。现有的证据表明,不仅高等植物,单细胞绿藻也可以表达抗体基因。高等植物不仅可以表达简单的单域抗体基因,也可以表达更加复杂的IgA-G杂合抗体基因,并在体内装配出双分子dIgA-G和带分泌组分(SC)的SIgA-G,利用转抗体基因植物进行抗病育种,植物代谢和发育的研究也取得令人瞩目的进展。
- 吴有强熊曦明曾君祉张健王东江黄华梁
- 关键词：单克隆抗体重链可变区基因
- 花粉管通道(或运载)法转化的植株后代遗传表现及转化机理的探讨被引量：80
- 1998年
- 追溯了花粉管通道法的起因和形成以及现在的应用情况 ,说明利用此法可以将报告基因、目的基因等转入植物 ,经Southenblot,Northernblot等法鉴定和对表达产物的检测 ,证明这是一个行之有效的转化方法 .作者实验室对小麦转基因植株后代连续 4代遗传表现的观察证明 ,转入的处源基因可以连续遗传 ,遗传规律与其他转化方法如农干菌法、基因枪法等所得结果相似 .在此基础上 ,作者从植物受精生物学的光学和亚显微结构的观察结果出发 ,探讨了此法的转化机理 ,证明受精前后的卵细胞类似未完全酶解的原生质体 ,因此其转化机理应与原生质体的转化相似 .最后总结了此法的优点 。
- 曾君祉吴有强王东江张健马铮嵘周志勇
- 关键词：转基因植株花粉管通道法作物
- 植物抗体基因工程研究进展被引量：7
- 1998年
- 抗体基因工程与植物生物技术相结合 ,产生了植物抗体 .研究表明 ,工程抗体中不论是全抗体或小分子抗体 ,在植物中表达后都具有与抗原结合的活性 ,即具功能性 ,从而使植物抗体的研究备受人们的关注 .目前主要在下述 3个方面开展研究 :( 1 )医用治疗性抗体 .人们期望利用农业大田规模的方式生产抗体 ,以降低成本 .另外 ,利用植物可多次杂交的特点 ,装配双 (或多 )功能的新的大分子抗体 ,创造新的抗体药物 ;( 2 )植物生理 .通过表达植物激素及微量活性物质的工程抗体 ,封闭原有活性成分 ,研究植物的生长和发育 ;( 3)植物抗病 .将由植物病毒制备出的工程抗体基因转入植物 ,以抵御该病毒的入侵 ,达到防病、治病的目的 .
- 曾君祉付钰俞小淙蒋欣黄华梁
- 关键词：抗体基因植物抗性转基因植物基因工程
- 番杏的组织培养与植株再生被引量：3
- 2002年
- 王文星付钰周志勇刘远声曾君祉
- 关键词：番杏植株再生
- 抗膀胱癌单链抗体基因在烟草中的表达被引量：3
- 1999年
- 以抗膀胱癌单链抗体(scFv)基因为目的基因,构建植物表达载体,转化烟草,研究医用治疗性工程抗体基因在植物中的表达.结果表明,经Southern杂交鉴定出的转基因植株,叶片提取物的蛋白电泳有特异带出现,其分子量约为27 ku,同预期的单链抗体分子量一致,表达量最高的一株,抗体含量占可溶性蛋白的1.4％.竞争性抑制ELISA测定结果显示,该抗体有抗原结合活性.
- 付钰曾君祉黄浩旻林晴蒋欣李志华周志勇黄华梁
- 关键词：抗膀胱癌单链抗体基因转基因烟草基因表达
- 小麦花药培养中小孢子DNA合成的放射自显影研究
- 1988年
- 用放射自显影术研究小麦花药培养中小孢子的雄核发育，发现培养24小时后3H－胸腺嘧啶核苷掺入单核晚期小孢子，2．5天后营养细胞核中有3H－胸腺嘧啶核苷掺入，由A和B途径形成多细胞花粉的过程中，超始几次孢子体分裂，细胞的DNA合成是同步进行的。在多细胞花粉形成时逐渐变为不同步，生殖核的DNA合成不活跃，偶而能被标记上，个别合成DNA的生殖细胞形成类胚柄结构，当培养基中蔗糖浓度低（3％）时，培养早期小孢子内核的DNA合成正常进行，3H－胸腺嘧啶核苷比高糖浓度（9％）更易惨入小孢子，但经1－2次分裂后，核不再分裂，细胞壁不形成，所以3％的糖浓度中，多细胞花粉不能形成，主要不是DNA不能复制，而是细胞分裂和细胞壁的形成受阻所致。
- 曾君祉
- 关键词：放射自显影小孢子DNA合成小麦花药培养雄核发育蔗糖浓度
- 全文增补中
- 抗除草剂转基因小麦愈伤组织的获得
- 1992年
- 小麦是重要的粮食作物,但在植物基因工程的研究中其进展是较缓慢的。除 Lorz.H 在1985年报导获得转基因愈伤组织外,迄今未见有更多的报导.我们在1989—1991年先后将抗除草剂 Basta 的 Bar 基因和萤火虫荧光素酶（Luc）基因转入小麦悬浮细胞系徐州211和（中3×科冬58）F1的原生质体中,获得转基因的多细胞团和愈伤组织,并从（中3×科冬58）F1的转基因抗性愈伤组织中得到根的分化。
- 曾君祉杨书礼吴有强田文忠张健王东江朱小平周文娟
- 关键词：愈伤组织转基因小麦萤火虫荧光素酶基因转入染色体组
