张庆林
- 作品数：20 被引量：36H指数：5
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 两个大豆MYB转录因子在原核细胞中的高效表达被引量：1
- 2011年
- 大豆(Glycine max)GmMYB12a与GmMYB12B2基因属于典型的植物R2R3-MYB转录因子。为进一步研究两个MYB12转录因子与相应顺式作用元件的相互作用,构建了两基因的原核表达载体,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中实现高效表达。利用PCR技术,将两端带有特异酶切位点的GmMYB12a与GmMYB12B2全长基因亚克隆于原核表达载体pET-28a(+),酶切、测序鉴定确认获得两基因的重组原核表达载体pET-28a-GmMYB12a与pET-28a-GmMYB12B2。然后把重组载体转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达,提取细胞蛋白并采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况。结果表明,成功构建了两基因的原核表达载体,在IPTG浓度为1.2 mmol/L,诱导6 h后,目的蛋白能在Rosetta(DE3)中高效表达。
- 李晓薇苏连泰赵旭翟莹张海军张庆林李景文王庆钰
- 关键词：大豆MYB转录因子原核表达
- 一种大豆中分离的种子特异性启动子及其应用
- 本发明涉及一种大豆中分离的种子特异性启动子序列及其应用，涉及生物技术领域。其核苷酸序列如SEQNo.1所述，该种子特异性启动子序列作为大豆种子特异性启动子的应用。本发明克隆了大豆的硬脂酸-ACP脱饱和酶启动子，研究该启动...
- 王庆钰张庆林赵艳王英李景文李晓薇翟莹张艳程浩
- 文献传递
- 大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子的克隆及其表达活性分析被引量：6
- 2011年
- 以吉豆2号基因组为模板,通过TAILPCR方法,扩增得到大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子片段SACPD-Cp。PLACE在线启动子预测分析表明,该序列中含有多种典型的种子特异性表达序列元件。将SACPD-Cp片段取代pCAMBIA1301质粒中的CaMV35S启动子,构建表达载体pCAM-SACPD-Cp,通过农杆菌介导法在大豆组织中进行瞬时表达,GUS组织化学染色和荧光定量研究其表达特性。结果表明,SACPD-Cp驱动GUS基因在种子中的表达活性是CaMV35S启动子的93.01%;SACPD-Cp启动子与现已知启动子无同源性,仅在大豆种子中检测到GUS活性,而在根、茎和叶组织中均未检测到GUS活性,证实SACPD-Cp是一个新的种子特异性启动子。
- 张庆林赵艳李晓薇翟莹张艳王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆
- 大豆种子特异型启动子SACPD-Cp的克隆和功能分析
- 大豆是重要的粮食作物和经济作物，其籽粒中含有大量不饱和脂肪酸、维生素、微量元素及蛋白质。植物基因工程过程中，以大豆种子作为生物反应器，产生具有工业用途及药用价值的新品种大豆具有重要的意义。实现外源基因在植物中表达调控，首...
- 张庆林
- 关键词：大豆启动子
- 文献传递
- 一种大豆中分离的种子特异性启动子及其应用
- 本发明涉及一种大豆中分离的种子特异性启动子序列及其应用，涉及生物技术领域。其核苷酸序列如SEQ No.1所述，该种子特异性启动子序列作为大豆种子特异性启动子的应用。本发明克隆了大豆的硬脂酸-ACP脱饱和酶启动子，研究该启...
- 王庆钰张庆林赵艳王英李景文李晓薇翟莹张艳程浩
- 大豆球蛋白G1启动子的克隆及表达活性分析被引量：1
- 2011年
- 利用PCR的方法从大豆品种"吉豆2号"基因组DNA中克隆得到大豆球蛋白启动子G1p,长度约为686 bp,PLACE在线启动子预测工具分析表明:序列中含有多种典型的种子特异性表达元件。将克隆得到的G1p取代pCAMBIA1301中的CaMV35S启动子,构建于G1p与GUS基因融合表达的载体pCAM-G1p,通过农杆菌介导的方法在大豆根、茎、叶和种子中进行瞬时表达分析结果显示,仅能在种子中检测到GUS活性,而在根、茎和叶其他组织中基本检测不到GUS活性。说明G1基因上游686 bp片段具有种子特异性启动子的功能,G1p是一个比较高效的种子特异性启动子。
- 张庆林赵艳翟莹李晓薇张艳苏连泰王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆启动子
- 大豆品种吉林35胚尖再生体系的建立及对农杆菌的敏感性被引量：3
- 2012年
- 为建立一个简便、高效、稳定的大豆胚尖再生体系,以吉林35为材料,胚尖为外植体,研究氯气、升汞、酒精3种消毒方法对不定芽出芽率的影响和6-BA对不定芽再生率的影响。同时,为检测吉林35的农杆菌易感性,对平安8、东农42、吉林47和吉林35四个大豆品种进行gus基因组织化学染色。研究表明,酒精消毒法对种子伤害较小,可以保证较高的出芽率。6-BA对不定芽再生作用显著,单独使用或配合IBA使用均可获得较高的再生率。gus基因组织化学染色结果表明吉林35的农杆菌易感性强,明显优于其它品种。吉林35胚尖外植体再生率较高且对农杆菌较敏感,是遗传转化良好的受体材料。
- 闫帆孙昕翟莹雷婷张庆林苏连泰王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆出芽率再生率易感性
- 一种大豆MYB转录因子及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种大豆MYB转录因子及其编码基因与应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的MYB转录因子名称为GmMYB12B2,其氨基酸残基序列如SEQIDNO.2所述；大豆MYB转录因子的编码基因，其核苷酸序列如SEQ...
- 王庆钰李晓薇王英李景文张艳翟莹张庆林钱丹丹张海军闫帆
- 文献传递
- 大豆逆境诱导基因GmPRP的克隆与表达被引量：6
- 2011年
- 通过对大豆吉林32未成熟胚表达谱的分析,利用RT-PCR技术从大豆中克隆了一个新的脯氨酸富集蛋白基因,命名为GmPRP。GmPRP的开放阅读框长396bp,其分子量13.79kD,具有131个氨基酸残基,等电点8.96,其DNA序列无内含子。GmPRP蛋白序列N端含有一段信号肽,中间为脯氨酸富集区,C端为半胱氨酸富集区。该蛋白与四季豆和木豆的PRP同源性最高,具有较近的亲缘关系。GmPRP的683bp启动子序列含有10种与逆境相关的顺式作用元件,分别为ABRE-like、G-box、W-box、GT-1、MYB、MYC、BIHD10s、DPBF、SEBF和WRKY。实时荧光定量PCR分析表明,该基因表达量在大豆的根和叶中最高,在茎和胚中其次,在花中最低,且受干旱、高盐、低温、机械伤害及SA(水杨酸)、ETH(乙烯)、ABA(脱落酸)、MeJA(茉莉酸甲酯)的诱导上调表达。
- 翟莹雷婷婷闫帆黄开猛李晓薇张庆林张海军苏连泰孙昕王英李景文王庆钰
- 关键词：大豆逆境胁迫启动子
- 一种大豆种子特异性启动子及其应用
- 本发明涉及一种大豆种子特异性启动子，属于大豆天冬氨酸蛋白酶基因启动子的序列及其应用。其核苷酸序列如Sequence NO.1所述；制备方法包括下列步骤：soyAP1基因上游远端序列的克隆，对soyAP1基因ATG上游序列...
- 王庆钰赵艳李景文王英钱丹丹程浩张庆林王洪预潘肃
- 文献传递
