周勇志
- 作品数：213 被引量：261H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金基础研究重大项目前期研究专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学交通运输工程更多>>
- 一种亚洲璃眼蜱的组胺结合蛋白HaHBP的基因序列和重组表达与应用
- 本发明公开了亚洲璃眼蜱组胺结合蛋白HaHBP的基因序列和在大肠杆菌中重组表达方法。以亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的EST数据为基础，利用RACE方法克隆得到其编码基因，基因全长序列为902bp，编码227个氨基酸残基...
- 周金林李庄石磊周勇志郭凤璕
- 弓形虫新的表面抗原SRS20A的鉴定及特征化被引量：1
- 2023年
- 克隆弓形虫上海SHR株SRS20A基因,构建原核表达体系,通过诱导表达和蛋白纯化,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,对蛋白进行特征化鉴定。采用PCR技术扩增弓形虫SRS20A基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠埃希菌(E.coli),IPTG诱导目的蛋白表达,采用镍亲和层析法获得纯化蛋白并免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,使用弓形虫阳性血清检测SRS20A蛋白的反应原性,应用纯化的rSRS20A蛋白通过ELISA方法对猪临床样品进行检测,利用Western blot技术检测多克隆抗体与弓形虫天然蛋白的反应性,通过间接免疫荧光观察SRS20A蛋白在虫体内的定位情况。成功从弓形虫基因组中扩增出SRS20A目的基因,构建了pET-30a-SRS20A重组质粒,利用小鼠感染弓形虫的阳性血清可以特异性识别重组蛋白rSRS20A,ELISA试验表明rSRS20A可以与猪临床血清特异性反应,证明SRS20A具有良好的反应原性。制备并获得了抗SRS20A重组蛋白的多克隆抗体,通过Western blot可检测出弓形虫天然蛋白SRS20A的特异性条带。通过间接免疫荧光方法鉴定SRS20A蛋白定位在弓形虫速殖子表面。通过分子生物学方法鉴定及特征化了一个新的弓形虫速殖子表面抗原SRS20A,为进一步深入研究弓形虫SRS20A功能奠定基础。
- 林晓幸李威曹杰周勇志王亚楠周金林张厚双
- 关键词：弓形虫
- 克隆伊氏锥虫不同VAT的某些生物学特性研究
- 1999年
- 对伊氏锥虫安徽株单虫克隆ＳｈＴａｔｌ感染兔体后３、６、９和１８ｄ所分离的４个抗原变异体ＳｈＴａｔｌ．１、ＳｈＴａｔｌ．２、ＳｈＴａｔｌ．３和ＳｈＴａｔｌ．５的生长特征、对人血清敏感性和对小白鼠致病力三个方面进行了比较研究。结果表明不同抗原变异体的生物学特性不完全一致，它提示伊氏锥虫的抗原变异可能伴有虫体其它生理生化特性的改变。
- 周金林沈杰周勇志
- 关键词：伊氏锥虫
- 蜱组胺结合蛋白与渗透肽TAT在杆状病毒表达体系中的融合表达和功能分析被引量：1
- 2015年
- 为真核融合表达亚洲璃眼蜱(H.asiaticum)唾液腺中的组胺结合蛋白(HBP)与渗透肽TAT,并研究其生物学活性,本研究将编码HBP的基因片段与编码渗透肽TAT基因片段通过酶切位点Eco RⅠ酶切连接后克隆至真核表达载体p Fast Bac HTa中,构建重组杆粒r Bac-HBP-TAT,转染至sf9昆虫细胞中,制备重组病毒并进行融合蛋白的表达。经SDS-PAGE、western blot和间接免疫荧光试验检测结果表明,HBP-TAT在Bac-to-Bac杆状病毒系统中获得稳定表达,融合蛋白约为31 ku。此外,组胺结合试验证明HBP-TAT具有与组胺结合的能力。本研究为研制新型蜱源抗组胺药物提供了实验依据。
