张易
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：大连医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 磁性纳米粒子-抗体复合物分离肝癌线粒体
- 2012年
- 目的利用人肝癌组织,研究磁性纳米粒子-抗体复合物与传统线粒体分离方法之间的差异。方法取人肝癌组织,分别采用磁性纳米粒子-抗体复合物和密度梯度离心方法分离线粒体。扫描电镜观察线粒体形态,Westernblot检测线粒体蛋白标志物,流式细胞仪分析线粒体膜电位变化。结果采用磁性纳米粒子-抗体复合物方法分离得到的肝癌组织线粒体结构完整,无胞核、胞膜等组分的污染,几乎没有过氧化物酶体和溶酶体的污染。经流式细胞仪检测,线粒体膜电位稳定。结论与传统方法相比,磁性纳米粒子-抗体复合物分离方法具备简便易行,分离得到的线粒体结构完整、纯度及活性较高,并且不需要大型设备等优点。
- 唐博梁锐张易金学利赵樑王立明
- 关键词：密度梯度离心线粒体分离纯化
- δ阿片受体激活通过蛋白激酶C途径抑制人肝细胞凋亡被引量：1
- 2012年
- 目的研究δ阿片受体激活对人肝细胞凋亡的抑制作用并探讨其与蛋白激酶C（PKC）途径的关系。方法体外培养人肝细胞，用MTT法检测细胞存活率；AnnexinV—FITC／PI双标记法检测细胞凋亡率；流式细胞仪分析细胞周期；RT—PCR检测PKC的mRNA表达；Westernblot分析PKC、Caspase-3蛋白的表达。结果体外培养的人肝细胞经血清剥夺48h后可发生明显的凋亡。激活δ阿片受体可显著抑制这一现象，细胞凋亡率降低（8．37±0．47）、Caspase-3蛋白表达减少（0．147±0．042）、PKC蛋白表达增加（O．698±0．130）。给予PKC拮抗剂GFl09203X后，δ阿片受体抑制细胞凋亡的作用显著下降（20．66±0．60）。结论激活肝细胞膜上的δ阿片受体对血清剥夺导致的人肝细胞凋亡具有抑制作用，其作用机制与PKC通路相关。
- 唐博张易梁锐隋吉栋金学利袁鹏王立明
- 关键词：阿片受体肝细胞CASPASE-3蛋白激酶C
- RNA干扰沉默EZH2基因增强人肝癌多药耐药Bel／Fu细胞对氟尿嘧啶的敏感性被引量：6
- 2012年
- 目的研究沉默人肝癌多药耐药Bel／Fu细胞的EZH2基因表达是否影响癌细胞对氟尿嘧啶（fluorouracil，5-Fu）的敏感性。方法体外培养肝癌多药耐药Bel／Fu细胞；EZH2siRNA干扰沉默EZH2基因表达；RT—PCR和Westernblot检测干扰后EZH2mRNA和蛋白的表达水平；MTT法检测细胞生长抑制率；AnnexinV—FITC／PI双标记法检测细胞凋亡率；流式细胞仪分析细胞周期；Westernblot检测多药耐药相关蛋白MDR1的表达水平。实验设对照组、5-Fu处理组、EZH2siRNA处理组、5-Fu和EZH2siRNA联合处理组。结果EZI-12siRNA干扰24h后，EZH2mRNA和蛋白的表达水平明显降低。在联合处理组中，MTF法检测其细胞凋亡抑制率为43．17％±3．81％，明显高于其他3组；流式检测联合处理组细胞凋亡率，其细胞凋亡值为30．4％±1．77％，明显高于其他3组。流式检测联合处理组细胞周期，发现联合组G1期细胞的百分比为69．16％±2．31％，明显高于其他3组，S＋G：＋M期细胞的百分比为30．76％±1．29％，明显低于其他3组，细胞周期被阻滞于G1期。检测MDR1在联合组中的表达水平，发现MDR1蛋白的表达水平明显低于其他组别。结论RNA干扰沉默EZH2基因可以增强Bel／Fu细胞对5-Fu的敏感性，其机制可能与MDR1蛋白表达降低有关。
- 张易唐博梁锐刘光普刘晨王立明
- 关键词：RNA干扰多药耐药相关蛋白类
