周伟光
- 作品数：53 被引量：239H指数：10
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省重点科学建设项目内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 鸭病毒性肠炎病毒基因文库的构建及其核衣壳蛋白基因的发现、克隆与鉴定
- 提取鸭病毒性肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)基因组DNA,超声波处理使其片段化,经补平末端后,分级分离并收集各部份DNA片段,与质粒pBluescript Ⅱ SK(+)连接,转化大肠杆菌DH...
- 程安春汪铭书文明周伟光郭宇飞贾仁勇徐超袁桂萍刘一尘
- 关键词：鸭病毒性肠炎病毒基因文库核衣壳蛋白基因基因克隆
- 文献传递
- 牛传染性鼻气管炎病毒gE基因SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 目的建立1种特异、灵敏、高效的检测IBRV gE基因的荧光定量PCR方法,并为鉴别IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技术手段。方法根据IBRV gE基因保守序列,设计一对引物,建立荧光定量PCR反应体系和反应条件,利用10倍梯度稀释病毒DNA进行荧光定量PCR扩增,以检测本试验建立的荧光定量PCR的灵敏度。用IBRV、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞、牛血清等进行特异性检测。用模拟样品进行临床应用试验。结果本试验建立的荧光定量PCR方法,其灵敏度约为70 DNA拷贝/μL,除了IBRV从其他病毒和样品未扩增出曲线,临床模拟样品检测结果为0.03TCID50。结论本试验建立的荧光定量PCR方法具有特异性强、灵敏性高、快速,低污染等优点,因此临床上可以用于IBRV的检测和病原学调查。
- 孙志明周伟光陈玉惠高晶希尼尼根关平原
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒荧光定量PCR
- 鸭肠炎病毒CHv强毒株超微结构研究被引量：6
- 2007年
- 将鸭成纤维细胞培养的鸭肠炎病毒（DEV）,经超声处理、高速冷冻差速离心后,采用酒石酸钾-甘油非线性密度梯度超速离心,收集病毒蛋白带,3%磷钨酸负染后观察病毒粒子形态。结果表明：病毒粒子主要集中在40%-50%酒石酸钾-甘油缓冲液交界层。电镜下,病毒粒子纯净,具有疱疹病毒典型形态结构,剖面六角,外观轮廓清楚。成熟病毒粒子直径约150-266nm,病毒囊膜、核衣壳和核心清晰可见;囊膜外层较内层着色略深,且可见尚未形成完整囊膜的柄状拖尾结构。多数病毒粒子以单核衣壳为主,一定数量的病毒具有双核衣壳,偶见三核衣壳,核衣壳直径为100-150nm,呈现致密圆形、半圆形或马蹄形等类型。在核衣壳外和囊膜之间可见明显的亮晕。核心DNA电子染色较深,集中分布,直径40-65nm。本文获得的清晰DEV负染超微结构照片,为该病毒结构生物学的研究提供了重要依据。
- 贾仁勇程安春汪铭书郭宇飞文明徐超袁桂萍周伟光周毅陈孝跃
- 关键词：鸭肠炎病毒超微结构
- 鸭瘟病毒弱毒株在免疫雏鸭体内的分布和排毒规律被引量：23
- 2005年
- 鸭瘟病毒(DPV)弱毒Cha株经皮下、口服和滴鼻3种途径免疫1日龄雏鸭,应用聚合酶链反应(PCR)检测了病毒在体内分布和排毒规律。Cha株免疫雏鸭后,对血液、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、肌肉、骨髓、粪便和食道共19种组织PCR检测结果如下(1)皮下接种雏鸭后4h,即可在心、肝、脾、肾、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑和小脑共10种组织中检出DPV的DNA;8h后,所有采取的组织器官均可检测到DPV的DNA。(2)口服接种雏鸭后4h,可在舌和食道中检测到DPV的DNA;8h后,可在心、肝、脾、肾、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共12种组织器官中检出DPV的DNA。(3)滴鼻接种雏鸭后4h,未能在各种组织中检出DPV的DNA;8h后,可在心、肝、脾、肾、胸腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共11种组织中检测到DPV的DNA。(4)在3种免疫途径中,检出时间最早和检出率最高的组织器官为肝脏、脑(大脑、小脑和延脑);3种途径免疫的鸭,从免疫后12h至21d均能从所有采集的组织中检测出DPVDNA。
- 程安春汪铭书刘菲宋涌袁桂萍韩晓英徐超廖永洪文明周伟光贾仁勇
- 关键词：排毒规律鸭瘟病毒弱毒株种雏鸭延脑皮下接
- 靶向TLR2基因的siRNA对牛疱疹病毒Ⅰ型增殖规律的影响被引量：2
- 2016年
- 为研究牛胚胎气管（EBTr）细胞Toll样受体2（TLR2）在牛疱疹病毒Ⅰ型（BHV-1）感染的天然免疫反应中的作用,本研究利用小分子干扰RNA（si RNA）技术,以TLR2为靶向设计并合成了3条si RNA干扰序列,用SYBR GreenⅠ定量PCR方法筛选出最佳的si RNA-TLR2干扰片段,继而转染EBTr细胞使其TLR2沉默后感染BHV-1,用Taq Man定量PCR方法检测BHV-1不同时间点的增殖变化。结果显示,与对照组相比转染后第48小时si TLR2A、si TLR2B和si TLR2C在EBTr细胞中分别对TLR2 m RNA表达量下调了35.05%、69.20%和84.85%,筛选出的si TLR2C片段在第12~72小时可以显著抑制TLR2 m RNA的表达（P〈0.05）,用该片段转染EBTr细胞再感染BHV-1后第6~72小时,si RNA-TLR2组BHV-1 DNA拷贝数显著低于对照组BHV-1 DNA拷贝数（P〈0.05）。本试验成功筛选出了特异性抑制EBTr细胞TLR2基因的si RNA片段,并证明抑制TLR2的表达可降低BHV-1的增殖能力。
- 周伟光呼凤丽徐丽媛张志飞
- 关键词：SIRNA定量PCR
- 果蝇嗅觉基因的筛选、鉴定及其功能的研究
- 果蝇嗅觉系统的特点及相应技术的独特结合，使果蝇成为研究嗅觉的理想模式系统。本文采用SG18.1-Gal4/UAS基因筛选系统对改变果蝇嗅觉发育的基因进行了大规模筛选，并对分离到的Akap200进行了功能鉴定，旨在通过对果...
