刘建波
- 作品数：71 被引量：156H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生建筑科学化学工程更多>>
- 猪输血传播病毒流行病学与遗传变异的研究进展
- 本文介绍了猪的输血传播病毒(Torque teno virus，TTV)的病原学和流行病学研究进展以及对病毒遗传变异分析和诊断技术的研究进展。
- 刘建波刘长明
- 关键词：流行病学病原学
- 文献传递
- 抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定
- 为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白用于单抗的制备,以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板,用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白...
- 张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明
- 关键词：重组CAP蛋白单克隆抗体
- 文献传递
- 北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫层析试纸条的研制及初步应用被引量：1
- 2022年
- 为研制一种快速检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的免疫层析试纸条(ICS),本研究以红色乳胶微球偶联的PRRSV N蛋白单克隆抗体(MAb)1H4为检测抗体,并包被在结合垫上,以MAb 1H4和羊抗鼠IgG为捕获抗体,并分别包被在硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,经各反应条件的优化建立了检测PRRSV的乳胶微球ICS。各反应条件优化结果显示,乳胶微球偶联的MAb即检测抗体浓度为1.5 mg/mL,检测线MAb即检测线捕获抗体的浓度为2.0 mg/mL,质控线羊抗鼠IgG即质控线捕获抗体的浓度为1.0 mg/mL。特异性试验结果显示,该方法可特异性检测我国出现的高致病性、NADC30-like、NADC34-like等北美型PRRSV代表株,与欧洲型PRRSV DV疫苗株及猪的其他常见病毒(CSFV、PRV、PCV2、PEDV、TGEV、PPV)均无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对系列稀释PRRSV(10^(5.0) TCID_(50)/mL~2.5×10^(2.0) TCID_(50)/mL)的最低检测限为5×10^(2.0) TCID_(50)/mL,对2倍倍比稀释的重组N蛋白(rN,24000 ng/mL~3.75 ng/mL)的最低检测限为15 ng/mL;重复性试验结果显示,同一批次和不同批次试纸条的检测结果均无差异;对不同类型北美型PRRSV株(高致病性株、NADC30-like株、类高致病性株)感染的猪血清检测结果显示,利用该ICS可以从相应猪血清中检测到不同北美型的PRRSV。对采集的108份疑似PRRSV感染的猪肺组织及血清样品分别采用本研究建立的ICS及本研究室建立的PCR方法检测,结果显示,ICS检测的阳性率为37.03%(40/108),PCR检测的阳性率为42.59%(46/108),二者的总体符合率为83.33%。上述结果表明,该方法可以用于我国PRRSV主要流行株及临床样品的检测。本研究首次以同一株MAb分别作为检测抗体和检测线捕获抗体,建立检测PRRSV的乳胶微球ICS,为现地PRRSV流行病学调查及临床快速检测提供了新的技术手段。
- 李宛生李敏华张洪亮李超许浒付军龚帮俊郭镇洋刘建波彭金美周国辉王倩田志军
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白
- 猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性试验被引量：6
- 2013年
- 猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因编码的Rep/Rep'蛋白与病毒复制酶相关,ORF2编码的Cap蛋白为病毒核衣壳,是病毒保护性抗原。为比较这3种蛋白作为亚单位疫苗的免疫保护性,本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep、-rRep'和-rCap蛋白制备亚单位疫苗及PCV2灭活苗,分组免疫BALB/c鼠进行攻毒,以评价疫苗的免疫保护力。对PCV2-rRep和-rRep'亚单位疫苗免疫鼠血清ELISA抗体检测表明,于免疫后第14 d抗体全部转阳,第35 d抗体效价分别达到1∶42 667和1∶51 200。PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫组于第21 d抗体转阳,第35 d抗体效价分别达1∶2 133和1∶333。攻毒试验表明,PCV2-rCap亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠获得完全保护;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫组无保护作用。血清中和试验表明,PCV2-rCap蛋白亚单位疫苗和PCV2灭活苗免疫鼠血清中和抗体效价达1∶1 600和1∶800;而PCV2-rRep和-rRep'蛋白亚单位疫苗免疫鼠血清无中和病毒能力。该研究表明,PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗具有良好的免疫保护力,可以与PCV2自然感染猪产生的抗Rep蛋白抗体相鉴别,具有良好的开发前景。
- 刘丹王一平吴洪丽危艳武刘建波李胜斌魏萍刘长明
- 关键词：猪圆环病毒2型REP亚单位疫苗免疫保护性
- 猪输血传播病毒流行病学与遗传变异的研究进展
- 人的输血传播病毒(TTV)最早于1997年发现,随后在猪等动物体内相继发现。猪源TTV (PTTV)、猪圆环病毒2型(PCV2)单一感染猪不引起明显的临床症状,因此容易忽视该病的存在,但这两种病原体混合感染却能促进断奶仔...
