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带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔桡骨缺损对降钙素基因相关肽和神经肽Y表达的影响被引量：3: 2008年; 目的研究带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔桡骨缺损对降钙素基因相关肽(CGRP)和神经肽Y(NPY)表达的影响。方法12只新西兰大白兔,每只动物均在左、右侧桡骨中段制作长1.5cm的骨与骨膜缺损,然后植入组织工程骨修复骨缺损,左侧采用带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨(实验组),右侧仅放置组织工程骨(对照组)。于术后3、6、12个月分别处死4只动物,行免疫组化染色检测修复骨段内CGRP和NPY的表达,并用图像分析软件进行半定量分析。结果两组CGRP和NPY的表达量均随时间延长而增高(P<0.05),且各时间点实验组两者的表达均高于对照组(P<0.05)。3个月时两组CGRP阳性表达部位大致相同,多在血管和骨髓处,新生骨边缘和骨膜处也有少量阳性表达,而6和12个月时以骨膜处和血管周围最多。在各时间点两组的NPY阳性表达部位无明显差异,在灶状骨髓的血管周围表达最多,新生骨质边缘及骨膜处也有少量表达。结论与单纯组织工程骨植入相比,采用带血管蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复兔骨缺损在术后12个月内可以明显促进CGRP和NPY的表达。; 崔建德裴国献金丹江汕戴金良黄爱文王秋实赵培冉梁双武; 关键词：骨代用品带血管蒂筋膜瓣降钙素基因相关肽

TNFR Ⅰ-IgGFc融合基因重组腺病毒表达载体的构建及其在骨髓基质干细胞的表达: 2007年; 目的构建携带人肿瘤坏死因子受体Ⅰ-胞外区和IgGFc融合基因的重组腺病毒载体（Ad—TNFR Ⅰ-IgGFc），体外转染兔骨髓基质干细胞（BMSCs），探讨转TNFR Ⅰ-IgGFc基因的BMSCs治疗类风湿关节炎的可行性。方法将TNFR Ⅰ-I如Fc基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316，与辅助质粒pBHGlox△E1，3Cre共转染HEK293细胞，重组产生Ad—TNFR Ⅰ-IgGFc，PCR鉴定毒种正确后，进行扩增、纯化和滴度测定，转染培养至第2代BMSCs，利用RT—PCR、原位杂交、免疫组化方法，检测转染后细胞中TNFR Ⅰ-IgGFc的转录和表达。结果成功构建了Ad-TNFR Ⅰ-IgGFc，感染性滴度达3×10^10 TCID50／mL，转染后BMSCs在mRNA和蛋白水平均有TNFR Ⅰ-IgGFc表达。结论构建的Ad—TNFR Ⅰ-IgGFc可有效转染BMSCs，并在其中高效表达，为将表达TNFR Ⅰ-IgGFc基因的BMSCs用于类风湿关节炎治疗的实验研究提供了基础。; 温茜马骊金丹崔建德罗微王小宁; 关键词：肿瘤坏死因子腺病毒载体骨髓基质干细胞

感觉、运动神经匀浆对兔成骨细胞增殖与成骨功能的影响被引量：5: 2008年; 目的研究兔周围感觉、运动神经匀浆对兔骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞增殖与成骨能力的影响,探讨周围神经影响成骨的可能原因。方法提取大隐神经、坐骨神经肌支分别作为感觉、运动神经组织,制备匀浆。体外培养兔骨髓间充质干细胞,常规成骨诱导后鉴定备用。以含感觉、运动神经匀浆的诱导培养基、成骨诱导培养基、无地米诱导培养基及对照培养基作用于干细胞来源的成骨细胞,观察其增殖、分化及矿化情况。结果感觉神经组较其他各组显著促进成骨细胞增殖(P<0.01),成骨诱导组及对照组抑制细胞增殖(P≤0.001);感觉神经匀浆显著促进成骨细胞总蛋白及碱性磷酸酶(ALP)的合成(P<0.05),成骨诱导组及对照组ALP蛋白比活性显著高于运动神经组及无地米组(P<0.05);感觉神经组、成骨诱导组及对照组茜素红结合量显著高于无地米组及运动神经组(P<0.001),前三组之间无显著性差异。结论感觉神经成分能显著促进成骨细胞的增殖、分化与矿化,运动神经成分未见促成骨作用。; 王秋实裴国献江汕赵培冉梁双武戴金良崔建德; 关键词：隐神经坐骨神经成骨细胞增殖感觉神经运动神经

血管化组织工程骨修复兔骨缺损对缺损处CGRP和NPY表达影响: 研究目的：创伤与肿瘤等疾病所致的骨缺损修复一直是十分棘手的难题，骨组织工程技术的发展为解决此类问题开辟了一条途径，但是如何构造大块的组织工程骨、促进其在体内存活仍是一道难题。充分的血液供应和完善的神经支配是保...; 崔建德; 关键词：骨修复骨缺损; 文献传递

