孔波 作品数:10 被引量:6 H指数:2 供职机构: 东南大学附属中大医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
急性坏死性胰腺炎肺损伤时RegⅠ基因表达 被引量:2 2008年 目的研究RegⅠ在急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺组织中的表达及其与ANP肺损伤的关系。方法健康成年SD大鼠随机分为假手术对照(C)组(30只)和ANP组(60只)。C组开腹后只翻动胰腺,ANP组大鼠胰胆管恒速逆行注射3%牛磺胆酸钠,制成ANP大鼠模型。观察胰腺和肺组织的病理改变及肺组织湿/干重比的改变,应用RT-PCR检测胰腺、肺组织中RegⅠmRNA的表达水平,并研究所观察指标与RegⅠ基因表达的相关性。结果与C组相比,ANP组肺组织中RegⅠ的mRNA水平过度表达。RegⅠ的表达水平分别与肺组织的病理学评分(r=0.5212,P<0.01)和肺组织湿/干重比(r=0.4797,P<0.01)呈正相关。结论ANP时大鼠肺组织中RegⅠmRNA的表达水平明显上调;RegⅠmRNA的表达与ANP所致的急性肺损伤的严重程度相关。 胡浩霖 石欣 张齐 孔波关键词:急性坏死性胰腺炎 肺损伤 原发性胰腺淋巴瘤1例 2007年 患者,男性,61岁,因“上腹部隐痛不适两周”入院。体检:皮肤粘膜无黄染,全身浅表淋巴结均米触及肿大,腹软,剑突下可触及一肿块.质稍软,有轻压痛,不易推动,边界尚清。实验室检查:甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA—199)均在正常范周以内。B超:肝左叶与胰腺之间见分叶状实质性团块.腹腔动脉及肝总动脉亦被包裹在闭块内。 石欣 孔波 高乃荣 郭庆明关键词:原发性胰腺淋巴瘤 上腹部隐痛 浅表淋巴结 皮肤粘膜 甲胎蛋白 糖类抗原 regⅠ基因表达与肠黏膜损害在急性坏死性胰腺炎中的相关性 2008年 目的:研究regⅠ在急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)大鼠肠组织中的表达,探讨该基因的表达与ANP肠黏膜损害的关系.方法:Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术对照组(n=40)和ANP组(n=80).对照组开腹后只翻动胰腺,ANP组大鼠胰胆管恒速逆行注射30g/L牛磺胆酸钠,制成ANP大鼠模型.观察胰腺和小肠的病理改变及小肠黏膜通透性的改变,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺、小肠组织中regⅠ mRNA的表达水平,并研究所观察指标与regⅠ基因表达的相关性.结果:ANP组大鼠术后12,24和36h肠黏膜组织病理学评分明显高于对照组(1.8±0.89 vs 0.2±0.42,3.3±1.17 vs 0.3±0.48,4.2±0.95 vs 0.3±0.48,均P<0.01);ANP组大鼠[99mTc]-DTPA排泄率术后12,24和36h较对照组均明显增加(34.70%±4.03% vs 4.62%±1.17%,54.63%±6.94% vs 6.14%±1.42%,66.83%±7.56% vs 7.48%±0.92%,均P<0.01);与对照组相比,ANP组大鼠小肠组织中regⅠ的mRNA水平过度表达,regⅠ的表达水平分别与肠黏膜病理学评分和肠黏膜通透性指数正相关(r=0.6728,0.7092,均P<0.01).结论:ANP时大鼠小肠组织中regⅠ mRNA的表达水平明显上调且与ANP所致肠黏膜损害的严重程度相关. 胡浩霖 石欣 张齐 孔波关键词:急性坏死性胰腺炎 逆转录聚合酶链反应 RASAL1基因在胃癌组织中的表达及临床病理意义 被引量:1 2011年 [目的]研究RASAL1基因及蛋白在胃癌组织中的表达,并分析其与胃癌临床病理特征的关系,初步探讨RASAL1在胃癌发生发展中的意义。