吴本传
- 作品数：66 被引量：94H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项国际科技合作重点项目计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 定量检测组织型纤溶酶原激活剂夹心ELISA方法的建立被引量：3
- 2006年
- 目的:建立灵敏、特异的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)定量测定方法,为血栓性疾病和肿瘤性疾病的早期诊断及疗效评估提供辅助手段。方法:采用抗t-PA多克隆抗体包被酶联板、HRP标记抗t-PA单克隆抗体为标记抗体、重组t-PA为标准品,建立定量测定t-PA的夹心ELISA双抗体法。以t-PA测定的特异性、灵敏性和重复性评价夹心ELISA测定法。结果:夹心ELISA测定法可检测t-PA浓度为0.5ng/mL的样品,不同样品的组内和组间的变异系数分别为4.7%和8.4%。采用夹心ELISA法测定40份正常人血浆,t-PA的平均含量为(4±2.1)ng/mL。结论:夹心ELISA测定法具有灵敏性高、特异性强的特点,可用于人血浆中t-PA水平的定量测定。
- 吴本传李世崇刘红刘兴茂叶玲玲陈昭烈
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂ELISA双抗体夹心法
- 用微量细胞病变抑制法观察三种天然人干扰素的协同抗病毒作用被引量：2
- 1994年
- 用微量细胞病变抑制法观察天然α，β，γ干扰素（ｎｈｕＩＦＮ－α，β，γ）在体外诱导ＨＥｐ－２细胞的抗病毒协同作用。ｎＨｕＩＦＮ－γ和ｎＨｕＩＦＮ－α或ｎＨｕＩＦＮ－β共同作用于ＨＥｐ－２细胞表现为抗病毒协同增强效应；ｎＨｕＩＦＮ－α和ｎＨｕＩＦＮ－β共同作用于ＨＥｐ－２细胞只表现为抗病毒协同相加效应。实验结果表明：ｎＨｕＩＦＮ－γ和ｎＨｕＩＦＮ－α或ｎＨｕＩＦＮ－β的抗病毒协同增强作用，与不同干扰素（ＩＦＮ）处理ＨＥｐ－２的顺序及ＩＦＮ的浓度比例有关；ｎＨｕＩＦＮ－γ与ｎＨｕＩＦＮ－α的抗病毒协同增强作用是细胞接受ＩＦＮ作用后早期即发生的现象。
- 陈昭烈吴本传郭智霞肖成祖
- 关键词：干扰素
- 基因修饰的胚胎干细胞作为种子细胞构建血管化心肌组织
- 胚胎干细胞(embryonic stem cells．ESC)具有多能性,可在体外无限增殖,又能分化为心肌细胞,是目前用于构建工程化心肌组织最有前途的细胞来源之一.ESC应用于临床的最大障碍之一就是其致瘤性.如何有效地获...
- 何文俊李世崇刘红叶玲玲刘兴茂王启伟吴本传陈昭烈
- 关键词：基因修饰胚胎干细胞
- 抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体的表达、鉴定及活性分析被引量：3
- 2005年
- 设计并合成多个 6 0bp左右的DNA小片段 ,经重叠延伸PCR扩增获得 16 4 0bp的抗CD3 抗CD2 0双特异性单链抗体完整基因片段 ,将其克隆入真核定点表达载体pcDNA5 FRT中 ,脂质体法转染Flp_InTM CHO细胞 ,获得稳定表达细胞株 ,目的蛋白在上清中的表达量约为 30 0 μg L。采用Ni_NTA柱对其进行了纯化 ,经SDS_PAGE蛋白电泳及Western_blot分析结果表明 ,含组氨酸标签的目的蛋白的分子量约为 70kD ,与预期结果一致。活细胞间接免疫荧光实验和玫瑰花环实验证明抗CD3 抗CD2 0双特异性单链抗体具有与Ramous(CD2 0 +)及Jurkat(CD3+)细胞特异性结合的活性。光学显微镜下可以观察到抗CD3 抗CD2 0双特异性单链抗体可以有效介导人外周血淋巴细胞裂解B淋巴瘤细胞Ramous。以上工作为进一步了解抗CD3 抗CD2 0双特异性单链抗体的体内体外生物学活性奠定了基础。
- 于蕊李世崇吴本传刘红叶玲玲陈昭烈
- 关键词：双特异性单链抗体坚定活性分析
- HEK293F细胞的无载体固定化培养及重组腺病毒的高效扩增
- 本文介绍了利用HEK293F细胞在搅拌培养体系中悬浮培养具有聚集、形成细胞团的倾向,通过对HEK293F细胞团的控制,结合旋转滤器截留培养体系中HEK293F细胞团,建立了HEK293F细胞的无载体固定化培养技术.
