刘镘利
- 作品数：14 被引量：83H指数：6
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目陕西省中医药管理局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 淫羊藿苷对转化生长因子-β1诱导的大鼠睾丸间质细胞损伤的保护作用被引量：6
- 2016年
- 目的:研究淫羊藿苷(Icariin)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠睾丸间质细胞损伤的保护作用。方法:利用4-甲偶氮唑蓝法筛选Icariin对TGF-β1诱导的间质细胞损伤保护作用的最适浓度,用放射免疫法和3H释放实验检测Icariin作用前后损伤的间质细胞中雌激素(E2)含量和芳香化酶P450arom活性,采用荧光漂白后恢复实验检测Icariin对损伤的间质细胞间缝隙连接通讯(GJIC)功能的影响。结果:不同浓度Icariin均可提高TGF-β1作用后睾丸间质细胞的活细胞率,其中,20μg/ml时即可发挥作用,而160μg/ml时达到最佳;用160μg/ml浓度Icariin干预TGF-β1损伤的睾丸间质细胞后,间质细胞中E2的生成和芳香化酶活性显著增加(P<0.01),且间质细胞间的荧光恢复率也明显提高(P<0.01)。结论:Icariin可通过增加E2合成有效阻止TGF-β1对间质细胞的损伤,这种影响可能通过部分上调雌激素合成的关键酶P450arom活性实现;且Icariin还具有改善间质细胞间GJIC功能的作用。
- 杨倩倩马静刘镘利曹亮李颖琪刘阿庆董海军
- 关键词：淫羊藿苷转化生长因子-Β1睾丸间质细胞细胞缝隙连接通讯
- 姜黄素对人脐静脉内皮细胞损伤模型MMP-9表达的抑制作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨姜黄素对人脐静脉内皮细胞损伤模型基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的抑制作用。方法进行人脐静脉内皮细胞的体外培养和鉴定。加入相同浓度TNF-α诱导半个小时后加入不同浓度的姜黄素处理细胞24h。采用免疫细胞化学染色和ELISA的方法测定细胞MMP-9的表达。结果经TNF-α诱导过的人脐静脉内皮细胞加入不同浓度的姜黄素(6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml)作用24h后均能明显抑制细胞MMP-9的表达,并且随着浓度的升高这种抑制作用明显增强。结论姜黄素能明显降低TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞MMP-9的表达。
- 张筠王宗仁刘镘利
- 关键词：姜黄素人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶9
- 温阳生精汤含药血清对肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中雌激素分泌的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察温阳生精汤含药血清对腺嘌呤致雄性肾阳虚不育大鼠睾丸间质细胞中雌二醇(es-tradiol,E2)合成以及影响其合成的芳香化酶(cytochrome P450aromatase,P450arom)活性、其编码基因CYP19表达的影响,从蛋白和mRNA水平探讨温阳生精汤含药血清治疗肾阳虚不育的机制。方法将实验大鼠随机分为4组,每组5只,即正常组及温阳生精汤高、中、低浓度组。各组大鼠分别以生理盐水和高、中、低浓度中药连续灌胃10天。末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清。从肾阳虚大鼠体内分别分离并纯化睾丸间质细胞,经鉴定后原代培养,随机分为5组,即空白对照组,模型组,中药高、中、低浓度(1.2、1.0、0.8g/mL)组,用放射免疫法测定细胞培养液中E2含量,氚水释放实验检测P450arom在细胞中的活性,同时用Western blot法和荧光定量PCR法分别测定CYP19蛋白和mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组中间质细胞上清中E2的含量明显减少,同时伴随P450arom活性抑制,以及CYP19蛋白和mRNA表达的显著减少(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,经温阳生精汤含药血清干预后可显著增加间质细胞中E2合成量,上调P450arom活性,同时在蛋白和mRNA水平上调细胞中CYP19表达,并具有部分剂量依赖性(P<0.01,P<0.05)。结论温阳生精汤含药血清可以有效提高肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中E2的合成,并可能部分通过上调P450arom活性,提高CYP19基因表达实现,这可能是其治疗男性肾阳虚不育的机制之一。