- 周伟光
- 关键词：果蝇嗅觉基因筛选
- 牛外周血单核巨噬细胞的分离、培养与鉴定被引量：6
- 2013年
- 试验旨在为深入研究单核巨噬细胞的生物学特性和免疫学功能提供材料。应用牛淋巴细胞分离液从牛外周血中分离牛外周血单个核细胞,用含10%胎牛血清的RPMI1640营养液培养5d,在倒置显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测单核巨噬细胞表面特征性标志CD14。结果表明,获得的贴壁细胞具备巨噬细胞的形态学特征及免疫表型。通过形态学观察和流式细胞术鉴定可知,该试验成功获得了牛外周血单核巨噬细胞。
- 陈玉惠周伟光高晶高龙冀显亮希尼尼根
- 关键词：单核巨噬细胞流式细胞术形态学观察
- BHV-1在牛胚气管细胞中的增殖规律研究
- 2016年
- 为研究牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)在牛胚气管细胞(EBTr)中的生长特性和增殖规律,参考文献设计合成特异性引物和探针,建立了TaqMan实时荧光定量PCR方法,检测BHV-1感染EBTr细胞6、12、24、48、72、96、120、144h后病毒的增殖规律,并观察对应时间点的细胞病变(CPE)。结果显示,用100TCID_(50)的BHV-1感染EBTr细胞,48h后开始出现细胞病变,72h细胞病变明显,120h细胞大部分变圆,开始脱落,144h细胞大面积脱落、崩解。实时荧光定量PCR检测结果表明,BHV-1感染EBTr在6h^24h内,病毒缓慢增殖,48h^96h,病毒增殖速度加快,拷贝数呈对数增长,120h^144h,BHV-1的含量仍然呈现升高的趋势,但增长速度变慢。结果证明,BHV-1能够在EBTr中产生CPE,而且CPE程度与病毒DNA增殖规律一致,该结果可以为深入研究BHV-1对EBTr细胞的致病机理提供基础资料。
- 徐丽媛张志飞周伟光呼凤丽
- 关键词：增殖规律实时荧光定量PCR
- 鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的电镜观察
- 为研究鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)CH强毒株在感染鸭体内的分布和形态学发生规律,我们应用透射电镜和超薄切片技术对人工感染DEV的成年鸭各组织器官进行观察。结果表明:感染后12h在脾...
- 袁桂萍程安春汪铭书周毅刘菲郭宇飞韩晓英廖永洪徐超周伟光文明贾仁勇陈孝跃
- 文献传递
- 鹅细小病毒强毒PCR检测方法的建立被引量：23
- 2004年
- 参照GenBank中登录的鹅细小病毒 (GPV)B株的全基因序列 ,针对GPV的VP3保守基因设计了 1对引物 ,建立了GPV的PCR检测方法。采用该方法检测GPV能够扩增出预期大小约 4 41bp的特异性片段 ,而对鸭瘟病毒 (DPV)、鹅源致病性大肠埃希氏菌 (E .coli)O8和O1、雏鹅新型病毒性肠炎病毒 (NGVEV)呈阴性反应。该法检测GPV核酸的灵敏度可达 0 .4 7pg ;对GPV强毒皮下注射感染雏鹅各器官的检测结果表明 ,感染后 8h即可从心、肝病料中检出病毒DNA ,感染后 2 4h可从延髓、胸腺、胰腺、十二指肠、空肠、盲肠、腔上囊、心、肝、脾、肺、肾、血液、小脑、直肠、肌肉、粪便中检出GPVDNA ,感染 4 8h后可从骨髓中检出病毒DNA ,感染 312h后仍能从十二指肠、空肠、盲肠、心、肝、肾、粪便中检出病毒DNA。病毒分离阳性的可疑病料PCR检测为阳性 ,对临床送检病料的检测结果表明 ,PCR的敏感性显著高于病毒分离。
- 黄诚程安春汪铭书刘菲韩新峰王刚周伟光文明贾仁勇郭宇飞陈孝跃周毅
- 关键词：PCR鹅细小病毒