- 王亚楠曹杰周勇志张厚双龚海燕周金林
- 镰形扇头蜱、亚洲璃眼蜱和血红扇头蜱Actin基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2010年
- 狄清仝彩玲郭凤璕周勇志陈铁桥周金林
- 关键词：镰形扇头蜱血红扇头蜱N基因节肢动物门病原微生物
- 弓形虫Real-time PCR检测方法的建立和初步应用被引量：5
- 2011年
- 根据已发表的弓形虫529 bp高拷贝序列,设计特异性引物和探针,建立TaqMan探针法的实时荧光定量PCR检测方法。将该方法用于360份临床样本的检测,并与常规PCR和环介导等温扩增(LAMP)技术进行对比分析。结果表明:Real-time PCR检测的阳性率(11.11%)高于LAMP(7.5%)和常规PCR(3.61%)。采用本实验室建立的Real-time PCR,对收集于不同地区4种动物的750份临床样本检测发现,不同种类动物血液样本中均可检测到弓形虫感染,其中羊的感染率最高(17.8%),猪次之(4.22%),牛较低(1.98%),犬最低(1.37%)。
- 蔺智兵张厚双曹杰周勇志张彦雷李国清周金林
- 关键词：弓形虫荧光实时定量PCR
- 田鼠巴贝斯虫过氧化物氧化还原酶分子及其基因和应用
- 本发明公开了一种田鼠巴贝斯虫过氧化物氧化还原酶分子的氨基酸序列。本发明还公开了田鼠巴贝斯虫过氧化物氧化还原酶分子基因，包含编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。本发明田鼠巴贝斯虫过氧化物氧化还原酶分子，在...
- 张厚双周金林王中华龚海燕曹杰周勇志
- 文献传递
- 长角血蜱三种miRNAs在不同发育阶段和器官中的表达分析被引量：1
- 2017年
- 为了研究长角血蜱体内miRNAs的生物学功能,本研究从饱血后差异表达的miRNAs中筛选了3种miRNAs(mi R-278,Let-7和Bantam),采用荧光定量PCR方法检测了3种miRNAs在蜱的各个发育阶段和成蜱四种不同器官中的表达量;经miRNAs化学拮抗剂的注射,进行相应miRNAs的干扰试验。结果显示,在蜱体内获得了miRNA-278,Let-7和Bantam的前体序列,三种miRNAs的表达量在饱血后存在差异,在若蜱和成蜱的脂肪体中表达量最高,但Bantam表达量在各个阶段均较miR-278和Let-7低。结果表明,3种miRNAs的表达具有阶段和器官特异性,miR-278对长角血蜱成蜱的上体率和致死率影响显著。本研究可为抗蜱新药或疫苗的研发提供新的途径。
- 徐畅王方方龚海燕曹杰周勇志张厚双周金林李国清
- 关键词：长角血蜱MIRNA实时PCRRNA干扰
- 镰形扇头蜱卵巢中丝氨酸蛋白酶抑制分子群的克隆和生物信息学分析
- 2019年
- 丝氨酸蛋白酶抑制分子(serine protease inhibitor,Serpin)参与多种生物学过程,对蜱的吸血发育、生殖产卵和先天免疫系统反应等具有重要作用,在蜱体内以多分子形式存在。为了研究蜱生殖相关的Serpin分子群,本研究通过构建镰形扇头蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides)卵巢转录组测序数据库,发现并克隆了10条Serpin家族基因(RhS),其中3条为分泌型Serpin,6条为细胞内Serpin和1条亲缘关系较远的Serpin。本研究通过生物信息学方法分析其理化性质、遗传进化关系,预测其结构和功能,为镰形扇头蜱Serpin分子群的功能解析和应用研究提供了重要基础。
- 许正茂周勇志曹杰张厚双龚海燕巴音查汗周金林
- 关键词：镰形扇头蜱克隆
- 上海市内几种野生动物及警犬体表蜱的调查被引量：6
- 2004年
- 周勇志周金林裴恩乐虞坚颐施新泉
- 关键词：野生动物警犬发育特性
