唐斯
- 作品数：21 被引量：58H指数：4
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- 定期无偿献血者T细胞免疫功能的研究被引量：8
- 2010年
- 目的通过对定期无偿全血捐献者、定期无偿血小板捐献者2个特殊健康人群的T细胞数量以及细胞活化、细胞因子分泌功能的研究,评价定期献血对机体T细胞免疫功能的影响。方法采用流式细胞术对3组人群(定期无偿全血捐献者、定期无偿血小板捐献者、对照组)外周血中T细胞总数、CD4+T细胞群及CD8+T细胞群进行数量分析;分离外周血淋巴细胞体外培养,加丝裂原植物凝集素PHA刺激T细胞活化,流式细胞术检测CD4+CD25+活化T细胞群;Lum inex 100多功能液相分析平台检测细胞因子IL-2的分泌量。结果定期无偿全血捐献组及定期无偿血小板捐献组的T细胞总数及CD4+T细胞群、CD8+T细胞群的数量与对照组的差异无统计学意义(P>0.05);T细胞活化指标CD25+、CD69+均在培养d4(72h)表达最高;定期无偿捐献全血组CD4+CD25+活化T细胞以及IL-2分泌量与对照组的差异无统计学意义(P>0.05);定期无偿捐献血小板组CD4+CD25+活化T细胞以及IL-2的分泌量高于对照组(P<0.05)。结论机体通过强大的正负免疫调节,使定期献血者T细胞的数量和功能维持稳定状态。
- 李桢熊文唐斯程良红程曦
- 关键词：T细胞免疫功能流式细胞术细胞活化
- 人白介素2体外诱生与检测方法的建立被引量：1
- 2008年
- 本研究旨在建立流式磁珠免疫荧光方法,并通过Luminex 100多功能液相分析平台对细胞培养上清液中的IL-2进行定量分析。用密度梯度离心法从ACD抗凝人外周血中分离淋巴细胞,用植物凝集素刺激其分化,在48小时后收集培养上清液,于-20℃冻存待测。用Luminex 100多功能液相分析平台检测IL-2标准品以及样品的相关荧光单位值(RFU),通过标准曲线求出样本中IL-2浓度。结果表明:得出标准品系列的回归方程为Lg(RFU)=1.547+0.867LgC。方差分析显示F=301.7427,p<0.05(ν=6);回归系数t检验显示,t=17.3707(ν=6),p<0.05。结论:建立了人IL-2体外诱生和检测的方法。该方法所得标准曲线有统计学意义。细胞上清液中的IL-2含量(对数)与荧光强度(对数)之间有直线关系。
- 李桢张文琳唐斯程曦程良红张印则
- 关键词：白细胞介素2LUMINEX淋巴细胞植物凝集素
- HLA-B＊2736等位基因的序列分析被引量：3
- 2007年
- 使用FLOW-SSO、PCR-SSP以及测序等分型技术,发现一个与HLA-B*270401基因相关的未知基因。设计基因特异性引物单独扩增B*27基因的外显子2-5,包括内含子2-4,并进行双向测序,分析与B*270401基因序列的差异。该基因的扩增产物为1815bp。与B*270401相比在外显子3和4共有10个碱基的改变,从而使相应氨基酸发生错义或同义突变。碱基634A→C(密码子130丝氨酸→精氨酸);670A→T(密码子142苏氨酸→丝氨酸);683G→T(密码子146色氨酸→亮氨酸);698A→T(密码子151谷氨酸→缬氨酸);774G→C(密码子176谷氨酸→天冬氨酸);776C→A(密码子177苏氨酸→赖氨酸);781C→G(密码子179谷氨酰胺→谷氨酸);789G→T(密码子181丙氨酸同义突变);1438C→T(密码子206甘氨酸同义突变);1449G→C(密码子210甘氨酸→丙氨酸)。在IMGT/HLA数据库中B*27组只有3个基因(B*270502/2706/2732)提交了内含子序列。该未知基因的内含子2序列与B*2706相同,显示了与B*27组基因的同源性,但其同源性在内含子3、4均未得到支持,与B*27组基因相比,内含子3的第106个碱基C→G,碱基168缺失,碱基179G→A,碱基536G→A;内含子4中碱基82T→C。但其内含子3、4序列却与B*070201完全相同。该基因序列已提交GenBank,编号为被DQ915176,被WHO确认为HLA-B*2736等位基因。
