刘金相
- 作品数：21 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种牙鲆CD59抗菌肽的重组表达和纯化复性方法
- 本发明的目的是提供一种牙鲆CD59抗菌肽的重组表达及纯化复性的方法，本发明针对现阶段技术中抗菌肽的合成成本高、工序复杂、合成产量低等不足，本发明利用基因克隆技术获得牙鲆CD59基因成熟肽的编码序列，构建表达载体，转化入表...
- 于海洋周纳宇张全启李朔刘金相王志刚贺艳
- 一种在鱼类生殖系细胞中特异性表达基因的3’UTR区序列及其应用
- 本发明提供一种在牙鲆原始生殖细胞中调节基因表达的3′UTR区序列，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1；该3′UTR区序列用于调控基因在牙鲆原始生殖细胞中进行表达。本发明的3′UTR区序列为牙鲆鱼特有的序列，可以用于鲆鲽...
- 张全启汪波王慧贞齐洁王旭波于海洋贺艳刘金相王志刚
- 文献传递
- 一种建立稳定转基因的牙鲆胚胎细胞株方法
- 本发明提供一种建立稳定转基因的牙鲆胚胎细胞株方法，是把牙鲆广泛表达的β‑actin启动子启动的增强型绿色荧光蛋白且能表达G418抗性蛋白的质粒转染牙鲆胚胎细胞。24h后,荧光显微镜下观察EGFP表达，并通过G418筛选得...
- 汪波张全启王慧贞杨帆齐洁王志刚王旭波于海洋贺艳刘金相
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- 一种金鲳全基因组育种芯片及应用
- 本发明公开了一种金鲳全基因组育种芯片及应用，该芯片的制备方法包括以下步骤：获得金鲳高质量SNP位点；对获得的位点过滤，然后将位点上下游序列与金鲳基因组其他任何区域进行比对，过滤；将金鲳基因组划分为多个独立区域，计算区域内...
- 刘金相张全启王志刚于海洋孙慧邦
- 一种牙鲆CD59抗菌肽的重组表达和纯化复性方法
- 本发明的目的是提供一种牙鲆CD59抗菌肽的重组表达及纯化复性的方法，本发明针对现阶段技术中抗菌肽的合成成本高、工序复杂、合成产量低等不足，本发明利用基因克隆技术获得牙鲆CD59基因成熟肽的编码序列，构建表达载体，转化入表...
- 于海洋周纳宇张全启李朔刘金相王志刚贺艳
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- 一种在鱼类生殖系细胞中特异性表达基因的3’UTR区序列及其应用
- 本发明提供一种在牙鲆原始生殖细胞中调节基因表达的3′UTR区序列，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1；该3′UTR区序列用于调控基因在牙鲆原始生殖细胞中进行表达。本发明的3′UTR区序列为牙鲆鱼特有的序列，可以用于鲆鲽...
- 张全启汪波王慧贞齐洁王旭波于海洋贺艳刘金相王志刚
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- 牙鲆PIK3R3-like基因的表达分析及重组表达被引量：1
- 2021年
- 本文从牙鲆(Paralichthys olivaceus)中鉴定得到了PI3K家族的成员之一——PIK3R3-like,并分析其可能为PIK3R3的亚型。由于其部分外显子在转录或修饰时被删除,导致该基因会产生一种较短的mRNA(PoPIK3R3-like-Ⅱ),与完整的转录组相比缺失21 nt。对PoPIK3R3-like的可变剪接长链(PoPIK3R3-like-Ⅰ)进行序列分析发现该基因包含一个1425 bp的开放性阅读框,共编码474个氨基酸,编码的蛋白共包含三个结构域,分别是一个nSH2结构域、一个iSH2结构域和一个cSH2结构域。同源性分析结果显示PoPIK3R3-like-Ⅰ、PoPIK3R3-like-Ⅱ均与其它硬骨鱼的PIK3R3-like相似度较高,系统进化分析显示PoPIK3R3-like与硬骨鱼聚为一支,与两栖类、鸟类和哺乳类相距较远。作者通过qRT-PCR检测了PoPIK3R3-like在各组织中的表达分布,发现其在牙鲆的各组织中均有表达,但在鳃和脑中表达量较高,使用迟缓爱德华氏菌侵染牙鲆鳃细胞及单核-巨噬细胞后,PoPIK3R3-like表达量分别呈现先上升再下降和显著上升的趋势,提示该基因在牙鲆抵抗迟缓爱德华氏菌感染相关的免疫应答中可能发挥作用。利用原核表达的方法在大肠杆菌中异源表达了PoPIK3R3-like-Ⅰ的重组蛋白,SDS-PAGE结果显示得到的重组蛋白与预测大小一致,蛋白纯化结果显示得到的蛋白纯度较高,可用于下一步PIK3R3-like基因功能的相关研究。
- 王欣桐王宣刚孙敏敏孔祥福刘金相王志刚王志刚
- 关键词：牙鲆QRT-PCR迟缓爱德华氏菌
- 一种与牙鲆耐热性相关的SNP位点及其应用
- 发明的目的是提供一种与牙鲆耐热性相关的SNP位点，所述的SNP位点是核酸序列为SEQ ID NO:1的HSP70基因的第47/48位，其碱基为AA或A/DEL；第65位，其碱基为T或C；第185位，其碱基为C或T；第26...
- 张全启刘金相于海洋王旭波刘旭东齐洁王志刚贺艳
- 文献传递
- 牙鲆头肾巨噬细胞的分离培养与鉴定被引量：3
- 2021年
- 本研究使用密度梯度离心法从牙鲆(Paralichthys olivaceus)头肾中分离得到了巨噬细胞,通过差速贴壁法对获得的细胞进行纯化,后续经过优化培养条件和培养过程,采用L-15培养基(Gibco)、5%胎牛血清、1%青–链霉素、1%非必需氨基酸、30%L929细胞培养基在24℃、无CO2的条件下进行培养。显微镜观察及吉姆萨染色结果显示,贴壁细胞具备巨噬细胞形态特征,使用巨噬细胞特异性基因标记mpeg1基因对细胞进行鉴定,在分离得到的细胞中成功扩增出该基因。本研究为体外研究巨噬细胞功能、深入了解硬骨鱼先天性免疫奠定了基础。
- 王宣刚孔祥福王欣桐李恒顺刘金相王志刚王志刚
- 关键词：牙鲆巨噬细胞原代培养
- 对牙鲆进行一代选择之后的育种效果分析被引量：5
- 2012年
- 为评估牙鲆(Paralichthys olivaceus)人工选育的育种效果,以2007年经过家系选育的具有优良生长性状的第一代个体为亲本,依据巢式交配设计,构建了第二代10个半同胞家系和20个全同胞家系。在养殖4个月后进行生长性状的测定,对比测试结果表明,选育第二代群体的平均体质量比未经选育的对照提高2.91g,遗传增益为11.25%,显著高于未经选育的群体(p<0.05);选育群体平均全长较未选育的对照提高1.33cm,遗传增益为10.36%,极显著高于未经选育的群体(p<0.01),表明第一代对生长性状的选育达到良好的效果。选育第二代的体重、全长和体高的遗传力为分别为0.656～0.731,0.481～0.742,0.480～0.651,均属于高等遗传力,显示牙鲆选择育种仍旧可以取得较快的遗传进展,具有较大的选择潜力。
- 刘旭东刘志鹏王亚楠刘金相王志刚刘寿堂张全启
- 关键词：牙鲆选择育种遗传力生长性状