- 刘镘利王宗仁南亚昀马亮马静
- 关键词：中药含药血清间质细胞芳香化酶CYP19基因肾阳虚
- 二仙汤加味治疗绝经后微血管性心绞痛疗效观察被引量：29
- 2012年
- 目的:观察二仙汤加味治疗绝经后微血管性心绞痛的疗效。方法:将80例绝经后微血管性心绞痛患者随机分为常规治疗组(对照组)50例,伍用二仙汤治疗组(治疗组)30例。治疗4周后,比较两组心绞痛发作频率和心电图运动试验,包括ST段压低幅度的变化。结果:治疗组心绞痛发作频率和心电图运动试验结果显著改善,与对照组比较存在显著差异。结论:常规药物合二仙汤加味对绝经后微血管性心绞痛治疗安全有效。
- 张玉芬陈艳秋陈钧刘镘利马静
- 关键词：微血管性心绞痛二仙汤加味心电图
- 姜黄素对肿瘤坏死因子诱导单核细胞趋化蛋白-1表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)引起的血管内皮细胞分泌单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响.方法:采用原代培养方法获得人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),随机分为对照组、TNF-α刺激组和TNF-α+姜黄素组.先用TNF-α刺激血管内皮细胞0.5h,再加入不同浓度的姜黄素(6.25,12.5,25,50和100mg/L)共同孵育1h与单纯TNF-α刺激作对照,采用MTT法、ELISA法和RT-PCR法检测姜黄素对细胞及其上清液中MCP-1蛋白表达的影响.结果:HUVEC经TNF-α刺激0.5h后,其MCP-1表达为159.37±4.47,与对照组94.13±6.07相比明显增强(P<0.01);再与不同浓度姜黄素共同孵育1h后,MCP-1在细胞中的表达分别为:137.63±4.50,121.72±1.96,116.08±3.93和101.62±4.12,与单纯给予TNF-α刺激相比明显减弱(P<0.01),且随着浓度升高有递增的趋势.结论:姜黄素通过抑制炎症因子MCP-1的表达调节血管内皮细胞的炎症反应,从而发挥保护血管内皮细胞,防止动脉粥样硬化的作用.
- 刘镘利王宗仁张筠
- 关键词：姜黄素单核细胞趋化因子脐静脉内皮细胞肿瘤坏死因子
- TGF-β1对大鼠睾丸Leydig细胞功能的损伤及Icariin的保护效应
- 目的
转化生长因子-β1/(Transforming growth factor-β1, TGF-β1/)是一种以多肽形式存在的细胞因子，属于TGF-β超家族成员。现已证实TGF-β1在睾丸的不同发育阶段均有表达...
- 刘镘利
- 关键词：芳香化酶连接蛋白缝隙连接细胞间通讯睾丸
- 文献传递
- 人脐静脉内皮细胞损伤过程中核转录因子κB及单核细胞趋化蛋白1mRNA的变化被引量：1
- 2008年
- 背景:既往实验表明,炎性因子与内皮细胞的功能有密切的关系,观察保护和损伤因素对体外培养人血管内皮细胞炎性因子作用的报道较少。目的:实验拟观察姜黄素和肿瘤坏死因子α对人脐静脉内皮细胞分泌核因子κB以及单核细胞趋化蛋白1mRNA的影响。设计、时间及地点:细胞观察实验,于2006-12/2007-08在解放军第四军医大学组织工程实验室完成。材料:健康人脐带由解放军第四军医大学唐都医院提供。内皮细胞培养采用M199完全培养基。方法:实验分为3组,正常对照组为无血清M199培养基;肿瘤坏死因子α组:在正常细胞培养液中加入浓度为10μg/L的肿瘤坏死因子α诱导损伤1.5h;姜黄素组:先在培养液中加入10μg/L的肿瘤坏死因子α30min诱导损伤,再分别加入终浓度为6.25,12.5,25,50,100mg/L的姜黄素孵育1h。主要观察指标:①四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度姜黄素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响。②免疫细胞化学染色法观察胞核内核转录因子κB的表达。③反转录-聚合酶链反应检测单核细胞趋化蛋白1mRNA的表达。结果:姜黄素可以提高肿瘤坏死因子α诱导损伤的人脐静脉内皮细胞活性(P<0.01),并呈一定剂量依赖性。肿瘤坏死因子α可刺激核因子κBp65表达的强度,姜黄素可以减少核因子κBp65的表达。与正常对照组相比,肿瘤坏死因子α作用30min后,单核细胞趋化蛋白1mRNA相对表达量明显增高(P<0.01);加入不同浓度的姜黄素作用1h后,单核细胞趋化蛋白1mRNA相对表达量明显减低(P<0.05,P<0.01)。结论:姜黄素对损伤的内皮细胞具有保护作用,其作用途径可能通过抑制核转录因子κB活性,并下调单核细胞趋化蛋白1mRNA的表达,从而阻滞了单核细胞的聚集。
