- p38MAPK在糖尿病小鼠肾组织中的表达和活化
- 目的研究p38丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)在小鼠糖尿病肾病肾组织中的表达和活化及可能的作用。方法采用STZ腹腔注射诱导小鼠糖尿病模型,用免疫组织化学方法检测糖尿病小鼠肾组织磷酸化p38MAPK的定位和表达以及TGFβ...
- 祝胜郎余学清孙辽娄宁郑勋华董秀清
- 文献传递
- 依那普利对梗阻性肾病大鼠肾组织p38丝裂素激活蛋白激酶活性的影响被引量：4
- 2004年
- 目的研究血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)依那普利对梗阻性肾病模型肾组织p38丝裂素激活蛋白激酶(MAPK)活性的影响。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)模型,治疗组从造模前24h至造模后28d以依那普利10mg·kg-1·d-1灌胃,另设假手术组作正常对照。分别于造模后1h,3h,6h,12h,1d,3d,5d,7d,14d,21d及28d取肾组织,应用免疫沉淀结合特异性底物磷酸化法测定肾组织p38MAPK活性;免疫组织化学法检测磷酸化p38MAPK在肾组织中的表达和定位;免疫组织化学及原位杂交方法检测肾组织TGF-β1mRNA和蛋白水平的表达。结果正常大鼠肾组织基础的p38MAPK活性(吸光度值)为0.22±0.06。UUO术后1h,p38MAPK即被激活(0.45±0.14,P<0.01),并呈进行性升高,12h时达第1个高峰(0.91±0.07,P<0.01),此后活性逐渐下降;第3天后又进行性升高,第7天达到第2个高峰(0.93±0.06,P<0.01)。TGF-β1的表达在UUO术后1h、3h、6h、12h及24h均无明显增加;在第3天有明显增加(A值,13.55±6.33比基础4.32±1.72,P<0.01);第7天达高峰(26.78±8.77,P<0.01)。梗阻肾肾组织p38MAPK的激活明显早于TGF-β1表达,且p38MAPK早期活性的强弱与肾组织TGF-β1的表达水平相一致。依那普利治疗可以明显抑制p38MAPK活性(下降36%～65%,P<0.01)。
- 余学清祝胜郎娄宁郑勋华董秀清
- 关键词：依那普利梗阻性肾病肾组织蛋白激酶尿路梗阻
- 血管紧张素Ⅱ激活巨噬细胞株p38MAPK信号通路并诱导其增殖被引量：9
- 2005年
- 目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)激活巨噬细胞p38MAPK信号通路的模式变化及其对巨噬细胞株增殖的影响。方法:用Westernblot测定细胞p38MAPK磷酸化表达;用细胞免疫组化观察细胞p38MAPK激活后核移位;用MTT法观察细胞增殖。结果:AngⅡ(1μmol/L)可诱导RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化表达,15-30分钟达到高峰,随时间呈峰形变化。AngⅡ呈剂量依赖性诱导RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化。p38MAPK特异性抑制剂SB202190可显著抑制RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化,并呈剂量依赖性。AngⅡ可诱导RAW264.7细胞增殖,SB202190可显著抑制AngⅡ诱导的RAW264.7细胞增殖。结论:AngⅡ可激活RAW264.7巨噬细胞株p38MAPK信号通路,并通过p38MAPK信号通路调控RAW264.7细胞增殖。
- 娄宁余学清祝胜郎郑勋华董秀清
- 关键词：巨噬细胞肾纤维化
- Smad2/3在糖尿病小鼠肾组织中的表达和活化
- 目的研究Smad2/3信号蛋白在小鼠糖尿病肾病肾组织中的表达和活化及可能的作用。方法采用STZ腹腔注射诱导小鼠糖尿病模型。用免疫组织化学方法检测糖尿病小鼠肾组织磷酸化Smad2/3的定位和表达以及α-SMA的表达,用RT...
- 祝胜郎余学清孙辽娄宁郑勋华董秀清
- 文献传递
- 糖基化终产物对肾小管上皮细胞TGF-β/Smads信号通路及其基质生成的影响
- 目的从TGF—β/Smads信号通路的角度,探讨糖基化终产物促进肾小管上皮细胞转分化及基质生成的分子机制。方法糖基化终产物(AGE—BSA)的制备:牛血清白蛋白(BSA40mg/ml)溶解于含有0.2M D-葡萄糖的PB...