- 刘建波刘长明
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒特异性SIgA ELISA检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)特异性SIgA ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒包括抗SIgA SC片段的单克隆抗体，所述的单克隆抗体由微生物杂交瘤细胞株2F9分泌产生，所述的杂交瘤细胞株2F9保藏...
- 冯力刘建波时洪艳
- 几种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用
- <正>1引言猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)属于圆环病毒科圆环病毒属,为单股环状共价闭合DNA病毒,基因组为1766～1768nt。该病毒被证实是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征...
- 张志慧危艳武吴洪丽黄立平李胜斌刘建波张辉王一平刘丹刘长明
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Rep'蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位分析
- 背景:猪圆环病毒2型(PCV2)基因组由单股负链闭合环状DNA构成,包含2个大的反义开放阅读框架(ORF1和ORF2), 其中ORF1编码Rep蛋白,参与病毒的复制,是病毒的非结构蛋白;ORF2编码的Cap蛋白是病毒的主...
- 刘丹刘建波吴洪丽王一平危艳武李胜斌魏萍刘长明
- 猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒混合感染的检测及TTV遗传变异分析被引量：5
- 2011年
- 为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,本研究采用PCR方法对采自14个省280份病料样品进行检测,结果显示,TTV1和TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1与TTV2混合感染率为18.2%;PCV1和PCV2阳性率分别为41.1%和37.5%,PCV1与PCV2混合感染率为19.6%;PCV2阳性样品中TTV1和TTV2混合感染率达75.0%。此外,对2株TTV1基因组进行测序,与GenBank中登录的6个TTV1序列比对,相似性结果为67.3%～95.1%;对4株TTV2基因组测序,与GenBank登录的4条TTV2序列比对,相似性为84.7%～90.4%;将TTV1与TTV2进行序列比对,相似性仅为44.0%。TTV1和TTV2基因高变区分别位于520 nt～2 594 nt和720 nt～2 170 nt;TTV1基因保守区位于1 nt～520 nt和2 595 nt～2 800 nt;而TTV2基因保守区位于1 nt～719 nt和2 171 nt～2 800 nt。以上结果表明,我国猪群中存在TTV与PCV2的混合感染,并且两种病毒混合感染引起的相关疾病可能存在协同致病性;TTV1和TTV2基因型差异较大,具有遗传变异多样性的特点。
- 刘建波郭龙军危艳武黄立平吴洪丽刘长明
- 关键词：猪圆环病毒遗传变异分析
- 猪急性腹泻综合征冠状病毒RT-LAMP快速检测方法的建立与应用被引量：6
- 2021年
- 为建立简捷、灵敏的猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)检测方法,本研究针对SADS-CoV N基因片段保守区域设计特异性的反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,经条件优化后显示建立的SADS-CoV RTLAMP检测方法最佳反应条件为64℃,50 min,初步建立SADS-CoV的RT-LAMP快速检测方法。利用该方法检测SADS-CoV、猪流行性腹泻性病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪肠道病毒9型(PEV9),评估其特异性,结果显示除SADS-CoV外,该方法与其它病原无交叉反应,特异性较强;将病毒RNA 10倍倍比稀释后作为模板,利用该RT-LAMP与普通RT-PCR同时检测,结果显示,RTLAMP方法比普通RT-PCR方法的敏感性高103倍,敏感性较高。以同一批次或不同批次的SADS-CoV核酸为模板进行RT-LAMP试验,结果显示RT-LAMP批内批间均可稳定的检出阳性样本,表明该方法具有良好的重复性和稳定性。对经口服感染SADS-CoV和未感染仔猪的临床样本进行检测,结果显示RT-LAMP与普通RT-PCR检测结果高度一致。本实验首次建立的SADS-CoV可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高,操作简便、快速和高通量检测的优点,为临床SADS-CoV感染的快速诊断和综合防控提供检测手段。
- 韩郁茹石达张记宇时洪艳陈建飞张鑫刘建波冯力
- 关键词：N基因