[方法]收集50例胃癌及正常胃组织标本,采用RT-PCR方法检测组织中RASAL1mRNA表达,WesternBlot及免疫组织化学方法检测RASAL1蛋白的表达;并结合胃癌的临床病理资料作相关统计学分析。[结果]①RT-PCR检测显示胃癌组织中RASAL1mRNA表达的平均吸光度值为0.51±0.15,而正常胃组织的平均吸光度值为0.64±0.12,胃癌组织的RASAL1mRNA显著低于正常胃组织(P=0.0004)。②WesternBlot分析表明,胃癌组织RASAL1蛋白表达的平均吸光度值为0.52±0.22,而正常胃组织的平均吸光度值为0.68±0.23,前者显著低于后者(P=0.003)。③免疫组化结果表明,RASAL1蛋白主要在胞浆中表达;50例胃癌组织中RASAL1蛋白的表达分别为12例(-)、23例(+)、13例(++)、2例(+++);而在50例正常胃组织中分别为16例(++)、34例(+++);胃癌组织中RASAL1表达较正常胃组织降低(P<0.05)。④RASAL1蛋白的表达与胃癌患者性别、年龄无显著相关,而与肿瘤大小、分化程度、侵袭深度、淋巴转移及TNM分期相关,随病情进展呈下降趋势。[结论]RASAL1基因在胃癌组织中表达明显下调,且与分化程度及进展阶段相关,提示其可能参与了胃癌的发生发展过程,是胃癌的抑癌基因之一。 张慧 陈洪 杨晴 孔波 杨晓薇 王智 刘洋关键词:胃癌 抑癌基因 慢病毒导入的CDC25B2 siRNA对胰腺癌细胞CFPAC-1生物学行为的影响 2008年 目的利用已构建成功的、在人胰腺癌细胞株CFPAC-1中稳定抑制细胞分裂周期25同源体B(CDC2582)的重组慢病毒,建立CDC2582表达降低的细胞株,以研究该基因的作用。方法将产生CDC2582小干扰RNA(siRNA)分子的、携带绿色荧光蛋白的重组慢病毒感染CFPAC-1细胞后,用流式细胞仪筛选稳定表达的细胞株。应用RT—PCR和Westernblot分别对细胞中CDC2582的mRNA和蛋白表达水平进行分析。应用MTT法、流式细胞仪、平板克隆形成和Transwell小室法分别检测其对细胞增殖、周期、细胞克隆形成能力和迁移侵袭能力的影响。结果CDC2582 siRNA显著下调CFPAC-1细胞中CDC2582的表达,所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,CFPAC-1细胞的增殖能力、克隆形成能力以及迁移侵袭能力显著增强,细胞周期无明显改变。结论CDC2582基因可显著影响胰腺癌CFPAC-1细胞的增殖、克隆形成和迁移能力,为利用CDC2582所介导的信号通路进行肿瘤基因治疗提供了实验依据。 杨正平 石欣 肖志 张齐 孔波 严伟 葛梓关键词:慢病毒属 CDC25B_3基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 2009年 目的构建CDC25B3基因RNAi慢病毒载体。方法合成CDC25B3基因RNAi有效靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与双酶切后的pGCL-GFP载体(含有U6启动子和GFP基因)连接产生LV-shCDC25B3慢病毒载体,挑选阳性克隆经PCR和测序鉴定。用脂质体转染法将LV-shCDC25B3、pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞,产生慢病毒,以293T细胞绿色荧光蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果PCR和测序证实,成功地构建了CDC25B3shRNA的慢病毒载体LV-shCDC25B3。