余乃通 作品数:105 被引量:86 H指数:6 供职机构: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 海南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 自动化与计算机技术 更多>>
甘蔗条螟蜕皮调节转录因子cDNA及其克隆方法与重组应用 本发明属于生物基因工程领域,甘蔗条螟蜕皮调节转录因子<I>CsHR3</I>具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的序列。本发明克隆方法是:从甘蔗条螟预蛹期幼虫中提取总RNA,反转录合成cDNA;根据不同... 刘志昕 张雨良 张树珍 王健华 熊国如 余乃通 王俊刚诺丽花叶病及其病原鉴定 2020年 主要介绍了近年来诺丽植株严重花叶病的发病特征、病毒病原鉴定方法、昆虫传播媒介,并提出相应的防控建议与措施,为有关政府部门和种植户提供重要科学信息。 余乃通 杨焱 蔡志英 刘志昕关键词:病原 症状 利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥2个双链结合蛋白 2018年 CRSPR/Cas9系统可对植物的内源基因进行有效定点编辑,为获得基因缺失突变体提供了新的方向。本研究在双链结合蛋白(ds RNA-binding protein,DRB)DRB3和DRB5两个基因外显子的保守序列设计2个靶点,并构建与t RNA串联的双靶点CRISPR/Cas9表达载体。通过一次转化,获得了DRB3或DRB5单独被编辑或同时被编辑的拟南芥突变体dcl2drb4转基因T_1代植株,为研究DRB3、DRB5是否参与DCL4介导的抗病毒RNA沉默通路奠定基础。 吴坤鑫 武亚丹 张春微 刘志昕 王健华 余乃通 张秀春关键词:拟南芥 产黑普雷沃氏菌糖基转移酶基因的扩增和序列分析 被引量:5 2016年 产黑普雷沃氏菌(Prevotella melaninogenica)属革兰阴性专性厌氧菌,是引起牙周疾病的病原之一。为了研究牙周炎患者产黑普雷沃氏菌是否存在及其分子特征,用棉签刮取患者口腔,沸水-液氮法破碎细胞,同时设计产黑普雷沃氏菌糖基转移酶基因的1对引物,利用常规PCR方法扩增产黑普雷沃氏菌糖基转移酶基因。经NCBI序列相似性比对,发现该患者感染的产黑普雷沃氏菌糖基转移酶基因核苷酸序列与P.melaninogenica ATCC 25845菌株的糖基转移酶基因(Gen Bank accession No.CP002122)同源性最高,达92%;其编码的糖基转移酶部分氨基酸序列与P.melaninogenica菌株的甘露糖糖基转移酶(Gen Bank accession No.WP_013264679)同源性最高,达98%。以糖基转移酶部分氨基酸序列构建系统进化树,结果表明,本试验获得的产黑普雷沃氏菌与其它报道的P.melaninogenica菌株同源性最高,属于同一组(group)。 余乃通 罗志文 龚殿 王健华 刘志昕关键词:糖基转移酶基因 PCR扩增 一种用于检测香蕉条斑病毒GF分离物的RPA引物及检测方法 本发明公开了一种用于检测香蕉条斑病毒GF分离物的RPA引物及检测方法,涉及生物技术领域,本发明针对香蕉条斑病毒GF分离物中外壳蛋白基因的保守序列,设计出了特异性RPA引物、探针、试剂盒,能够对香蕉条斑病毒GF分离物进行准... 余乃通 刘志昕 李俊成 高圣风文献传递 柑橘黄龙病菌亚洲种菌毛装配蛋白基因(PAP)序列分析、原核表达及抗血清制备 被引量:1 2019年 菌毛装配蛋白(Flp pilus assembly protein,PAP)是一种分泌蛋白,参与细菌菌毛的组装,表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,用其菌毛装配蛋白基因(PAP)的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段,序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种(GenBank登录号:CP001677.5)PAP基因序列一致。功能预测表明它含有两个与分泌功能相关的CpaC和Secretin结构域。PCR产物通过Eco RⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体pET32a-PAP。将pET32a-PAP载体转化BL21(DE3)大肠杆菌,经终浓度为1 mmoL/L IPTG诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni^2+-NTA层析柱纯化,并作为抗原腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500~1∶1 000的多克隆抗血清。Western blot分析表明,PAP多克隆抗血清特异性强;以田间样品总蛋白做抗原时,能特异性检测染病样品。本研究为PAP蛋白功能研究和开发柑橘黄龙病菌的蛋白检测产品提供研究基础。 李宾宾 余乃通 杨毅 王健华 张秀春 刘志昕关键词:柑橘黄龙病 抗血清制备 一种椰子叶衰病毒提取装置 本实用新型申请属于提取装置技术领域,具体公开了一种椰子叶衰病毒提取装置,包括壳体,壳体下部设有支架,壳体上部一侧开设有进料口,壳体下部一侧开设有出料口,出料口处设有用于封堵出料口的盖板,壳体上部转动连接竖直的转轴,壳体上... 余乃通 刘志昕 唐庆华 黎维丽 孙海彦文献传递 一种香蕉束顶病毒侵染性克隆及构建方法 本发明公开了一种香蕉束顶病毒侵染性克隆及构建方法。该侵染性克隆包含BBTV各组分的8个过环全长重组质粒,分别为pDNA‑R,pDNA‑U3,pDNA‑S,pDNA‑M,pDNA‑C,pDNA‑N,pSat4,pS2。通过... 余乃通 刘志昕 刘锋 瞿玲 笈小龙 郑贤欣文献传递 一种同时检测香蕉多种病毒的RT-LAMP引物、试剂盒及检测方法 本发明公开了一种同时检测香蕉多种病毒的RT‑LAMP引物、试剂盒及检测方法,涉及香蕉病毒检测技术领域,其技术方案要点是:包括BBTV引物组、BSV引物组、CMV引物组、BBrMV引物组;各引物组均包括相应的外引物对和内引... 余乃通 刘志昕 高圣风 周琴文献传递 一种检测罗非鱼TiLV的RPA引物、探针及试剂盒 本发明公开了一种检测罗非鱼TiLV的RPA引物、探针及试剂盒,涉及生物技术领域,其技术方案要点是:对罗非鱼罗湖病毒(TiLV)的ORF10基因设计特异性RPA引物、探针及试剂盒,能够对罗非鱼罗湖病毒进行准确的定性检测,基... 余乃通 刘志昕 陈中元文献传递