单纯血管束、神经束分别植入组织工程骨修复兔骨缺损对降钙素基因相关肽和神经肽Y表达的影响被引量：7: 2008年; 目的比较单纯血管、神经束分别植入组织工程骨修复兔骨缺损对神经肽降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide，CGRP）和神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）表达影响。方法36只新西兰大白兔，随机平均分为3组：A组为组织工程骨＋股血管束植入，B组为组织工程骨＋感觉神经束植入，C组为单纯组织工程骨。每只动物均在右侧股骨制作长1．5cm的段缺性骨与骨膜缺损，钢板固定后分别用以上方法修复大段骨缺损。术后3、6、12个月行免疫组化染色检测修复骨段内的CGRP和NPY的表达，并采用图像分析软件行半定量分析。结果CGRP和NPY的表达量在A、B、C3组均随时间推移而增多（P=0．000），在3个月时A组较B组多（P=0．000），但在6个月和12个月时A组和B组的表达量无明显差异（P〉0．05）。A、B两组在3、6、12个月时的表达量均较C组多（P=0．000）。结论与单纯神经束植入组相比，单纯血管束植入组织工程骨修复兔骨缺损在术后3个月可以明显促进CGRP和NPY表达，但后期两组对神经肽表达的影响作用无明显差异。; 崔建德裴国献江汕戴金良刘勇姚旺祥黄爱文王秋实赵培冉梁双武; 关键词：血管束降钙素基因相关肽

神经植入对大段组织工程骨成骨效果的一年观察: 2008年; 目的观察在组织工程骨内植入神经束后大段组织工程骨的长期成骨效果。方法新西兰大白兔64只，随机分为四组：A组，单纯组织工程骨组；B组，运动神经束植入组（股神经肌支）；C组，感觉神经束植入组（隐神经）；D组，感觉、运动神经束联合植入组。每只动物均在左侧股骨制作长1．5cm的段缺性骨与骨膜缺损，钢板固定后在骨缺损处分别植入四种方法制备的组织工程骨。术后1、3、6、12个月行大体观察、X线和组织学定量观察成骨情况。结果术后1、3、6个月时，在组织工程骨内植入感觉神经或联合植入两种神经后，比单纯组织工程骨和运动神经束植入的修复效果均有明显提高。术后12个月时，各组骨再生情况基本一致，但新生骨组织出现一定程度的吸收，其外观较正常股骨细，新生骨组织与兔股骨牢固愈合，并开始塑形且出现髓腔再通。结论在组织工程骨内植入感觉神经可促进成骨，而植入运动神经未见促进作用；组织工程骨可以修复兔大段骨缺损；该实验新生骨组织的吸收可能与模型的制作方法有关。; 戴金良裴国献刘勇崔建德王秋实姚旺祥江汕赵培冉梁双武; 关键词：神经化成骨

硅胶膜管联合组织工程骨修复兔桡骨缺损实验研究被引量：1: 2008年; 目的:探讨硅胶膜复合组织工程骨修复兔桡骨缺损的效果。方法:在新西兰大白兔左、右侧桡骨中段制作长1.5cm的骨与骨膜缺损,左侧采用硅胶膜包裹组织工程骨修复缺损为实验组,右侧单纯用组织工程骨修复缺损为对照组;术后3、6、9个月通过肉眼观察,组织学观察和生物力学检测,评价硅胶膜复合组织工程骨修复兔桡骨缺损的效果。结果:术后3个月实验组可见局部成熟的成骨区域,优于对照组;实验组6个月成熟成骨区域增大,可见明显血管;实验组9个月成骨区域基本上都是成熟胶原纤维,且结构排列规则,血管明显;生物力学检测发现实验组的压缩刚度、抗扭转刚度、三点弯曲最大载荷、抗折弯刚度都明显优于对照组。结论:硅胶膜包裹组织工程骨修复骨缺损效果良好,不但能促进骨组织的生长和成熟,并且能明显提高骨组织的力学性能;硅胶膜除了可以限制纤维组织的长入,还可以引导血管的长入和其他营养物质聚集在组织工程骨内,很好地发挥屏障和引导作用。; 崔建德裴国献江汕戴金良王秋实赵培冉梁双武; 关键词：骨缺损硅胶膜组织工程骨引导性组织再生

重组腺病毒Ad-HGF转染骨髓基质干细胞及其表达的实验研究被引量：7: 2007年; 目的构建人肝细胞生长因子(HGF)重组腺病毒表达载体,体外转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),检测HGF基因表达,探讨转HGF基因的BMSCs治疗股骨头缺血性坏死(ANFH)的可行性。方法利用RT-PCR方法,从共表达人HGF-Met的NIH3T3-H0细胞株中扩增人HGFcDNA,插入腺病毒穿梭质粒pDC316,与辅助质粒共转染HEK293细胞,重组产生重组腺病毒Ad-HGF,PCR鉴定毒种正确后,在293细胞中扩增、纯化,TCID50法测定感染性滴度,然后感染BMSCs,RT-PCR、原位杂交、免疫组化检测转染后细胞中HGF的转录和表达。结果成功制备了Ad-HGF,感染性滴度为2.6×1010TCID50/ml,转染后的BMSCs在mRNA和蛋白水平均有HGF表达。结论获得高表达人HGF基因的BMSCs,为其用于早期ANFH的治疗奠定了基础。; 温茜马骊金丹崔建德罗微王小宁; 关键词：腺病毒载体骨髓基质干细胞生物治疗

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