宋彩霞
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
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- 发文基金：海南省自然科学基金四川省教育厅科学研究项目更多>>
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- RNA干扰Slug基因表达抑制胰腺癌侵袭转移的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移的抑制作用。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入PANC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。观察siRNA-Slug对Slug表达的沉默及对胰腺癌细胞体外侵袭转移的抑制作用,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA的表达水平,Western-blot测定蛋白表达水平。建立不同组裸鼠原位胰腺癌模型,观察Slug沉默对裸鼠原位胰腺癌转移的抑制作用。结果pSlug-siRNA组细胞内Slug mRNA及Slug蛋白的表达被有效沉默。重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、空白对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(35±10)、(228±71)、(219±72)个/高倍镜(×200),pSlug-siRNA组明显低于空白对照组和pNeg-siRNA组,差异分别有统计学意义(P<0.05)。裸鼠体内实验表明,pSlug-siRNA组的肿瘤转移结节、肝脏转移结节、腹水明显减少。结论RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌细胞侵袭转移有抑制作用,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。
- 柳湘洁宋彩霞张群声王启全
- 关键词：胰腺肿瘤SLUGRNA干扰转染肿瘤转移
- 外伤性肝破裂腹腔镜修补术致气胸1例教训被引量：1
- 2009年
- 张克君孙传东张炳远赵伟张泽米宋彩霞
- 关键词：外伤性肝破裂修补术腹腔镜上腹部CT检查气胸上腹部疼痛胃内容物
- NF-κB和PUMA与重症胰腺炎致急性肺损伤的关系以及PDTC的干预作用被引量：9
- 2010年
- 目的 探讨NF-κB（核因子-κB）与PUMA（P53正向凋亡调节因子）表达在大鼠重症急性胰腺炎致急性肺损伤（SAP-ALI）的作用及脯氨酸二硫代氨基甲酸酯（PDTC）的影响.方法 SD大鼠随机（随机数字法）分为假手术组、SAP-ALI组、PDTC组,每组18只.各组再按6,12,24 h时间点分为三个亚组,每个亚组6只.假手术组开腹后翻动胰腺数次;SAP-ALI组采用胰胆管逆行注入5%牛磺胆酸钠（1 mL/kg）诱导SAP-ALI模型;PDTC组在SAP-ALI组的基础于术前1h给予PDTC（15 mg/kg）,各组按时间点处死大鼠.观察胰腺和肺脏病理变化.Western-blot法检测肺组织NF-κB p65,PUMA表达,采用RT-PCR法测量各组bax,bcl-2和Caspase-3 mRNA,通过荧光检测试剂检测Caspase-3活性.投射电镜下观察各组肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构的变化,TUNEL检测肺泡上皮细胞的凋亡指数.结果 成功建立了大鼠SAP-ALI模型,Western-blotting结果显示,SAP-ALI组肺组织NF-κB p65和PUMA蛋白表达在6h后增加,24 h增加最明显,NF-κB p65与PUMA显著正相关;SAP-ALI组肺组织bax mRNA和Caspase-3mRNA在6 h后增加,24 h增加最明显,bcl-2 mRNA在6 h后下降,24 h下降最明显,Caspase-3活性在24h增加最明显.PDTC组肺组织NF-κB p65和PUMA蛋白表达明显降低;bax mRNA和caspase-3 mRNA表达及Caspase-3活性明显降低,bcl-2 mRNA表达明显增加.假手术组肺组织各组蛋白的表达与PDTC组比无显著改变.PDTC组肺损伤病理组织学评分在术后各时间点较SAP-ALI组显著降低,PDTC组细胞凋亡指数较SAP-ALI组明显降低.SAP-ALI组24h市泡Ⅱ型上皮细胞微绒毛消失.结论 NF-κB活化激活PUMA与肺泡上皮细胞凋亡有关,PDTC通过抑制NF-κB活化,下调NF-κB活化后引起的PUMA表达,抑制肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡,减轻SAP-ALI.