- 刘镘利王宗仁张筠雷战军
- 关键词：核转录因子ΚB人脐静脉内皮细胞肿瘤坏死因子Α单核细胞趋化蛋白1
- 二仙汤加味对去卵巢大鼠血压及性激素含量的影响被引量：6
- 2011年
- 目的观察二仙汤加味对去卵巢大鼠血压及性激素含量的影响。方法 40只成年雌性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、二仙汤加味组、替勃龙组。观察大鼠实验前后体质量、饮食等一般情况变化,应用无创血压测量仪测量大鼠尾动脉血压,放射免疫法测定实验大鼠血清雌二醇(E2)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)含量。结果与模型组相比,二仙汤加味能显著降低去卵巢大鼠体质量,降低其收缩压与舒张压,提高血清中E2含量,降低LH与FSH水平。结论二仙汤加味可降低去卵巢大鼠收缩压与舒张压,且升高其体内E2含量。
- 马亮王宗仁南亚昀刘华剑刘镘利马静
- 关键词：二仙汤加味去卵巢血压促黄体激素促卵泡激素
- TGF-β1对大鼠睾丸Leydig细胞间连接蛋白43介导缝隙连接通讯功能的影响被引量：10
- 2012年
- 目的:观察转化生长因子TGF-β1对成年大鼠睾丸Leydig细胞间连接蛋白Cx43表达以及由Cx43介导的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)功能的影响,旨在探讨TGF-β1对Leydig细胞的影响是否与其改变细胞间GJIC功能相关。方法:将原代培养纯化的Leydig细胞分为6组:实验组分别以1、2、5、10 ng/ml的TGF-β1处理细胞20 h,空白对照组以含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液处理细胞,部分实验中以GJIC抑制剂甘珀酸(Carbenox-olone)处理细胞作为阳性对照组。采用免疫荧光法和Western印迹观察Cx43在细胞中的定位和表达变化,用荧光漂白恢复实验(FRAP)检测细胞间GJIC功能的改变。结果:Cx43表达呈斑点状散在分布于Leydig细胞的胞质和胞膜中,TGF-β1处理20 h后,Cx43在胞质中的表达强度随着TGF-β1浓度的增加较空白对照组明显增强,而其在胞膜中的表达则无明显改变。Western印迹结果显示磷酸化状态的Cx43随着TGF-β1浓度增加表现出较空白对照明显增强的趋势(P<0.05),而非磷酸化状态则无显著差异。FRAP结果显示经5 ng/ml TGF-β1作用20 h后细胞内荧光强度较空白对照明显减弱,具有显著性差异(P<0.01),且其平均荧光恢复率仅为(43.58±1.87)%。结论:TGF-β1可显著下调Leydig细胞间的GJIC功能,这种抑制作用可能通过增加其连接蛋白Cx43在细胞质中的表达,提高其磷酸化水平来实现。
- 刘镘利张志红王宗仁马静
- 关键词：LEYDIG细胞连接蛋白43缝隙连接细胞间通讯
- 金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育模型大鼠精子质量与性激素含量的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:观察金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育大鼠精子质量及性激素含量的影响。方法:30只SD大鼠随机分为空白对照组、腺嘌呤组、金匮肾气丸组。应用自动精子质量分析仪检测实验大鼠的精子质量(精子密度、活率及活动度);同时应用放射免疫法测定血清睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量;透射电镜观察实验大鼠睾丸组织精子鞭毛密度,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞等结构。结果:与腺嘌呤组比较,金匮肾气丸组大鼠肾阳虚症状显著改善,精子密度、活率及活动度明显提高(P<0.05);金匮肾气丸组大鼠血清T含量明显提高(P<0.05),LH、FSH含量降低(P<0.05);电镜下金匮肾气丸组大鼠精子数量明显增多,大鼠睾丸组织受损的支持细胞明显改善。结论:金匮肾气丸可提高腺嘌呤致不育模型大鼠的精子质量,其机制之一可能是通过提高血清中T的含量及保护受损的支持细胞这一间接作用实现的。
- 马亮贾敏南亚昀刘镘利王宗仁马静
- 关键词：金匮肾气丸腺嘌呤不育肾阳虚精子