- 李桢邹红岩邵超鹏唐斯王大明程良红
- 关键词：人类白细胞抗原基因外显子内含子
- 定期无偿献血者NK细胞免疫功能的研究
- 2009年
- 目的分析定期无偿全血捐献者、血小板捐献者的NK细胞数量以及细胞毒活性，评价定期捐血对机体NK细胞免疫功能的影响。方法采用流式细胞术对三组人群（定期无偿全血、血小板和首次捐血者，后者为对照组）外周血中NK细胞群的数量进行分析。采用效／靶细胞混合培养的方法，计算出NK细胞对靶细胞的杀伤率。结果全血捐献者NK细胞数量及其对靶细胞的杀伤率与对照组的差异无统计学意义（P〉0.05）；血小板捐献者NK细胞数量较对照组明显增高（P〈0.05），而NK细胞杀伤活性明显降低（P〈0.05）。结论本研究结果说明，全血捐献者献血间隔期较长（〉3个月），机体有足够的时间来恢复NK细胞数量及其细胞毒性，而血小板捐献者献血间隔期短，机体通过NK细胞数量的增加来调节由于其功能降低对机体造成的影响。
- 李桢熊文程良红唐斯王飞张艳艳
- 关键词：NK细胞免疫功能细胞毒性流式细胞术
- ZZAP和CDP放散DAT阳性红细胞的效果评价被引量：4
- 2009年
- 目的:比较ZZAP和CDP两种放散方法放散DAT(+)红细胞的效果及放散后红细胞吸收自身抗体的能力,为DAT(+)红细胞的抗体放散方法提供依据.方法:收集本站送检的DAT(+)交叉配血标本,选择抗-IgG型与抗-(IgG+C3d)复合型各20例作为研究对象,分别采用ZZAP和CDP两种放散方法进行抗体放散试验,对放散后红细胞分别进行DAT试验;用放散后的红细胞吸收患者血浆自身抗体后进行交叉配血试验,评价自身抗体的吸收效果.结果:抗-(IgG+C3d)复合型DAT(+)红细胞用ZZAP和CDP放散效果无差别,ZZAP放散抗-IgG型的效果好于抗-(IgG+C3d)复合型(P<0.05),CDP放散抗-IgG型与抗-(IgG+C3d)复合型的效果无差异;ZZAP放散抗-IgG型和抗-(IgG+C3d)复合型DAT(+)红细胞后的抗体吸收效果均好于CDP(P<0.05),ZZAP和CDP放散抗-IgG型DAT(+)红细胞后的吸收效果无明显差异,CDP放散抗-IgG型和抗-(IgG+C3d)复合型DAT(+)红细胞后的吸收效果无差别,ZZAP放散抗-IgG型DAT(+)红细胞后的吸收效果均好于抗-(IgG+C3d)复合型(P<0.05).结论:抗-(IgG+C3d)复合型DAT(+)红细胞用两种方法均不能很好的解离自身抗体,但对抗-IgG型自身抗体的解离用ZZAP好于CDP,提示临床交叉配血试验中对抗-(IgG+C3d)复合型自身抗体最好选择盲配原则的配血方案,对抗-IgG型自身抗体用ZZAP进行吸收放散效果较好.
- 何子毅刘赴平刘景春车嘉林师清莲刘仁强唐斯陈晨
- 关键词：二硫苏糖醇磷酸氯喹放散试验COOMBS试验
- 三种DNA快速抽提试剂的比较
- 目的笔者选用了3种常见的不同厂家生产的DNA 快速抽提试剂盒从全血中抽提基因组DNA,比较其抽提效果并探讨它们适用于何种下游分子生物学实验。方法取 48份EOTA抗凝全血,分别用Gentra、Pel-freez、Qia-...