- 孙辽余学清祝胜郎陈文芳娄宁贾占军王欣窦献蕊李晓艳
- 文献传递
- p38MAPK在大鼠梗阻性肾病肾组织中的表达及可能作用被引量：16
- 2004年
- 目的 :探讨p38MAPK在大鼠梗阻性肾病模型肾组织中的表达及其在肾脏纤维化发病机制中的作用。方法 :采用单侧输尿管结扎制造梗阻性肾病模型 ,分别于造模后 1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d、14d、2 1d、2 8d取肾组织 ,应用免疫沉淀结合特异性底物磷酸化法测定肾组织p38MAPK活性 ,用免疫组织化学法检测磷酸化p38MAPK在肾组织中的表达 ;用免疫组织化学及原位杂交方法检测肾组织TGFβ1mRNA和蛋白水平的表达。结果 :正常对照组大鼠肾组织有一定的p38MAPK基础活性 (吸光度A值 ) (0 2 2± 0 0 6 )。UUO术后 1h ,p38MAPK即被激活(0 4 5± 0 14vs对照组 ,P <0 0 5 ) ,12h时达第一个高峰 (0 91± 0 0 7vs对照组 ,P <0 0 1) ,此后活性逐渐下降 ,3d后又进行性升高 ,7d达到第二个高峰 (0 93± 0 0 6vs对照组 ,P <0 0 1) ,此后又缓慢下降 ,2 8d降至最低水平 (0 12± 0 0 2 )。而TGFβ1的表达在UUO术后 1h、3h、6h、12h及 2 4h无明显增加 ,第 3d有明显增加 (13 5 5 %± 6 33%vs对照组 ,P <0 0 5 ) ,第 7d达高峰 (2 6 78%± 8 77%vs对照组 ,P <0 0 1) ,第 2 8d表达最少。梗阻肾肾组织p38MAPK的激活明显早于TGFβ1表达且p38MAPK早期活性水平与TGFβ1的表达水平呈正相关 ;
- 祝胜郎余学清娄宁郑勋华李涌泉
- 关键词：尿道梗阻P38MAP激酶肾纤维化
- 血管紧张素Ⅱ通过p38丝裂原蛋白激酶信号通路诱导巨噬细胞骨调素基因的上调表达被引量：10
- 2004年
- 目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激巨噬细胞骨调素(OPN)基因表达的模式变化,及p38丝裂原蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在AngⅡ上调表达骨调素中的作用。方法 用反转录聚合酶反应(RT-PCR)测定AngⅡ体外刺激RAW264.7细胞骨调素基因表达及p38MAPK特异抑制剂SB202190的影响;用Western印迹测定Ang Ⅱ(1 μmol/L)诱导RAW264.7细胞p38MAPK及其转录因子-激活转录因子2(ATF2)表达的时间模式及SB202190对AngⅡ(1 μmol/L)诱导RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化表达的影响。结果 (1)AngⅡ(1 μmol/L)诱导RAW264.7细胞骨调素基因表达呈时间依赖性,3 h骨调素表达略有升高,6、12、24 h骨调素分别升高0.9、2.3及2.4倍(P<0.01);而24 h阴性对照无明显变化,说明骨调素的表达呈诱导分泌性。(2)AngⅡ诱导RAW264.7细胞骨调素基因表达呈剂量依赖性,AngⅡ(1 μmol/L)孵育12 h即可诱导骨调素显著表达,升高2.6倍(P<0.01)。(3)SB202190(5 μmoL/L)在AngⅡ(1 μmol/L)刺激前30 min加入培养基抑制作用最明显,共同孵育12 h,抑制率达到61.7％(P<0.01);而同时和刺激后120 min加入SB202190(5 μmol/L),抑制作用不明显,抑制率分别为20.9％和20.1％。(4)不同浓度SB202190 1、5、10 μmol/L在AngⅡ(1μmol/L)刺激前30 min加入培养基,共同孵育12 h。
- 娄宁余学清祝胜郎郑勋华董秀清李晓艳
- 关键词：信号通路巨噬细胞基因表达
- 晚期糖基化终产物通过p38MAPK依赖和非依赖途径活化Smad信号通路并诱导肾小管上皮细胞发生转分化
- 目的研究AGE修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)在诱导肾小管上皮细胞发生转分化中的作用及信号转导机制。方法将培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)与不同浓度(0,50,100和200μg/ml)的AGE修饰牛血清白蛋...
- 祝胜郎余学清孙辽娄宁陈文芳董秀清
- 文献传递
- 消耗还原型谷胱甘肽抑制血管紧张素Ⅱ激活巨噬细胞c-Jun/ATF-2及NF-κB被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨还原型谷胱甘肽 (GSH)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )激活巨噬细胞转录因子c -Jun/ATF - 2及NF -κB中的作用。方法 :用荧光分光光度法测定细胞内GSH含量 ;用丁基硫堇硫氧胺 (BSO)消耗细胞内GSH ;用免疫印迹法测定细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达及NF -κBp6 5表达 ;用凝胶滞留法测定细胞NF -κB活性 ;用细胞免疫组化观察细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达的时间模式。结果 :AngⅡ (1μmol/L)刺激 30 - 6 0min可降低RAW2 6 4 7细胞内GSH ;而后GSH逐渐适应性恢复。同时 ,AngⅡ刺激 6 0min ,呈剂量依赖性降低RAW 2 6 4 7细胞内GSH。GSH特异性消耗剂BSO(0 5mmol/L)与RAW 2 6 4 7细胞共同孵育 18h ,即可完全消耗细胞内GSH。AngⅡ (1μmol/L)可诱导RAW 2 6 4 7巨噬细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达 ;BSO预先完全消耗细胞内GSH ,AngⅡ (1μmol/L)不能诱导巨噬细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化。同样 ,AngⅡ (1μmol/L)可激活RAW 2 6 4 7巨噬细胞NF -κB ;BSO预先完全消耗细胞内GSH ,AngⅡ (1μmol/L)不能激活巨噬细胞NF -κB。结论 :还原型谷胱甘肽可能参与调控巨噬细胞转录因子c-Jun/ATF - 2及NF
- 娄宁余学清祝胜郎董秀清
- 关键词：谷胱甘肽NF-ΚB巨噬细胞
- 晚期糖基化终产物通过p38信号通路诱导肾小管上皮细胞表达TGFβ1
- 目的研究p38丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)在AGE修饰牛血清白蛋白(AGE—BSA)诱导肾小管上皮细胞表达TGFβ1中的作用。方法将培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)与不同浓度(0,50,100和200μg/m...
- 祝胜郎余学清孙辽娄宁陈文芳董秀清
- 文献传递