浓缩病毒悬液的滴度为1×108TU/ml。结论成功构建人CDC25B3基因RNAi慢病毒载体。 张齐 范健 石欣 孔波 肖志 杨正平关键词:RNA干扰 CDC25B 胰腺癌 慢病毒 CDC25B1对人胰腺癌细胞株Patu8988的生物学行为的影响 2008年 目的探讨CDC25B1基因在人胰腺癌细胞株Patu8988中的表达情况,并将真核表达重组载体pcDNA-CDC25B1转染至细胞中,观察CDC25B1基因对细胞生物学行为的影响,以了解它在细胞周期及胰腺肿瘤细胞恶性转化方面的作用,为研究胰腺癌的发病机制与治疗提供理论依据。方法利用Lipofectamine2000将CDC25B1转染至人胰腺癌细胞株Patu8988中,通过RT-PCR和Westernblot在mRNA和蛋白水平验证质粒转染成功,通过MTT实验、侵袭实验和细胞周期检测,观察CDC25B1对细胞生物学行为的影响。结果RT-PCR发现在胰腺癌细胞株Patu8988和转染空质粒的细胞株中,CDC25B1在mRNA水平表达很弱;转染pcDNA-CDC25B1组中CDC25B1高表达。Westernblot发现在胰腺癌细胞株Patu8988中,CDC25B蛋白有少量表达;转染pcDNA-CDC25B1组CDC25B蛋白高表达。MTT实验显示,转染pcDNA-CDC25B1组的细胞生长在72h受到明显抑制(P(0.05)。侵袭实验显示,转染pcDNA-CDC25B1的细胞其穿透Matrigel胶的能力明显增强(P(0.05)。流式细胞计量术显示,转染了pcDNA-CDC25B1组中,G1期的细胞明显增多(P(0.05);同时转染了pcDNA-CDC25B1组中,G2期的细胞明显减少,与未处理组比较有统计学意义(P(0.05)。结论在胰腺癌细胞株Patu8988中的CDC25B1转录水平很弱,存在少量CDC25B蛋白表达。转染的CDC25B1基因提高CDC25B1蛋白的表达,使细胞停滞在G1期,对细胞的生长有抑制作用,但能够增强细胞的侵袭能力;CDC25B1可能不是通过单一的调控细胞周期而实现其对细胞的影响,还存在其它多种途径。 肖志 石欣 杨正平 张齐 孔波 严伟 葛梓关键词:基因转染 原发性胰腺淋巴瘤的诊治(附1例临床病理分析) <正>非霍奇金淋巴瘤结外表现复杂,胰腺淋巴瘤为其结外表现之一,可为全身淋巴瘤的一部分,如胰腺周围和腹膜后肿大淋巴结侵犯胰腺实质,也可为原发于胰腺或原发于胰腺周围淋巴结累及胰腺为首发表现,称为原发胰腺淋巴瘤。PPL 非常罕... 高乃荣 石欣 孔波 郭庆明文献传递 Ras蛋白激活物类似物-1基因在胃癌细胞株中的表达及生物学意义 被引量:2 2011年 目的:研究Ras蛋白激活物类似物-1基因(Ras protein activator like-1,RASAL1)在正常胃黏膜上皮细胞、胃癌细胞株中的表达情况及其生物学意义。方法:采用RT-PCR和Western blot分别检测高分化胃腺癌细胞株MKN-28、中分化胃腺癌细胞株SGC-7901、低分化胃腺癌细胞株BGC-823和正常胃黏膜上皮细胞株GES-1中RASAL1基因在mRNA水平和蛋白水平的表达,应用基因测序法检测上述3种胃癌细胞株中K-Ras基因第一外显子第12密码子点突变情况,并分析其意义。结果:RT-PCR和Westernblot检测结果显示,与正常胃黏膜上皮细胞相比,在3种不同分化胃腺癌细胞株中,RASAL1基因的表达在mRNA水平和蛋白水平均下调(P<0.05),分化程度越低表达下调越明显;测序结果表明3种胃腺癌细胞株中均未发现K-Ras基因第一外显子第12密码子点突变。结论:RASAL1基因在含野生型K-Ras的胃癌细胞中呈低表达状态,其表达水平与胃癌的恶性程度有一定的关系。 杨晓薇 陈洪 孔波 张慧 王智 刘洋关键词:胃癌细胞株 基因表达 点突变 CDC25B与肿瘤相关的研究进展 被引量:2 2007年 孔波 石欣关键词:肿瘤 细胞周期