- 唐斯王大明李桢
- 文献传递
- 基因组DNA高通量提取技术及其在骨髓库捐献者样本HLA基因分型中的应用
- 目的：研究和建立从全血EDTA抗凝样本中高通量提取基因组DNA的有效方法,以常规应用于Luminex rSSO HLA流式磁珠基因分型.方法：使用2mL深孔板和TECAN DNA全自动工作站,从288份骨髓捐献者样本中提...
- WANG Da-ming王大明TANG Si唐斯LI Zhen李桢CHENG Xi程曦GAO Su-qing高素青DENG Zhi-hui邓志辉
- 关键词：骨髓移植血液样本HLA基因分型
- HLA新基因B"非汉字符号"610携带者家系B淋巴细胞系的建立被引量：2
- 2004年
- 目的 建立HLA新基因B 5 6 10携带者家系的B淋巴细胞系 ,用于该基因的研究和确证。方法 采集外周血分离淋巴细胞 ,用EBV感染淋巴细胞后 ,加入含 2 0 %FBS、2 μg/mlCsA的RPMI16 4 0进行培养。 结果 5位家庭成员的无限增殖化B淋巴细胞系新基因稳定遗传。结论 建立的无限增殖化B淋巴细胞系的HLA新基因B 5 6 10遗传稳定 ,为大量保存和繁殖珍贵的生物医学材料奠定了基础。
- 李桢邹红岩吴国光程良红王大明唐斯
- 关键词：人类白细胞抗原EB病毒胎牛血清环孢菌素AB淋巴细胞系
- 无限增殖化人类B淋巴细胞基因组DNA提取方法的建立
- 2006年
- 目的建立从无限增殖化人类B淋巴细胞提取基因组DNA的方法,并评价提取DNA的质量和产量.方法用DNA提取试剂盒提取基因组DNA;用紫外分光光度法测定DNA样本的纯度和产量;用琼脂糖电泳法测定DNA样本的完整性.结果 （1～2）×10^7个B淋巴细胞提取基因组DNA的平均浓度为174±61.3 ng/μl,DNA的纯度平均为1.73±0.047（A260nm/A280nm）,琼脂糖电泳测得DNA分子量约为21 kb,且无污染.结论该方法可以从无限增殖化人类B淋巴细胞提取高质量高浓度的基因组DNA.
- 唐斯李桢王大明
- 关键词：基因组DNAHLA基因分型
- 两种从陈旧血中抽提基因组DNA方法的比较被引量：6
- 2007年
- 目的比较盐析法和磁珠法从陈旧血中抽提基因组DNA的效果和特点,以便常规用于骨髓库HLA基因分型。方法使用TECAN全自动工作站为平台,分别用Gentra盐析法DNA抽提试剂盒和Promega磁珠法DNA抽提试剂,从48份陈旧全血样本中抽提基因组DNA,提取的基因组DNA均溶于100μlTE中;然后用紫外分光光度计测定其产量和纯度,并用琼脂糖凝胶电泳法测定DNA样本的完整性。结果从400μl陈旧全血中提取基因组DNA,用盐析法获得的DNA含量为28.6±8.7ng/μl,A260/A280值平均为1.63±0.209;用磁珠法获得的DNA含量为94.2±10.3ng/μl,A260-A320/A280-A320值平均为1.821±0.102;琼脂糖电泳法检测表明两种方法提取的DNA的分子量均大于15kb。结论使用磁珠法从陈旧血中所获得的DNA的产量和纯度明显高于盐析法,适合于骨髓资料库陈旧血样本的常规HLA基因分型实验以及下游的分子生物学实验。
- 唐斯王大明李桢高素青邓志辉
- 关键词：盐析法磁珠法基因组DNA