- 陈昭烈刘红吴本传熊福银黄培堂
- 关键词：重组腺病毒人胚肾细胞基因治疗固定化培养
- 文献传递
- 在多孔胶原支架上构建三维工程的心肌组织(英文)被引量：2
- 2004年
- 背景:目前已有转化的SV40细胞系、C2C12成肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞以及胚胎干细胞用于修复哺乳动物心脏的细胞移植治疗,然而细胞移植治疗对严重缺失或损伤心肌结构的治疗的作用却不大。组织工程技术为此类心肌疾病的研究及治疗提供了新的可能性,目前已有可替代和改善骨、软骨、肾、肝、神经及皮肤等组织和器官的生物合成结构物。目的:探索多孔胶原作为构建三维工程心肌组织支架材料的可行性。设计:非随机、对照的实验研究。地点和对象:实验地点:军事医学科学院生物工程研究所。动物:清洁级1日龄Wistar大鼠400～500只,雌雄不限,体质量8～10g;成年Wistar大鼠五六只,雌雄不限,体质量250g,由军事医学科学院实验动物中心提供,饲养温度22～26℃,湿度40%～60%。干预:在无菌条件下,将经胰蛋白酶消化获得的新生鼠心肌细胞分别接种于三维多孔胶原支架和培养板上,比较心肌细胞在两种培养模式的代谢差异。主要观察指标:检测葡萄糖比消耗率、乳酸比产率、乳酸转化率、肌酸激酶及乳酸脱氢酶活力变化。结果:培养于多孔胶原支架上的心肌细胞的代谢特性近似于心肌细胞在培养板上培养的二维生长模式。结论:心肌细胞与多孔胶原支架形成了具有自律性同步收缩的三维工程心肌组织。
- 刘兴茂陈昭烈刘红吴本传熊福银胥照平
- 关键词：生物医学工程心肌胶原
- 一种抗人B细胞淋巴瘤的单链双特异性抗体
- 本发明公开了一种抗人B细胞淋巴瘤的单链双特异性抗体。用3个链间连接肽(Gly<Sub>4</Sub>Ser)<Sub>3</Sub>将抗人B细胞淋巴瘤CD20抗体的轻链可变区(VL<Sub>CD20</Sub>)和重链可...
- 陈昭烈于蕊李世崇吴本传刘红叶玲玲刘兴茂王启伟
- 文献传递
- Ca^2＋对悬浮培养HEK293细胞的细胞团形成、细胞生长和代谢的影响被引量：1
- 2006年
- 利用HEK293细胞在悬浮培养中具有聚集成团的体外培养特性，在250ml的Bellco的搅拌培养体系中，以细胞团粒径、细胞粒径、细胞数、细胞活力、葡萄糖比消耗速率（qglc）、乳酸比生产速率（qlac）和乳酸对葡萄糖得率（Ylac／glc）为观察指标，考察了HEK293细胞在Ca^2＋浓度设置为0μmol／L、250μmol／L、500μmol／L、750μmol／L和1000μmol／L的搅拌培养体系中的细胞团形成、细胞生长和代谢。实验发现：培养基中的Ca^2＋浓度决定着HEK293细胞在悬浮培养中能否形成细胞团并影响着细胞团的粒径分布和细胞团内细胞相互连接的紧密程度；在250～1000μmol／L的Ca^2＋浓度范围内，眦K293细胞团的平均粒径与培养基中的Ca^2＋浓度成正比；Ca^2＋浓度对以细胞团的形式悬浮培养的HEK293细胞的生长和代谢无明显的影响。实验结果提示，Ca^2＋浓度是调节HEK293细胞团粒径分布、维持悬浮细胞团中HEK293细胞正常生长和代谢的有效控制参数。
- 刘兴茂刘红叶玲玲吴本传李世崇王启伟倪小平陈昭烈
- 关键词：钙离子HEK293细胞代谢
- 鼠疫耶尔森氏菌天然F1抗原的提取、纯化方法
- 本发明公开了鼠疫耶尔森氏菌天然F1抗原的一种提取、纯化方法。该方法采用玻璃珠处理和饱和硫酸铵沉淀与分子筛过滤相结合的方案，成功地从鼠疫耶尔森氏菌的培养物中提取、纯化出高纯度的天然F1抗原。经免疫学检测和动物保护实验证明，...
- 王效义王棠朱紫雯祁芝珍吴本传郭兆彪杨永海崔百忠王祖陨王虎杨瑞馥
- 文献传递
- 重组组织型纤溶酶原激活剂大规模纯化及部分性质的研究被引量：5
- 2000年
- 收集产重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的CHO工程细胞灌流培养上清 ,经过Streamline扩张柱床和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化后 ,最后产品的比活性达到 6 0 0 0 0 0IU mg蛋白 ,rt PA总活性回收率在 98%左右 ,经还原SDS PAGE分析主要为高相对分子质量rt PA蛋白 ,HPLC分析达到色谱纯 ,N端 15个氨基酸序列和pI与文献报道的一致。蛋白质印迹实验证实具有t
- 吴本传陈昭烈李世崇刘红林福玉张培黄培堂
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂纯化