- 张克君宋彩霞焦学龙刘世松孙传东李春伟王培戈周长勇
- 关键词：重症胰腺炎急性肺损伤核因子-ΚB
- 丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时NF-κB活化和PUMA表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注(IR)时核因子(NF)-κB活化和P53正向凋亡调控因子(PUMA)、Bcl-2和Caspase-3基因表达的影响,并探讨其脑保护的机制。方法 90只雄性大鼠建立局灶性脑IR模型,随机分为IR组、丙泊酚组(P组)和假手术组(C组)。缺血前腹腔注射丙泊酚100mg/kg,各组再灌注时间为2、3、6、12、24、72h。蛋白质印迹法检测不同时间点的NF-κB、PUMA、Bcl-2和Caspase-3表达,凝胶电泳迁移率(EMSA)检测12、24h的NF-κB和PUMA活性;检测不同时间点Caspase-3活性;DNALader观察细胞凋亡。结果与C组比较,IR组缺血侧大脑皮层于再灌注2～24hNF-κB、PUMA表达逐渐升高,72h开始下降,Bcl-2在灌注6h内表达降低,以后逐渐升高,而Caspase-3在灌注2～24h内逐渐升高,72h开始下降。与IR组比较,P组在灌注后的各个时间点NF-κB、PUMA表达明显减少,而Bcl-2表达逐渐升高,Caspase-3逐渐降低。IR组Caspase-3的活性在24h最高,72h开始降低。在P组,Caspase-3蛋白活性升高不显著。DNALader发现,IR组6、12、24、72h见明显的DNA片段,而在P组未见明显的DNA片段。结论丙泊酚抑制NF-κB活化引起的PUMA上调,后者下调Caspase-3和上调Bcl-2,从而抑制神经组织细胞凋亡。
- 潘炳德宋彩霞杨堂斗陈彦福冯春声刘波平杨春燕
- 关键词：丙泊酚脑缺血再灌注损伤核因子-ΚB
- 靶向GLI1基因增强卵巢癌细胞化疗敏感性的实验研究
- 2010年
- 目的探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)影响卵巢癌耐药细胞株GLI1基因的表达,促进凋亡并逆转其顺铂耐药的可行性。方法体外构建GLI1小发夹状RNA(shRNA)的表达质粒,脂质体法介导将其转染入SKOV3/DDP细胞。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GLI1 mRNA的表达;使用免疫细胞化学法(ICC)检测GLI1蛋白的表达;使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定各组细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响。结果 GLI1 shRNA转染组细胞GLI1 mRNA的表达与其他两组相比明显减弱(P<0.01),GLI1蛋白表达明显下调(P<0.01);顺铂敏感性比正常对照组提高了约2.5倍;流式细胞仪检测结果显示:顺铂作用24 h后,特异性转染组细胞周期分布发生明显改变,G_0/G_1期细胞比例增多,而S期细胞比例减少,凋亡率显著升高。结论针对GLI1合成的siRNA能够有效地抑制GLI1 mRNA和蛋白的表达,促进卵巢癌耐药细胞凋亡并能恢复其对顺铂的敏感性。应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的耐药性。
- 巩向玲宋彩霞刘世松王平
- 关键词：卵巢癌RNA干扰逆转耐药
- Slug基因表达抑制对体外胰腺癌细胞生物行为的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移、血管生成和生长的影响。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入AS-PC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。采用RT-PCR技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA表达水平,Western-blot测定Slug蛋白表达水平。观察Slug沉默后及对体外胰腺癌细胞侵袭作用的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验及CAM移植瘤实验检测Slug沉默对血管生成的影响,MTT比色法检测细胞存活率。结果pSlug-siRNA组细胞内Slug表达被有效沉默。重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(38±6.56)、(164±15.39)、(159.67±8.96)个/高倍镜(×200),差异分别有统计学意义(P<0.05)。体外实验表明,AsPC-1细胞内Slug表达沉默后,血管密度明显降低,血管生成被抑制,细胞存活率明显降低。结论RNA干扰Slug基因抑制胰腺癌细胞生长、侵袭转移和血管生成,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。
- 陈彦福宋彩霞王全欧树安严明总
- 关键词：胰腺癌SLUG血管生成
