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重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅲ.ELISA试剂盒的制造及保存期试验: 对抗原包被板、酶标二抗、阳性血清、阴性血清和试剂盒的保存条件进行摸索,并组装成试剂盒,试剂盒保存12个月结果稳定.本研究还对影响试剂盒生产和操作的几个问题进行了探索,为该试剂盒的进一步开发和商品化奠定了较好的基础。; 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳; 关键词：猪繁殖呼吸综合征 ELISA试剂盒重组N蛋白抗原检测保存期试验; 文献传递

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅱ.试剂盒阴阳性临界值的测定及其与IDEXX公司试剂盒的比较被引量：7: 2006年; 对临床上采集的899份猪血清样本,用以纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接EL ISA进行检测,运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律,并和国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测,结果表明,2种方法的符合率为91.73%。利用TG-ROC软件确定了自制的EL ISA酶标板(NP-EL ISA)的临界值,并标定试剂盒的特异性和敏感性均为92.6%。EL ISA的结果判定标准是:当以血清样本L为标准参考阳性血清时,样品与阳性血清的比值(S/P)小于或等于0.4为阴性;S/P在0.4与0.5之间为可疑;S/P大于或等于0.5为阳性。与IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒对临床样品的检测结果进行比较后,初步判定所建立的EL ISA之所以出现较多的假阴性,可能是目前临床上出现了PRRSV欧洲型所致。; 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳许立华陈溥言; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒试剂盒重组N蛋白

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅳ.与IDEXXELISA试剂盒及Westernblot的比较被引量：7: 2006年; 利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法并组装成试剂盒,将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的试剂盒及Western-blot进行了符合率试验。试验结果表明,所研制的试剂盒与Westernblot的符合率达97.67%以上。对460份临床血清分别用自制的试剂盒和IDEXX公司生产的试剂盒进行检测,其中有37份不相符合,用Westernblot对这37份血清进行验证,有35份血清检测结果与自制的试剂盒检测结果一致。由此表明,自行研制的试剂盒,其特异性和敏感性均能满足目前临床上该疫病的流行病学分析或免疫抗体检测。; 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 BLOT

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活苗的研制及免疫效果观察被引量：2: 2005年; 用分离鉴定的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)强毒株研制成油乳剂灭活疫苗。对其物理性状、安全性能等指标进行检查,该制品符合新生物制品关于成品检验的要求。用该疫苗对妊娠母猪进行田间试验免疫,妊娠母猪血清抗体滴度于二免后2 8dS/P值达到0 .9以上。统计了378头免疫母猪和2 4头非免疫猪的临床表现和产仔情况,免疫猪比非免疫猪平均每窝多产活仔0 .7头,产活仔率分别为98.3%和92 .5 %。; 张华徐天刚李洪山徐培莲宋芳王君玮; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗免疫效果

猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒Ⅱ型混合感染的诊断被引量：4: 2006年; 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在我国规模化猪场的传播与蔓延愈演愈烈,给养猪企业、尤其是给种猪场带来了难以估算的损失。其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒,主要引起母猪繁殖障碍和各日龄猪呼吸疾病。; 王君玮孙承英赵永刚徐伟李开福徐天刚宋芳任炜杰; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征 SYNDROME 规模化养猪场临床症状病理剖检

猪繁殖与呼吸综合征的诊断被引量：1: 2004年; 2002年10月胶东某规模化猪场发生以娃振母猪流产、产死胎,仔猪出现以呼吸道症状为主的疾病,经流行病学分析、症状观察、病理剖检、病毒分离及ELISA、PCR检测确诊为猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS).现将该场PRRS的诊治情况报告如下.; 王君玮徐天刚许立华张新云吴延功王志亮赵建梅宋芳; 关键词：繁殖与呼吸综合征发病特点临床症状剖检病变

山东省部分地区猪繁殖与呼吸综合征的血清学调查被引量：30: 2004年; 应用ELISA方法对山东省部分地区猪群的猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)流行情况进行初步的血清学调查。结果表明 ,在调查的 61个猪场中 ,PRRS阳性猪场 46个 ,占 75 4%。检测血清 2 1 70份 ,其中阳性 1 4 0 6份 ,阳性率 64 8%。分别用 2种不同ELISA试剂盒检测同组血清样品 ,结果显示本诊断中心建立的PRRSELISA试剂盒与IDEXX公司生产的ELISA试剂盒的符合率为 94 3 %。; 王君玮徐天刚吴延功王志亮宋芳; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征血清学 ELISA PRRS 抗体

猪生殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的制备及安全性试验被引量：7: 2005年; 用本中心分离鉴定的猪生殖与呼吸综合征 (PRRS)强毒株接种Marc-145细胞,制备病毒抗原液,毒价不低于10-7.0TCID50/0.1mL。经一定浓度的甲醛溶液灭活后与油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗3批。经对该制品的安全性能测定 ,结果表明该品对初生仔猪、断奶仔猪及妊娠母猪3倍剂量注射,均未出现不良反应,安全性良好 ;对母猪的繁殖性能不产生影响。; 王君玮刘国庆丁德鹅徐天刚宋芳徐培莲王志亮吴延功; 关键词：生殖呼吸综合征油乳剂灭活疫苗安全性试验

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗免疫效力试验被引量：3: 2006年; 王君玮盖曰忠徐天刚宋芳徐培莲王志亮丁德鹅; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗免疫效力试验 PRRSV感染弱毒苗养殖场

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宋芳